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細胞核染料DAPI

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更新時間:2022-04-21 15:13:11瀏覽次數(shù):308

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10mg|1mg
貨號 GOY-01X9819 應用領域 化工
主要用途 公司產品僅供科研    
細胞核染料DAPI公司正在出售的產品:Phospho-PDGF Receptor alpha(Tyr849)/PDGF Receptor beta (Tyr857) 化血小板源性生長因子受體α/β抗體二叔丁 99%
PDGF Receptor beta/PDGF-R-B 血小板源性生長因子受體-B抗體二單己 98%
Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1009)

詳細介紹

商品介紹:

DAPI 是一種藍色核酸染料,優(yōu)先染dsDNA,DAPI 表現(xiàn)為可集中結合在DNA 雙鏈的AT 小溝,結合后的DAPI 熒光會發(fā)生20 倍增強。同時,DAPI 也可以結合RNA,與DNA 不同,一般認為DAPI 結合于RNA 的AU 區(qū)。DAPI/RNA 的復合體(500nm)有比DAPI/dsDNA復合體(460nm)更長的熒光波長。DAPI 是一種常用的多色熒光技術中的核復染劑。他的藍色熒光可以與綠色、紅色、橙黃色探針形成鮮明對比。

儲存:4℃,避光

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:

中文名稱

英文名稱

產品規(guī)格

發(fā)貨周期

細胞核染料DAPI


10mg|1mg

1~3天


操作步驟:

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。

2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測:

染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。

建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測:

染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

波棱英文名稱: C12E8Fas活化激結構域蛋白2抗體包裝100ml

博落回(標準品)英文名稱: Calcium florideFas活化激結構域蛋白1抗體包裝25ml

薄荷(標準品)英文名稱: Calcium stearateF-box蛋白21抗體包裝100g

補骨脂(標準品)英文名稱: Cedar wood oilGATA結合蛋白1伴侶蛋白抗體包裝25g

補骨脂定(標準品)英文名稱: Cerium(III) sulfate, octahydrate胎球蛋白B/Fetuin β抗體包裝5g

補骨脂二氫黃;補骨脂(標準品)英文名稱: Chromium (III) oxide叉頭蛋白O1抗體包裝25g

補骨脂二氫黃(標準品)英文名稱: Cobalt (II, III ) oxide鐵蛋白重鏈抗體包裝5g

補骨脂酚(標準品)英文名稱: Cobaltous acetate, tetrahydrate類固受體復合物蛋白FKBP5抗體包裝5g

補骨脂寧;補骨脂異黃(標準品)英文名稱: Cobaltous powder纖維性鞘結合蛋白1抗體包裝100g

補骨脂(標準品)英文名稱: Copper powder纖維生長因子結合蛋白2抗體包裝25g

布渣葉(標準品)英文名稱: Copper(II) carbonate basic肌動蛋白結合蛋白Fascin3抗體包裝25mg

菜油甾英文名稱: Copper(II) oxide結構特異性核FEN1抗體包裝100g

參麥提取物(標準品)英文名稱: Copper(II) pyrophosphateFAM61B蛋白抗體包裝500g

蠶沙(標準品)英文名稱: Copper(II) tartrate, trihydrateFAM63A蛋白抗體包裝100mg

蒼耳亭(標準品)英文名稱: dADP上皮分泌型FAM3C蛋白抗體包裝500mg

枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質量規(guī)格:>98.5%,USP32,BR,可用于培養(yǎng)嗜肺軍團菌抗原試劑盒去基雛葉龍膽;Tetrahydrox

副溶血弧菌Vibrio│parahaemolyticus 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品視黃羥基異亮;4-Hydroxyisol

0大腸桿菌克菌株Escherichia coli 0 質量規(guī)格:>99%,VEGFR 抑制劑,培養(yǎng)級食欲受體試劑盒去氫松香;Dehydroabietlc
細胞核染料DAPI匍枝根霉(黑根霉) 3-氯-2-氟苯甲包柔氏螺旋體Elisa

柳松菇 5-溴-2,3-二氟苯甲MBD3Elisa

波狀曲霉 2-溴-6-氟苯甲核纖層蛋白B2Elisa

果香地霉 2-氯-5-氟異煙酸發(fā)育調節(jié)GTP結合蛋白2Elisa

表皮葡萄球 托麥汀N-myc下游調節(jié)基因2Elisa

孟氏假單胞 2-溴吡啶-4-甲酸甲酯酮酸脫氫E2Elisa

靈芝 反-1,4-二氨基環(huán)已烷CD209分子Elisa

海南小雙孢 苯二酸胸苷激1Elisa

庫德里阿茲威畢赤酵母 2,3-二溴-6-甲基吡啶丁型肝炎IgM抗體Elisa

尖孢鐮刀胡麻專化型 3-溴噻酚-2-羧酸甲酯白介36αElisa

中慢生華癸根瘤 3-氯-2,4-二氟苯白介36βElisa

Ochrobactrum 2-氟-4-煙酸血管內皮生長因子受體2Elisa

米曲霉 2-正基烷-1,3-二抗肌炎抗體譜3抗體IgGElisa

節(jié)桿屬 1-甲基-4-硝基-1H-吲唑內皮脂肪Elisa

食砜節(jié)桿 5-甲氧基水楊酸酪蛋白激2Elisa

 


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