商品介紹:
Vatalanib是VEGFR2/KDR的抑制劑,其IC50值為37nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:212141-51-0 別名:PTK787 dihydrochloride;PTK/ZK dihydrochloride;CGP-79787D dihydrochloride;CGP-79787 dihydrochloride;ZK-222584 dihydrochloride 純度:99.86% 分子量:419.73 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
褐孢大禿馬勃基質(zhì)衍生因子4抗體(鈣結(jié)合蛋白)Anti-PLAUR Antibody人抗凝血(AT)
多根硬皮馬勃肝癌蛋白剪接變異體蛋白抗體Anti-PLAUR Antibody人抗內(nèi)因子抗體(AIFA)
大腸埃希氏桿菌結(jié)腸癌抗原8抗體Anti-PLAUR Antibody人抗繆勒管激(AMH)
側(cè)耳T淋巴識別的鱗狀癌SART3抗體Anti-PLCB1 Antibody人抗抑制因子1(AZIN1)
孔球孢霉磷化信號轉(zhuǎn)導與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體Anti-PLAUR Antibody人抗麥膠蛋白(AGA)
熱帶根瘤菌血清學定義結(jié)腸癌抗原1抗體Anti-PLCG2 Antibody人抗利尿激(ADH)
重金屬鉛速測試劑包信號轉(zhuǎn)導分子SMAD3抗體Anti-PLD1 Antibody人抗性磷(ACP5)
粗皮馬勃磷化信號轉(zhuǎn)導分子SMAD3抗體Anti-PLEXINA2 Antibody人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA)
谷棒桿菌結(jié)腸癌抗原10抗體Anti-PLD2 Antibody人抗甲基乙二抗體(AMA)
四川散斑殼核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體Anti-PLG Antibody人抗肌蛋白(UTRN)
遼寧盤孢膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白FP1抗體Anti-PLEC Antibody(PB0420)人抗核糖體抗體(Anti-rRNP)
大腸埃希氏菌階段特異性胚胎表面抗原-3抗體Anti-PLG Antibody人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA)
昆明假諾卡氏菌原癌基因18家族STMN3蛋白抗體Anti-PLG Antibody人抗核糖核蛋白抗體(Anti-RNP)
球孢鏈霉菌球孢亞種階段特異性胚胎表面抗原4抗體Anti-PLIN1 Antibody人抗核膜糖蛋白210抗體(AGPA)
寒冷桿菌骨架相關(guān)蛋白抗體Anti-PLIN1 Antibody人抗谷脫羧抗體(Anti-GAD)
馬賽博斯氏菌磷化信號轉(zhuǎn)導分子SMAD2抗體Anti-PLIN1 Antibody人抗肝腎微粒體抗體(Anti-LKMA)
核仁蛋白8抗體德氏乳桿菌乳亞種人牙周膜成纖維細胞提取物
核孔復合體蛋白88抗體食丁芽孢桿菌人食管癌組織源成纖維細胞提取物
豆蔻?;D(zhuǎn)移1抗體灰色鏈霉菌銹色變種人胃癌組織源成纖維細胞提取物
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3抗體鮭色鎖擲酵母人胰腺癌組織源細胞提取物
VEGFR2/KDR抑制劑(Vatalanib)釀酒酵母 Carbamic acid甲基睪酮Elisa
釀酒酵母 Epinodosin腺苷酸活化蛋白激Elisa
谷氨酸棒桿Ⅰ型 Shikokianin腺苷酸活化蛋白激Elisa
Paenibacillus Glychionide A卵母成熟抑制因子Elisa
鳥氨酸微屬 Rubrisandrin AD-乳酸Elisa
米曲霉 Eucalyptolic acid一氧化氮合成Elisa
釀酒酵母 Jacoumaric acid單氧化Elisa
大腸埃希 Platyconic acid A纖溶原Elisa
產(chǎn)蛋下降綜合征病 Rabdosin B巨噬移動抑制因子Elisa
球孢白僵 Kusunokinin低氧誘導因子1Elisa
米曲霉 Prionoid B腦紅蛋白Elisa
匍匐曲霉原變種 Lucidal抗酸性磷酸5bElisa
綠色木霉 Erythrinin A組織蛋白KElisa
球孢白僵 Brosimacutin G骨特異性堿性磷酸BElisa
大腸埃希氏 Bakuchalcone低氧誘導因子-1αElisa