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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 10T|20T|50T|100T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X9562 | 應用領域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司產品僅供科研 | 英文名稱 | Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit |
BIRC5/Survivin variant 凋亡抑制因子5抗體2-丁酮 97%
BK channel BK通道蛋白抗體亞油 99%
BKCa channels 鈣激活通道蛋白抗體1,2,3,4,5,6
BIRC5/Survivin variant 凋亡抑制因子5抗體2-丁酮 97%
BK channel BK通道蛋白抗體亞油 99%
BKCa channels 鈣激活通道蛋白抗體1,2,3,4,5,6
詳細介紹
商品介紹：
在正常細胞中，磷脂酰絲氨酸（PS）只分布在細胞膜脂質雙層的內側，而在細胞凋亡早期，細胞膜中的磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內側翻向外側。Annexin V 是一種分子量為35~36kD 的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，故可通過細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此Annexin V 被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。將Annexin V 進行熒光素PE 標記，以標記了的Annexin V 作為熒光探針，利用熒光顯微鏡或流式細胞儀可檢測細胞凋亡的發生。 7-AAD（7-amino-actinomycin D）是一種核酸染料，它不能通過正常質膜，隨著細胞凋亡、細胞死亡過程，質膜對7-AAD 的通透性逐漸增加，結合細胞凋亡中DNA 的有控降解，在合適波長激發光的激發下可發出明亮的紅色熒光，通過7-AAD 標記DNA 的強弱，將細胞分為三群：7-AAD 強為死亡細胞，7-AAD 弱是凋亡細胞，7-AAD-為正常活力細胞。7-AAD 同PI 有著相似的熒光特性，但其發射波譜較PI 窄，對其他檢測通道的干擾更小，在多色熒光分析中是PI 的佳替代品，可與Annexin V-PE 聯合使用。 本試劑盒可應用于培養細胞凋亡檢測（不推薦用于檢測組織樣本）。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit | 10T|20T|50T|100T | 1～3天 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
基質金屬蛋白3(MMP-3)英文名稱：MMP-3 ELISA Kit丁酰基合成3抗體包裝5g
基質金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)英文名稱：MMP-2/Gelatinase A ELISA Kit脂肪源性亮基肽抗體（血管內皮生長因子誘導蛋白）包裝1g
基質金屬蛋白13(MMP-13)英文名稱：MMP-13 ELISA Kit線粒體凋亡誘導因子2抗體包裝250mg
基質金屬蛋白10(MMP-10)英文名稱：MMP-10 ELISA KitABL2蛋白抗體包裝1g
基質金屬蛋白1(MMP-1)英文名稱：MMP-1 ELISA Kit血管緊張轉換ACE1抗體包裝5g
基質γ羧基谷蛋白(MGP)英文名稱：MGP ELISA Kit血管緊張轉換2抗體包裝100ml
肌激同工MM(CK-MM)英文名稱：CK-MM ELISA KitAcinus抗體包裝25ml
肌激同工MB(CK-MB)英文名稱：CK-MB ELISA Kit醋激1抗體包裝100ml
肌激(CK)英文名稱：CK ELISA Kit促腎上腺皮質激(1-39)抗體包裝25ml
肌生成抑制(MSTN)英文名稱：MSTN ELISA Kit促腎上腺皮質激ACTH(18-39)抗體包裝1g
肌球蛋白重鏈(MHC)英文名稱：MHC ELISA Kit促腎上腺皮質激ACTH (7-23)抗體包裝25g
肌球蛋白(MYS)英文名稱：MYS ELISA Kit活性依賴的神經保護肽抗體包裝100g
肌紅蛋白(MYO/MB)英文名稱：MYO/MB ELISA Kitα1性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體包裝25g
肌酐(Cr)英文名稱：Cr ELISA Kitα1性糖蛋白2抗體（類粘蛋白2）包裝1g
肌鈣蛋白T(Tn-T)英文名稱：Tn-T ELISA Kit磷化通道蛋白2抗體包裝25g
鹽轉運三磷腺苷抗體血紅結合蛋白(HPX)Tofacitinib (CP-690550,Tasocitinib) is a novel inhibitor of JAK3 with IC50 of 1
Annexin V-PE/7-AAD雙染細胞凋亡檢測試劑盒陰溝腸桿（陰溝腸桿陰溝亞種） (6-芐基-6H-吡咯[3,4-B]吡啶-5,7-二酮)富含半胱氨酸型酸性蛋白檢測試劑盒
糞腸球 乙蟲富亮氨酸α2糖蛋白1檢測試劑盒
大麗花輪枝孢（棉花黃萎病） 5-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯鈣泵檢測試劑盒
肺炎克雷伯 4-羥基吖啶鈣離子通道抗體檢測試劑盒
大腸埃希氏桿 5-氯-3-硝基-2-基吡啶鈣調素；鈣調蛋白檢測試劑盒
黑腐皮殼 6-溴喹啉-2-酮鈣調素依賴性蛋白激酶2檢測試劑盒
河北木霉 2-(2-氯乙酰氨基)-5-硝基-2'-氯二苯甲酮鈣網蛋白檢測試劑盒
滑假絲酵母 2-溴-4-甲基-6-氟吡啶鈣衛蛋白檢測試劑盒
香蕉 6-氨基-5-溴煙酸甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶檢測試劑盒
靈芝(紅芝, 赤芝) 2-(1H-吡唑-4-基)乙甘酸-N-甲基轉移酶檢測試劑盒
泰塔溫沙壤土桿 4-甘露聚糖結合凝集素絲氨酸肽酶-2檢測試劑盒
中慢生華癸根瘤 1-(4-三氟甲基嘧啶-2-基)哌甘露聚糖結合凝集素相關絲氨酸蛋白酶檢測試劑盒
肉梭 素C型 6-甲氧基-7-芐氧基喹唑啉-4-酮甘露糖結合蛋白;甘露糖結合凝集素檢測試劑盒
炭黑曲霉 3-叔丁氧酰基氮雜環庚烷甘露糖受體檢測試劑盒
芽胞桿 4-乙氧基-3-硝基吡啶甘油-3-磷酸脫氫酶檢測試劑盒
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