商品介紹:
EPZ004777是一種有效的選擇性DOT1L抑制劑,IC50為0.4nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1338466-77-5 純度:99.89% 分子量:539.67 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:DOT1L抑制劑(EPZ004777)
英文名稱:EPZ004777
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
松鼠葡萄球菌磷化抑癌蛋白EZH2抗體Human PPP1R9A ELISA Kit血漿抗凝蛋白S(PS)
Pseudomonas batumici 組蛋白去甲基化JARID1B抗體Human PPP1CC ELISA Kit血漿抗凝蛋白C(PC)
少孢哈薩克斯坦酵母硫角質(zhì)抗體Human PPP3R2 ELISA Kit血漿激肽釋放(KLKB1)
玫煙色棒束孢角質(zhì)生長(zhǎng)因子調(diào)節(jié)蛋白2抗體Human PPP2CA ELISA Kit血漿膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)
Bacillus sp.離子通道蛋白G蛋白4抗體Human PPP2R1B ELISA Kit血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)
海假交替單胞菌通道多聚體結(jié)構(gòu)域KCTD18抗體Human PPP2CB ELISA Kit血紅氧合2(HO-2)
多主葡萄殼菌胞質(zhì)接頭蛋白Keap1Human PPP1CC ELISA Kit血紅氧合1(HO-1)
芽胞桿菌舞蹈癥相關(guān)蛋白KALRN抗體Human PPP1R10 ELISA Kit血紅加氧2(HO-2)
多粘類芽孢桿菌內(nèi)流通道蛋白Kir4.1抗體Human PPP2R2A ELISA Kit血紅加氧1(HO-1)
金黃色葡萄球菌金黃亞種樣蛋白3抗體Human PPP2R2B ELISA Kit血紅加氧(HO)
釀酒酵母KLF樣轉(zhuǎn)錄因子7抗體Human PPP1R7 ELISA Kit血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)
枯草芽孢桿菌Kelch樣蛋白8抗體Human PPP3CB ELISA Kit血紅蛋白β亞基(HB-β)
雞新城疫病血凝抑制試驗(yàn)(HI)陽(yáng)性血清離子通道蛋白家族KCNQ2抗體Human PPP1R8 ELISA Kit血紅蛋白α亞基(HB-α)
黑曲霉離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體Human PPP3CC ELISA Kit血紅蛋白H(HbH)
黃桿菌通道蛋白1抗體Human PPP1R9A ELISA Kit血紅蛋白C(HbC)
大斑凸臍蠕孢電壓門(mén)控通道蛋白1抗體Human PPP3R2 ELISA Kit血紅蛋白(Hb)
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)去氫木香內(nèi)酯
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)百秋李
巴斯德畢赤酵母Pichia│pastoris 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)β-胡蘿卜
DOT1L抑制劑(EPZ004777)熱帶假絲酵母 2-氨基-3-吡啶甲脂肪甘油三酯脂Elisa
大腸埃希氏 N-叔丁氧羰基-1,3-二α-乳球蛋白Elisa
枯草芽孢桿 二烷(DMAB)趨化因子10Elisa
肺炎克雷伯氏肺炎亞種 (S)-(+)-2-甲基哌腺病3型Elisa
肉糜 馬源性成分(定性) 三丁基乙烯基錫半乳糖Elisa
中國(guó)漢納酵母乳酸變種 2-基苯甲前列腺F2αElisa
枯草芽孢桿 5,10,15,20-四(3,5-二甲氧苯基)卟啉乳房鏈球Elisa
特異腐質(zhì)霉 3'- 乙酰氨基苯乙酮糖原Elisa
大腸埃希氏 2'-氟-4'-甲氧基苯乙酮二酰甘油O-酰基轉(zhuǎn)移同源物1Elisa
曲霉 間苯二甲酸二苯酯肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移IElisa
Thielavia 1-(3-基)可可堿促腎上皮質(zhì)釋放Elisa
泗川類芽孢桿 N,N'-二苯基對(duì)苯二糖皮質(zhì)Elisa
壁芽孢桿 3, 3-二甲氧基酸甲酯血清淀粉樣蛋白Elisa
蠟蚧 (S)-(-)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧酸伴肌球蛋白Elisa
蠟樣芽孢桿 3,5-雙(三氟甲基)苯酸伴肌動(dòng)蛋白Elisa