商品介紹:
用途: 用于液體浸制蕨類標(biāo)本的制作。用于蕨類標(biāo)本的保色。 注意事項: 主要由硫酸銅等組成。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
蕨類保色液 |
| 50ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
枯草芽孢桿菌β2微球蛋白抗體(單抗)Human GPRIN3 ELISA Kit小鼠二(MDA)免疫試劑盒
豬丹絲菌骨/軟骨蛋白多糖1抗體Human GPR17 ELISA Kit小鼠轉(zhuǎn)/谷轉(zhuǎn)(ALT/GPT)免疫試劑盒
黃曲霉染色體相關(guān)蛋白CAP抗體Human GPR177 ELISA Kit小鼠表皮生長因子受體(EGFR)免疫試劑盒
谷棒桿菌Bcl-2同源結(jié)構(gòu)域樣蛋白1抗體Human GPX4 ELISA Kit小鼠表皮生長因子(EGF)免疫試劑盒
禾谷鐮孢菌Bcl2相關(guān)抗凋亡基因6抗體Human GPR183(G-protein coupled receptor 183)ELISA Kit小鼠(LPA)免疫試劑盒
局限青霉半乳糖轉(zhuǎn)移7亞基β1,4抗體Human GPR162 ELISA Kit小鼠胞外超氧化物歧化[Cu-Zn](SOD3)免疫試劑盒
稻黑孢菌BEN結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體Human GPR177 ELISA Kit小鼠胞內(nèi)離子通道蛋白1(CLIC1)免疫試劑盒
副溶血弧菌巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS5抗體Human GPR17 ELISA Kit小鼠胞漿型磷脂A2(cPLA2)免疫試劑盒
小青霉癌相關(guān)蛋白1抗體Human GPR183(G-protein coupled receptor 183)ELISA Kit小鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)免疫試劑盒
普通鐮刀菌腦蛋白CG6抗體Human GPR3 ELISA Kit小鼠半乳糖凝集-3(Gal-3)免疫試劑盒
果形正青霉晶狀體蛋白2抗體Human GPR22 ELISA Kit小鼠半乳糖6硫酯(Gal-6S)免疫試劑盒
假結(jié)核耶爾森氏菌7號染色體開放閱讀框27抗體Human GPR35(G-protein coupled receptor 35) ELISA Kit小鼠半胱蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)免疫試劑盒
土地桿菌癌膜相關(guān)蛋白101抗體Human GPR58/TAAR2 ELISA Kit小鼠百日咳病IgG抗體免疫試劑盒
哈茨木霉立即早期癌基因BRLF1抗體(鼻咽癌基因)Human GPR50 ELISA Kit小鼠百白破抗體免疫試劑盒
曲霉腦源神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體Human GPR105 ELISA Kit小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌β淀粉樣前體蛋白裂解2抗體Human GPR81 ELISA Kit小鼠白血病抑制因子(LIF)免疫試劑盒
關(guān)節(jié)炎諾卡氏菌Nocardia│arthritidis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRβ內(nèi)啡肽受體試劑盒肉蓯蓉苷A
短刺小克銀漢霉Cunninghamella│blakesleana 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRβ內(nèi)啡肽試劑盒瑞香二
根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>97%,分子生物學(xué)級β-連環(huán)蛋白試劑盒瑞香-7-
蕨類保色液鴨肝炎病 1H-1,2,3-三氮唑炔雌Elisa
約克氏屬 5-乙酰-2-氟苯gestodene;Elisa
地衣芽孢桿 4-溴-3-基吡唑凋亡有關(guān)蛋白激2Elisa
粉紅單端孢霉 3-基苯肼鹽酸鹽膽固酯Elisa
鐮刀屬 3-(4-甲氧苯基)-3-氧代酸乙酯中間α-球蛋白抑制因子H4Elisa
南海沉積物芽孢桿 Z-O-叔丁基-D-絲氨酸賴氨酸特異性去甲基化4AElisa
產(chǎn)朊假絲酵母 異惡唑血小板激活因子乙酰水解Elisa
黑曲霉 4,7-雙(2-溴-5-噻吩基)-2,1,3-苯并噻二唑賴氨酸特異性去甲基化4AElisa
平菇 二對二甲苯二聚體微管相關(guān)蛋白輕鏈3BElisa
間型彎孢 4-氨基-6-羥基-2-巰基嘧啶單水合物D型氨基酸氧化Elisa
葡萄座腔 4-三氟甲氧基芐肝核因子1αElisa
葡萄座腔 1-甲基-2-硝基-4-(三氟甲苯)甲苯抗凝血ⅢElisa
大豆慢生根瘤 4-羥基嘧啶-5-羧酸新喋呤Elisa
加里福尼亞鏈霉 2-氟-3-三氟腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白6Elisa
大腸埃希氏 2,6-二乙脫氫2Elisa