公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:caspase-3激活劑(細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑)
英文名稱:Silvestrol
產(chǎn)品規(guī)格:1mg|2mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
英文名稱:Silvestrol 產(chǎn)品規(guī)格:1mg|2mg Silvestrol是一種天然產(chǎn)物,能夠激活caspase-3來誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):697235-38-4 別名:(-)-Silvestrol 純度:99.28% 分子量:654.66 結(jié)構(gòu)式: Silvestrol結(jié)構(gòu)式 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
少根根霉1號(hào)染色體開放閱讀框110抗體Human SPOCK2(Testican-2) ELISA Kit人抗SSB/La抗體免疫試劑盒
粉狀畢翅酵母1號(hào)染色體開放閱讀框111抗體Human PDLIM1(PDZ and LIM domain protein 1) ELISA Kit人抗SS-A/Ro抗體免疫試劑盒
葡枝根霉1號(hào)染色體開放閱讀框106抗體Human PEG10(Retrotransposon-derived protein PEG10) ELISA Kit人抗SSA/Ro抗體 免疫試劑盒
豌豆根瘤菌色P450 11A1抗體Human PREX1(Phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate-dependent Rac exchanger 1 protein) ELISA Kit人抗sp100抗體(sp100)免疫試劑盒
蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種磷化表面趨化因子受體4抗體Human PRKCSH(Glucosidase 2 subunit beta) ELISA Kit人抗Smith抗體(Sm)免疫試劑盒
繡色土生單胞菌磷化表面趨化因子受體2抗體Human RAP1A(Ras-related protein Rap-1A) ELISA Kit人抗Scl-70抗體免疫試劑盒
白鬼筆中心體蛋白104抗體Human PRKCSH(Glucosidase 2 subunit beta) ELISA Kit人抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)免疫試劑盒
叢毛紅曲/乙磷轉(zhuǎn)移1抗體Human PEG10(Retrotransposon-derived protein PEG10) ELISA Kit人抗Sa抗體(anti-Sa-Ab)免疫試劑盒
惡臭假單胞菌6號(hào)染色體開放閱讀框163抗體Human PREX1(Phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate-dependent Rac exchanger 1 protein) ELISA Kit人抗Mi2抗體(anti-Mi2-Ab)免疫試劑盒
斑污擬盤多孔孢6號(hào)染色體開放閱讀框165抗體Human CRCP(DNA-directed RNA polymerase III subunit RPC9) ELISA Kit人抗M2能受體抗體免疫試劑盒
間型酒香酵母6號(hào)染色體開放閱讀框168抗體Human RAP1A(Ras-related protein Rap-1A) ELISA Kit人抗Ku抗體(anti-Ku-Ab)免疫試劑盒
麥根腐平臍孺孢6號(hào)染色體開放閱讀框173抗體Human RECK(Reversion-inducing cysteine-rich protein with Kazal motifs) ELISA Kit人抗IVIgG抗體免疫試劑盒
大腸埃希菌6號(hào)染色體開放閱讀框182抗體Human ROBO4(Roundabout homolog 4) ELISA Kit人抗IL6自身抗體免疫試劑盒
嗜果刀孢6號(hào)染色體開放閱讀框186抗體Human RSPO1(R-spondin-1) ELISA Kit人抗IgE受體抗體免疫試劑盒
Lysobacter6號(hào)染色體開放閱讀框191抗體Human WNT4(Protein Wnt-4) ELISA Kit人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab)免疫試劑盒
成團(tuán)泛菌6號(hào)染色體開放閱讀框195抗體Human WNT2B(Protein Wnt-2b) ELISA Kit人抗G2s抗體(IgG)免疫試劑盒
鏈孢囊菌Streptosporangium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>60%(HPLC)11去氫血栓烷B2試劑盒
傳染性支氣管炎病毒Coronavirus│Infectious bronchitis virus 質(zhì)量規(guī)格:IND11β羥類固脫氫1型試劑盒(+)松脂-β-D-吡喃葡萄糖苷
瓣鰓紅酵母Rhodotorula│lamellibrachiae 質(zhì)量規(guī)格:AR1,5-脫葡萄糖/1,5-脫山梨試劑盒澤瀉A-24-醋酯;
caspase-3激活劑(細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑)魯酵母 2,6-二叔丁基-4-白介20Elisa
棒桿屬 6尿酸Elisa
Bacillus aryabhattai 1-(4-甲氧基苯基)哌補(bǔ)體C1qElisa
釀酒酵母 2-(三氟甲基)烯酸C5a過敏趨化因子受體Elisa
埃及枝頂孢 1,1,1-三氟-2-丁酮凋亡因子Elisa
香草蘭根疾 3--2-吡啶補(bǔ)體蛋白9Elisa
黃桿 馬來酸二酰肼血小板膜糖蛋白ⅣElisa
茶葉 鈧、釔、鑭 4-羥基芐脒鹽酸鹽血小板膜糖蛋白Ⅰa;ⅡaElisa
黑綠木霉 2-吡啶-3-酸類固硫酸酯Elisa
煙曲霉 5--2-羥基煙酸磺基轉(zhuǎn)移Elisa
耐輻射奇球突變株 3,9-雙十八烷氧基-2,4,8,10-四氧-3,9-二磷螺環(huán)[5.5]十一烷3β羥基5類固脫氫Elisa
多粘類芽胞桿 B-甲氧基-9-BBN膽固7α羥化Elisa
群生殼 2-氨甲酰基苯酸類固17α單加氧Elisa
硝基還原假單胞 4-(Boc-氨基)苯酸類固異構(gòu)Elisa
弗氏鏈霉 4-氨基四氫吡喃皮質(zhì)類固11β脫氫同工1Elisa