中性紅染色液(液泡系專用)公司正在出售的產品：VEGF-D 血管內皮生長因子D型抗體1,2,4,5-四 95%
VEGFR1 血管內皮生長因子受體1抗體1,2,4,5-四 NMR定量標準品，99.8%(GC)
VEGF Receptor 2/VEGFR2 血管內皮生長因子受體2抗體1,2,3-苯 91%
phospho-VEGF receptor 2 (Tyr951) 化血管內皮生長因子受

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

商品介紹：

公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。

建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
松蘿(標準品)英文名稱： Proteinase K乙酰肝2抗體包裝5g

松蘿；D-地衣(標準品)英文名稱： Proteinase K人血清抗體包裝1g

松塔（標準品）英文名稱： Chymostatin血紅氧合 1/熱休克蛋白32抗體包裝5g

松葉（標準品）英文名稱： Leupeptin 磷化HER3受體抗體包裝1g

松脂二葡萄糖苷（標準品）英文名稱： Pepstatin A microbial磷化組蛋白去乙酰化4/5/7抗體包裝1g

松脂;松脂酚,松脂(標準品)英文名稱： L-(-)-Fucose 異染色質蛋白1-γ抗體包裝100g

松脂二英文名稱： Pectinase組蛋白H1抗體包裝25g

蘇合香（標準品）英文名稱： beta-Amylase組蛋白去乙酰化1抗體包裝5g

蘇木（標準品）英文名稱： beta-AmylaseHAUS3蛋白抗體包裝25g

漿苦味L（標準品）英文名稱： Deoxyribonuclease熱休克蛋白93抗體包裝5g

棗仁（標準品）英文名稱： Taka-Diastase from Aspergillus oryzae 磷化組蛋白去乙酰化3抗體包裝25g

棗仁皂苷A(標準品)英文名稱： Taka-Diastase from Aspergillus oryzae 組蛋白H2B抗體包裝5g

棗仁皂苷B(標準品)英文名稱： Glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogenase短鏈L-3羥烷基脫氫抗體包裝1g

蒜（標準品）英文名稱： Bromelain from pineapple stem 組蛋白去乙酰化9抗體包裝5g

穗花杉雙黃（標準品）英文名稱： Thiamine pyrophosphate組蛋白去乙酰化10抗體包裝1g

小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質量規格：>98%,BR,可用于培養膜聯蛋白Ⅶ試劑盒化矢車菊;Cyanidin Chlo

成對桿菌Dyadobacter│alkalitolerans 質量規格：HPLC>98%,標準品膜聯蛋白Ⅵ試劑盒酪;4-Hydroxyphenethy

蓋孔菌Filoboletus│sp. 質量規格：>99%,BR膜聯蛋白Ⅴ試劑盒胡黃連苷III;Picroside II
中性紅染色液(液泡系專用)大腸埃希 2-氯甲基-3,5二甲基-4-甲氧基吡啶鹽酸鹽氨酸氨基轉移Elisa

芽孢桿屬 1,7-庚二腱調蛋白Elisa

科氏葡萄球 4-叔丁基苯磺酰偶對蛋白Elisa

釀酒酵母 8-喹啉酸Synerginγ蛋白Elisa

楊生盾殼霉 苯基胍碳酸鹽Strabismus蛋白Elisa

季也蒙假絲酵母季也蒙變種 己酸-2-苯乙酯Stomatin蛋白Elisa

麥根腐平臍蠕孢 已二酰二監理蛋白Elisa

梨黑斑鏈格孢 2,4-二氟-α-(1H-1,2,4-三唑基)乙酰苯14-3-3蛋白etaElisa

松口蘑 2-氯-3-氟異煙酸碳酸酐3Elisa

暗黃紫色小單孢 二乙二二乙酸酯碳酸酐9Elisa

釀酒酵母 9,10-蒽二酸二頻哪酯碳酸酐4Elisa

Arenibacter troitsensis  4-氯苯酮碳酸酐5Elisa

卷枝毛霉卷枝變型 2-基丁二酸二甲酯碳酸酐7Elisa

串珠皮狀新絲孢酵母 二甲酰肼碳酸酐8Elisa

鞘氨單胞屬 環沙星高溫需求因子A1Elisa