詳細(xì)介紹
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:硼酸洋紅染色液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
用途: 硼酸洋紅染色液主要用于花粉、動(dòng)植物組織切片等樣本中細(xì)胞核的染色,亦可用于線粒體的染色 注意事項(xiàng): 又稱格林額史氏硼酸洋紅染色液,主要由高濃度硼酸、洋紅(也稱胭脂紅)等組成,pH呈酸性 儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
三肉豆蔻甘油酯英文名稱: 7-Methoxycoumarin-3-carboxylic Acid生長分化因子3抗體包裝250g
三葉甙;三葉苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pyranin磷化糖原合激3β抗體包裝25g
桑白皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: SulfonfluoresceinG蛋白偶聯(lián)受體1抗體包裝5g
桑根L英文名稱: N-Succinimidyl 7-Hydroxycoumarin-3-carboxylateG蛋白β1抗體/鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白β亞基1包裝100mg
桑根皮英文名稱: N-Succinimidyl 7-Methoxycoumarin-3-carboxylateG蛋白β3抗體/鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白β亞基3包裝25ml
桑根H英文名稱: Sodium 5-(2-Aminoethylamino)-1-naphthalenesulfonate Hydrate鳥苷還原2抗體包裝1g
桑黃英文名稱: Tetrabromofluorescein Potassium SaltG蛋白偶聯(lián)受體γ12抗體包裝5g
桑寄生(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2',4',5',7'-Tetrabromo-3,4,5,6-tetrachlorofluorescein生長因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)接頭蛋白2抗體包裝100g
桑皮苷C(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3,4,5,6-TetrachlorofluoresceinG蛋白α亞單位蛋白Q抗體包裝25g
桑皮苷F英文名稱: Erythrosine B生長抑制DNA損傷基因GADD45β抗體包裝5mg
桑皮A英文名稱: Crystal Violet Nonahydrate生長抑制蛋白22抗體(基化控制J蛋白)包裝25g
桑皮E英文名稱: 2-Aminoperimidine HydrobromideG蛋白偶聯(lián)受體39抗體包裝5g
桑皮H英文名稱: CPC Monohydrate (=Cetylpyridinium Chloride Monohydrate)橋尾蛋白抗體包裝1g
桑色(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Thymolphthalein Complexon半乳糖凝集8抗體包裝1g
桑椹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcein Blue糖磷脂酰肌錨定蛋白137抗體包裝5g
布雷絲枝霉Chaetocladium│brefeldii 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品黏多糖/糖聚糖L-酪;L-Tyrosine
產(chǎn)黃青霉Penicillium│chrysogenum 質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR,可用于培養(yǎng)腦鈉/腦鈉尿肽試劑盒賴;L-Lysine
雙環(huán)林地蘑菇Agaricus│placomyces Peck 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品腦啡肽試劑盒柳穿魚黃;Pectolinarigen
硼酸洋紅染色液pDC316 2-(氯乙基)苯凝血因子IaElisa
云芝 1,4-二芐氧基苯拓?fù)洚悩?gòu)10Elisa
灰樹花孔 3-(二乙基)-1,2-二金黃色葡萄球腸DElisa
土壤薄層 畢卡魯間隙連接蛋白43Elisa
總狀毛霉 4-甲基-N-苯基苯乙二ⅠElisa
Cerrena unicolor 4-二甲氨基甲狀腺反應(yīng)基因Elisa
薄層屬 2-氯-3,6-二氟芐溴Tolloid樣蛋白1Elisa
白僵 4-乙基腫瘤調(diào)節(jié)蛋白1Elisa
旋絲毛殼 2,6-二氯-7-脫氮嘌呤腫瘤調(diào)節(jié)蛋白Elisa
黃白生叢赤殼 4-溴甲酯硬纖毛蛋白Elisa
蘇云金芽孢桿 2-基呋喃固類生成因子1Elisa
尼泊爾正青霉 雙三氟磺酰亞鋰肽基精氨酸脫亞氨Elisa
嘴突凸臍蠕孢 L-(-)-蘋果酸二甲酯凝血因子ⅪaElisa
枯草芽孢桿 衣康酸二甲酯凝血因子IXaElisa
塔賓曲霉 3,4-二氨基噻吩凝血因子XIIIaElisa