產品屬性:
中文名稱:MTT細胞增殖檢測試劑盒
英文名稱:MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit
產品規格:250次|500次
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
儲存條件:冷藏(2-8℃)避光 概述 MTT細胞增殖檢測試劑盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性檢測。MTT可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成結晶狀的深紫色產物Formazan,在特定溶劑存在的情況下,可以被*溶解,然后通過酶標儀可以測定570nm波長附近的吸光度。 應用 細胞增殖與毒性檢測 Component A:MTT;Component B:MTT Solvent;Component C:Formazan Solubilization Solution |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
卡維丁(標準品)英文名稱: Moxonidine 原癌基因蛋白/活化蛋白1抗體包裝25g
克拉霉(標準品)英文名稱: Moxonidine 死亡活化蛋白抗體包裝5g
克拉維英文名稱: Nepafenac角蛋白19抗體包裝100g
克林霉磷酯(標準品)英文名稱: Nepafenac角蛋白2抗體包裝25g
克霉唑(標準品)英文名稱: Nicarbazin 角蛋白4抗體包裝500g
喹乙;喹酰(標準品)英文名稱: Nimustine HCl(ACNU)色b245輕鏈抗體包裝1g
醌式利福平(標準品)英文名稱: NVP-BEZ 2355號染色體開放閱讀框44抗體包裝5g
拉呋替丁(標準品)英文名稱: Pemirolast potassium心臟特異性絲蛋白抗體包裝5g
拉米夫定(標準品)英文名稱: Perindopril erbumine胞漿型磷脂A2抗體包裝1g
拉米夫定(標準品)英文名稱: phenylbutazone周期及凋亡調節蛋白1抗體包裝5g
拉莫三 (標準品)英文名稱: phenylbutazone神經粘附分子1抗體包裝1g
拉西地平(標準品)英文名稱: phenylbutazone Calcium緊密連接蛋白5抗體包裝1g
來米特(標準品)英文名稱: phenylbutazone Sodium富含半胱運動神經元蛋白1抗體包裝1g
來米特雜質I(4-三)(標準品)英文名稱: Pirfenidone角蛋白5+6抗體包裝5g
來米特雜質Ⅱ(標準品)英文名稱: Pirfenidonec-Myc tag標簽抗體包裝1g
薔薇小單孢菌Micromonospora│rosaria 質量規格:>99.0%酰基化饑餓試劑盒茜;Alizarin
假諾卡氏菌Pseudonocardia│sp. 質量規格:HPLC>98%,標準品纖維母生長因子受體1癌基因伴侶試劑盒鐵冬青;Rutundic acid
毛柄金錢菌(金針菇)Flammulina│velutipes 質量規格:>99%,USP32纖維介蛋白試劑盒甜葉懸鉤子苷;Rubusoside
MTT細胞增殖檢測試劑盒米根霉 芴甲氧甲酰基-D-天冬氨酸Β叔丁酯抗磷脂A2受體抗體Elisa
金針菇(黃) 3-甲基-1-苯基吡唑CD25分子Elisa
大腸埃希 1,2,3,4-四氫苯并[b]氮雜卓-5-酮癌易感蛋白Elisa
pCMV-Gluc 7-甲基靛紅賴氨酰氧化同系物2Elisa
圍小叢殼 4-溴-2-氟芐單核趨化蛋白2Elisa
粉色小菇 9-苯基-9H-咔唑-3-酸哪酯型肝炎抗體Elisa
楚科奇海科維爾氏 咪唑[1,2-a]吡啶-2-腺苷三磷酸結合盒轉運體A1Elisa
豬鏈球II型 5-羥基-3-甲基烯化Elisa
未定德研所 甲酸辛酯色P450Elisa
黑腐皮殼屬 4-溴-2,5-二氟苯可溶性α–klotho蛋白Elisa
弗氏檸檬酸桿 (S)-叔亮氨庚型肝炎病IgG抗體Elisa
釀酒酵母 2,3-二氯馬來酸酐C1q腫瘤壞死因子相關蛋白12Elisa
淺玫瑰鏈霉 3--2-甲氧基吡啶表皮生長因子受體抗體Elisa
楊鏈格孢 二環基酮周期依賴性激4Elisa
耶納農球 5-甲基吡啶-2,3-二甲酸二甲酯凝血因子ⅩIElisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)