以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
蛋白酶體抑制劑(Carfilzomib) | proteasome inhibitor | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
英文名稱:proteasome inhibitor 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg Carfilzomib是一種proteasome的不可逆抑制劑,在ANBL-6和RPMI8226細(xì)胞中,IC50值<5nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:868540-17-4 別名:PR-171 純度:99.44% 分子量:719.91 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
深藍(lán)紫色桿菌8號染色體開放閱讀框58抗體Human AMOTL1(Angiomotin-like protein 1) ELISA Kit人緊密連接蛋白1(ZO1)免疫試劑盒
大腸埃希菌8號染色體開放閱讀框74抗體Human PMEL(Melanocyte protein PMEL) ELISA Kit人金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1(ADAMTS1)免疫試劑盒
玉米黑粉菌8號染色體開放閱讀框76抗體Human AKR1C4(Aldo-keto reductase family 1 member C4) ELISA Kit人金屬硫蛋白2(MT-2)免疫試劑盒
香菇Cr048號染色體開放閱讀框77抗體Human KRT16(KeRatin, type I cytoskeletal 16) ELISA Kit人金屬硫蛋白(MT)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌6號染色體開放閱讀框97抗體Human CD68(Macrosialin) ELISA Kit人解整合樣金屬蛋白9(ADAM9)免疫試劑盒
尖孢鐮孢補體C7抗體Human ITGB2(Integrin beta-2) ELISA Kit人解整合樣金屬蛋白8(ADAM8)免疫試劑盒
彩色豆馬勃7號染色體開放閱讀框10抗體Human S100A11(Protein S100-A11) ELISA Kit人解整合樣金屬蛋白33(ADAM33)免疫試劑盒
熒光假單胞菌7號染色體開放閱讀框45抗體Human CD68(Macrosialin) ELISA Kit人解整合樣金屬蛋白19(ADAM19)免疫試劑盒
尖孢鐮刀菌補體C9b抗體Human KRT16(KeRatin, type I cytoskeletal 16) ELISA Kit人解整合樣金屬蛋白15(ADAM15)免疫試劑盒
扁柄側(cè)耳9號染色體開放閱讀框103抗體Human S100A11(Protein S100-A11) ELISA Kit人解整合樣金屬蛋白12(ADAM12)免疫試劑盒
紅曲紅曲9號染色體開放閱讀框131抗體Human ILF3(Interleukin enhancer-binding factor 3) ELISA Kit人解整合樣金屬蛋白10(ADAM10)免疫試劑盒
褐囊蜜環(huán)菌9號染色體開放閱讀框135抗體Human CASP14(Caspase-14) ELISA Kit人解脲脲原體抗體(UU-Ab)免疫試劑盒
釀酒酵母8號染色體開放閱讀框42抗體Human TREML1(Trem-like transcript 1 protein) ELISA Kit人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌8號染色體開放閱讀框44抗體Human KRT10(KeRatin, type I cytoskeletal 10) ELISA Kit人結(jié)核菌(Tuberculin)免疫試劑盒
黑曲霉20號染色體開放閱讀框20抗體Human ARNT(Aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator) ELISA Kit人結(jié)核菌桿抗體IgM(TB-Ab IgM)免疫試劑盒
釀酒酵母4號染色體開放閱讀框46抗體Human SSTR2(Somatostatin receptor type 2) ELISA Kit人結(jié)核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)免疫試劑盒
靈芝Ganoderma│lucidum 質(zhì)量規(guī)格:AR白頭翁皂苷E-2
: AS3.3658資源名稱: 木賊鐮孢 質(zhì)量規(guī)格:AR;98%白頭翁皂苷E-1
出芽短梗霉Auredoasidium│pullulans 質(zhì)量規(guī)格:金屬滴定指示劑麥冬基黃烷A;
蛋白酶體抑制劑(Carfilzomib)臺中金黃桿 2,6-吡啶二羰酰蕈堿型受體M2Elisa
豌豆根瘤(都不提供) 三氟化乙酸絡(luò)合物蕈堿型受體M3Elisa
圓褐固氮 氫二茂鋯α腎上腺能受體Elisa
大腸埃希氏桿 核酸P1 來源于米曲霉抗促甲狀腺受體抗體Elisa
噬組氨節(jié)桿 2-甲硫基甲狀腺抑制性抗體Elisa
變幻青霉 3,5-Difluoroaniline表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白AElisa
鶴羽田戴爾福特 三氟磺酸亞銅(I)苯聯(lián)合體 (2:1)可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白Elisa
戊糖片球 4-(三氟甲硫基)苯磷脂Elisa
孟氏假單胞 2-氟乙氧化型Elisa
淺絳紅鏈霉 L-天冬氨酸-15N白介16Elisa
無 1-乙基-3-甲基咪唑鎓二鹽H+-K+-ATPElisa
宇佐美曲霉 4-甲基-2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖苷干生長因子受體Elisa
圣格奧爾根 1-Boc-2-氨甲基生長分化因子8Elisa
多主葡萄殼 三乙基二磷酸酯G蛋白偶聯(lián)膽汁酸膜受體5Elisa
莖瘤固氮根瘤 魚腥草糖鏈抗原125Elisa