詳細介紹
產品屬性:
英文名稱:PFI-3
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
PFI-3是高效選擇性,可滲透細胞的SMARCA2/4溴結構域抑制劑,Kd值為89nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 純度:98.06% 分子量:321.37 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
香茅彎孢溶質載體家族蛋白21成員1C1抗體Anti-POMT2 Antibody巨噬炎性蛋白1β(MIP1β)
空腸彎曲桿菌電壓門控鈉通道SCN3B蛋白抗體Anti-POMC Antibody巨噬炎性蛋白1α(MIP1α)
黃桿菌屬胞吐分泌蛋白Sec6抗體Anti-PON1 Antibody巨噬來源趨化因子(MDC)
棲熱菌屬神經突觸13抗體Anti-PON1 Antibody巨噬集落激因子(MCSF)
薔薇痂圓孢霉多配體聚糖結合蛋白2抗體Anti-PON1 Antibody巨噬表達基因1蛋白(MPG1)
毛霉屬結合珠蛋白家族3A1抗體Anti-PON1 Antibody巨肌激(MCK)
皺褶莫氏黑粉菌抑癌基因SSDP2抗體Anti-PON1 Antibody靜止Q6硫基氧化1(QSOX1)
淺黃色假單胞菌磷化信號轉導分子SMAD3抗體Anti-PON1 Antibody痙攣性截癱蛋白11(SPG11)
植物乳桿菌絲蛋白抑制劑B4抗體(鱗狀癌抗原)Anti-PON2 Antibody痙攣蛋白(SPAST)
燕麥嗜菌西瓜亞種*鞘磷脂合成2抗體Anti-POR Antibody景天庚糖激(SHPK)
大果毛殼鯊烯環氧抗體Anti-POR Antibody特異性抗原2(SSFA2)
Actinomonospora芳基磺基轉移1抗體Anti-PON2 Antibody蛋白17(Sp17)
炭疽芽胞桿菌腫瘤相關抑制劑1抗體Anti-POR Antibody精脒/精N1-乙酰基轉移2(SAT2)
殺結節鏈霉菌硫酯1抗體Anti-POSTN Antibody精脒/精N1-乙酰基轉移1(SAT1)
大腸埃希菌內臟脂肪組織源性絲蛋白抑制蛋白抗體Anti-POT1 Antibody精氧化(SMOX)
費氏中華根瘤菌沉默調節相關蛋白4抗體Anti-POR Antibody(PB0780)精合(SMS)
P53誘導細胞凋亡抑制蛋白抗體微泡菌屬小鼠支氣管成纖維細胞提取物
型肝炎非結構蛋白5A反式激活蛋白9抗體金雀兒根瘤蒼白桿菌小鼠肺大靜脈內皮細胞提取物
環指蛋白107抗體青枯假單胞菌(不提供)小鼠氣管和支氣管上皮細胞提取物
絲/蘇蛋白激NEK8抗體串珠鐮孢(斜面)小鼠肺動脈成纖維細胞提取物
SMARCA2/4溴結構域抑制劑(PFI-3)閃光口蘑 CalebassineP53蛋白Elisa
Nocardioides agariphilus 4-(p-Biphenylyl)-3-hydroxybutyric acidα淀粉Elisa
維羅納假單胞 Dipalmitin酸性蛋白Elisa
孟氏假單胞 木三糖卵磷脂Elisa
單核增生李斯特氏 Sideroxylin磷脂Elisa
尖孢鐮刀 Robinin堿性磷酸Elisa
大腸桿 Erythristemine堿性蛋白Elisa
黃直絲鏈霉 Reynosin霉Elisa
木賊鐮刀 Foliamenthoic acid磷酸烯式酮酸羧激Elisa
海洋桿 Picrasin B葡萄糖氧化Elisa
維也納原小單孢 Reneilmol次核糖基Elisa
干酪乳桿假植物亞種 桑皮酮H脂蛋白脂Elisa
抱川芽孢桿 Cannabigerol果糖-1,6-二磷酸酯Elisa
灰略紅鏈霉 Kobusone甘油-3-磷酸脫氫Elisa
木霉 石茸酸維生HElisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)