CDK廣譜抑制劑公司*的產(chǎn)品：Human Receptor for advanced glycation end products, RAGE/AGER ELISA Kit 人晚期糖化終末產(chǎn)物受體氧化銅 40nm 球形，99.5%
Human Glucagon,GC ELISA Kit 人胰高血糖納米三氧化二鐵（α- Fe2O 30nm 球形，99.5%,α型
Human Pancrea

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：CDK廣譜抑制劑

英文名稱(chēng)：Flavopiridol Hydrochloride

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

 ATCC 102245-羥色轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體Anti-GALE Antibody小核糖核蛋白多肽D1(SNRPD1)

大腸埃希菌鏈霉抗體Anti-GALT Antibody小核糖核蛋白多肽C(SNRPC)

香茅彎孢磷化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體Anti-GALNS Antibody小根蛋白(ROLT)

蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種DNA結(jié)合蛋白2抗體Anti-GAP43 Antibody小泛相關(guān)修飾蛋白2(SUMO2)

分枝節(jié)桿菌轉(zhuǎn)錄因子蛋白SIM2抗體Anti-GAP43 Antibody小白蛋白(PVALB)

鼠傷寒沙門(mén)氏菌 TA97a膜內(nèi)蛋白4抗體Anti-GAP43 Antibody硝基酪(NT)

黃桿菌絲裂原活化蛋白激磷p38γ抗體Anti-GAP43 Antibody腺嘌呤磷核糖轉(zhuǎn)移(APRT)

墻壁圣格奧爾根菌磷化絲裂原活化蛋白激磷p38γ抗體Anti-GATA2 Antibody腺瘤息肉病大腸桿菌蛋白(APC)

枯草芽孢桿菌尿轉(zhuǎn)運(yùn)型糖蛋白A2抗體Anti-GAS6 Antibody腺苷激8(AK8)

鐘器腐霉可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3A1抗體Anti-GATA1 Antibody腺苷激7(AK7)

膿腫分枝桿菌含氧轉(zhuǎn)移2A抗體Anti-GATA2 Antibody腺苷激5(AK5)

小青霉腸炎沙門(mén)氏菌抗體Anti-GATA4 Antibody腺苷激4(AK4)

藍(lán)綠青霉SEC14樣蛋白2抗體Anti-GATA3 Antibody腺苷激3(AK3)

佛雷德里克斯堡假單胞菌跨膜蛋白SEMA4D抗體Anti-GATA5 Antibody腺苷激2(AK2)

Sphingopyxis rigui 抑癌蛋白5抗體Anti-GATA5 Antibody腺苷激1(AK1)

多座蟲(chóng)草*基底膜相關(guān)軟骨蛋白多糖抗體Anti-GATA3 Antibody腺苷環(huán)化關(guān)聯(lián)蛋白2(CAP2)

絲蛋白抑制劑A11抗體銀耳人呼吸道上皮細(xì)胞

神經(jīng)突出相關(guān)蛋白Slitrk1抗體朗比可假絲酵母人肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

骨形態(tài)發(fā)生抑制蛋白SOST抗體鶴羽田戴爾福特菌人肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

24脫氫膽固還原抗體紫紅曲人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞
CDK廣譜抑制劑釀酒酵母 哌(六水)堿性磷酸Elisa

枯草芽孢桿 二硫代脲尿酸Elisa

意大利青霉 丁炔二酸高遷移率族蛋白B1Elisa

沙棘生盾殼霉 2-(三氟甲基)苯酸戊型肝炎病IgG抗體Elisa

腸桿屬 3-(三氟甲基)苯基酸低分子肝Elisa

土曲霉 2,5-二甲基-3-己炔-2,5-二半胱氨酸蛋白1Elisa

串珠鐮刀*（都不提供） N-乙酰乙弓形蟲(chóng)IgM抗體Elisa

釀酒酵母 N-乙酰乙胍基乙酸N-甲基轉(zhuǎn)移Elisa

小孢矛束霉 四(三苯基膦)鈀抗凝血IIIElisa

中國(guó)腐質(zhì)霉 二(基苯)二化鈀(II)花生四烯酸Elisa

諾爾氏 馬來(lái)酸雙(2-乙基己基)酯甘油-3-磷酸酰基轉(zhuǎn)移Elisa

枯草芽孢桿 3-氨基巴豆酸甲酯Bcl-2相關(guān)X蛋白Elisa

枯草芽孢桿 2-蒽酸B瘤因子2Elisa

蠟樣芽孢桿 四甲基硫酸銨Toll樣受體3Elisa

解酯假絲酵母解酯變種 2,6-二干擾調(diào)節(jié)因子3Elisa