產(chǎn)品屬性:
中文名稱:阿氏液(紅細(xì)胞保存液)
英文名稱:Alsever Solution
產(chǎn)品規(guī)格:100mL|500mL
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
阿氏液又稱為Alsever液,是一種等滲平衡鹽溶液。Alsever液可以保護(hù)紅細(xì)胞,通常用作抗凝劑或血液防腐劑,用于采血、保存和運(yùn)送含有紅細(xì)胞的血液。 阿氏液主要成分有: 枸櫞酸鈉(二水) 8.0g/L 枸櫞酸(一水) 0.55g/L 葡萄糖 20.5g/L 氯化鈉 4.2g/L。 使用說(shuō)明: 1. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求操作。 2. 一般取全血與阿氏液(Alsever Solution)等量混合后,4℃可保存大約10周。 儲(chǔ)存條件:2~8℃保存,有效期2年。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
RAS癌基因家族成員RAB5A(RAB5A)英文名稱:RAB5A ELISA Kit白介1-β轉(zhuǎn)化樣凋亡蛋白6抗體包裝500g
P-選擇糖蛋白配體1(PSGL1)英文名稱:PSGL1 ELISA Kit白介1-β轉(zhuǎn)化樣凋亡蛋白6抗體包裝5g
P選擇(SELP)英文名稱:SELP ELISA Kit表面趨化因子受體4抗體包裝5MG
Podocan蛋白(PODN)英文名稱:PODN ELISA KitCD19抗體包裝1g
PHD指蛋白8(PHF8)英文名稱:PHF8 ELISA Kit環(huán)氧合2/前列腺內(nèi)過(guò)氧化物合成2抗體包裝250mg
Persephin蛋白(PSPN)英文名稱:PSPN ELISA Kit白分化抗原CD2AP抗體包裝25g
Osterix蛋白(OSX)英文名稱:OSX ELISA KitCD3/CD3-ε 抗體包裝5g
N-乙酰轉(zhuǎn)移1(NAT1)英文名稱:NAT1 ELISA Kit軟骨糖蛋白39抗體包裝25g
N-乙酰半乳糖胺α(NAGα)英文名稱:NAGα ELISA Kit癌胚抗原抗體包裝5g
N-乙酰β-D-基葡萄糖苷(NAGase)英文名稱:NAGase ELISA Kit癌胚抗原相關(guān)粘附分子8抗體包裝1g
N-型電壓依賴鈣離子通道α1B亞基(CACNα1B)英文名稱:CACNα1B ELISA KitC型鈉尿肽抗體包裝5g
N-基-D-天氡離子能谷受體2A(GRIN2A)英文名稱:GRIN2A ELISA Kit組織蛋白K抗體包裝1g
Nodal同源物(NODAL)英文名稱:NODAL ELISA Kit組織蛋白D抗體包裝5g
NADH脫氫1(ND1)英文名稱:ND1 ELISA Kit組織蛋白H抗體包裝25g
Misato同源物1(MSTO1)英文名稱:MSTO1 ELISA Kit磷化鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2α抗體包裝5g
需鹽桿菌Salegentibacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)異腎上腺試劑盒葉綠;Phytol
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品乙型肝炎病前S2抗原試劑盒異虎耳草 ;Isopimpinelli
廈門海旋菌Thalassospira│xiamenensis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)乙型肝炎病前S2抗體試劑盒一枝蒿 ;Bullatine A
阿氏液(紅細(xì)胞保存液)弗雷德里克斯堡假單胞 4-羧基-3-氟苯酸甘氨酸脫氫Elisa
枯草芽胞桿 氮化鈣 (metals basis)神經(jīng)降壓Elisa
芽胞桿 鋁酸鑭盤, 10x10x1mm, polished one side, 100 orientatio寡樹(shù)突膠質(zhì)糖蛋白抗體Elisa
穴形節(jié)皮 十二氯三鈦鋁超廣譜β-內(nèi)酰Elisa
植物乳桿 2,2-二氟-1,3-苯并二惡茂-4-甲三葉因子1Elisa
盤孢屬 N-苯磺酰N-羥乙酰神經(jīng)氨酸Elisa
冠突曲霉 3,4-二氫異喹啉-1(2H)-酮布魯氏桿Elisa
沙生梭孢殼 5-甲酰基尿嘧啶鼠疫抗原Elisa
葡萄汁有孢漢遜酵母 DL-N-Boc-烯基甘氨酸神經(jīng)降壓前體Elisa
牛舌、肝色牛排 2,6-二氟苯肼13(S)-HODEElisa
白地霉 4-苯基乙炔基鄰苯二甲酸酐髓鞘少突膠質(zhì)糖蛋白Elisa
谷氨酸棒桿 (3R,4R)-3,4-二甲基-4-(3-羥基苯基)半胱氨酸蛋白12Elisa
黃桿 [1,3-二氫-1,3-雙(2,4,6-三基)-2H-咪唑-2-亞基](2-噻吩基亞甲基)(三NLRP3炎癥小體Elisa
腸炎沙門氏 (S)-2-氨甲基-1-Cbz-吡咯烷解脲支原體IgM抗體Elisa
栗疫 5-溴-3-氯吡啶-2-羧酸Traf2結(jié)合蛋白Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)