商品介紹:
CCT245737是一個(gè)強(qiáng)的,ATP競爭的CHK1抑制劑,IC50值是30-220nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1489389-18-5 純度:99.17% 分子量:379.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:CHK1抑制劑(CCT245737)
英文名稱:CCT245737
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
毛木耳(紫木耳、黃背木耳)同源盒蛋白MEIS3抗體Human NEK11 ELISA Kit切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)
支氣管敗血波氏菌顆粒分化蛋白抗體Human NEK3 ELISA Kit鞘脂激活蛋白原(PSAP)
運(yùn)動節(jié)桿菌單氧化A+B抗體Human NEK9 ELISA Kit鞘磷脂(SM)
白僵菌膜蛋白相互作用蛋白RGS16抗體Human NELF ELISA Kit鞘激1(SPK1)
釀酒酵母膜型絲蛋白2抗體Human CDKN2A(Cyclin-dependent kinase inhibitor 2A, isoforms 1/2/3) ELISA Kit鞘(SPH)
米曲霉多藥耐藥相關(guān)蛋白8/9/14抗體Human CCK(Cholecystokinin) ELISA Kit橋粒芯糖蛋白3(Dsg-3)
球毛殼Mob1同源蛋白MOBKL2B抗體Human NOG(Noggin) ELISA Kit橋粒芯糖蛋白2(DSG2)
大腸埃希菌Mob1同源蛋白MOBKL2C抗體Human NKTR ELISA Kit橋粒芯糖蛋白1(Dsg-1)
皺紋假單胞菌復(fù)合型表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體Human NKRF ELISA Kit橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)
香菇屬(大斗菇)低密度脂蛋白受體的誘導(dǎo)降解蛋白抗體Human PTHLH(PaRathyroid hormone-related protein) ELISA Kit橋粒糖蛋白2(DSC2)
釀酒酵母鋅指蛋白144抗體Human NLRX1 ELISA Kit羥脯糖蛋白(HRGP)
細(xì)鏈格孢生肌決定因子Myf5抗體Human NLRP2 ELISA Kit羥脯(Hyp)
蠟樣芽胞桿菌 (蠟狀芽胞桿菌)磷化生肌決定因子Myf5抗體Human NMD3 ELISA Kit羥賴糖苷(HOLG)
沙福芽孢桿菌黑皮質(zhì)2受體輔助蛋白2抗體Human NFIL3 ELISA Kit羥賴(Hyl)
頭狀葡萄球菌金屬硫蛋白3抗體Human HSPD1/HSP-60(60 kDa heat shock protein, mitochondrial) ELISA Kit羥甲基戊二單酰還原(HMG-CoAR)
土生類諾卡氏菌絲裂原活化蛋白激MAP4K6抗體Human NEK11 ELISA Kit羥甲基戊二單酰(HMG-CoA)
金黃色葡萄球菌Staphylococcus│aureus 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)鹽川芎
沙門氏菌Salmonella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:刪除;精神管制川芎
CCUG48939=DSM17733=JCM14309資源名稱: 埃塞俄比亞涅斯特連科氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR川楝
CHK1抑制劑(CCT245737)玫瑰暗黃鏈霉 5-甲氧基-1-茚酮細(xì)粒棘球絳蟲抗原Elisa
木賊鐮孢 4-水楊酸環(huán)磷酸腺苷Elisa
土壤短波單胞 胡椒基丁干擾Elisa
球孢白僵 3-基三乙氧基硅烷慶大霉Elisa
熒光假單胞 甲酸-1-乙酯色上皮衍生因子Elisa
解脂假絲酵母解脂變種 1-乙基乙基碳酸酯精氨酸Elisa
谷氨酸棒桿 4-甲基水楊酸瓜氨酸Elisa
微白黃鏈霉 異丁司特鳥氨酸Elisa
奧斯陸莫拉氏 2,4-二內(nèi)皮型一氧化氮合Elisa
暗產(chǎn)色鏈霉 4-三氟甲氧基溴芐尿Elisa
南方正青霉 3-(三氟甲氧基)苯甲血Elisa
食酸戴爾福特 2,5-二血管內(nèi)皮生長因子Elisa
薛瓦酵母 四胎盤生長因子Elisa
甜菜假單胞 3-甲氧基芐環(huán)磷酸鳥苷Elisa
蘇云金芽胞桿鲇澤變種 α-溴-生長Elisa