詳細介紹
商品介紹:
Necrostatin2是一種有效的程序性壞死(necroptosis)抑制劑。作用于TNF-α處理的FADD缺陷型Jurkat T細胞,抑制程序性壞死,EC50為0.05μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:852391-19-6 純度:99.89% 分子量:277.71 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
英文名稱:Necrostatin 2
產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
大豆慢生根瘤菌硒蛋白W抗體Anti-PITX2 Antibody人抗原提呈關聯轉運蛋白(TAP)
釀酒酵母干生長因子抗體Anti-PKC theta/PRKCQ Antibody人抗原肽轉運蛋白1(TAP1)
檸檬兩面神菌基質衍生因子-1抗體Anti-PKD2 Antibody人抗乙受體抗體(Anti-AChR)
米根霉臂板蛋白3A抗體Anti-PKLR Antibody(PB0528)人抗藥蛋白(SRI)
枯草芽孢桿菌臂板蛋白3F抗體Anti-PKM Antibody人抗氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)
健康皮張抗原(兔皮A)臂板蛋白4C抗體Anti-PKP2 Antibody人抗脫氧核糖核B(Anti-DNaseB)
*鎖擲酵母鈉-糖共轉運載體1抗體Anti-PKM Antibody(PB0418)人抗突觸前膜受體抗體(PsmRAb)
釀酒酵母富含脯突觸相關蛋白SHANK1抗體Anti-PLA2G4A Antibody人抗糖脂抗體(AGA)
陰溝腸桿菌性激結合球蛋白抗體Anti-PLA2G7 Antibody人抗髓過氧化物抗體(Anti-MPO)
膜醭畢赤酵母造血磷抗體Anti-PLA2G4A Antibody人抗絲聚蛋白(AFA)
嗜冷桿菌*蛋白酪磷2抗體Anti-PLAC9 Antibody人抗雙鏈DNA抗體(Anti-dsDNA)
白色短波單胞菌可溶性載質轉運蛋白SLC24A5抗體Anti-PLA2G6 Antibody人抗生長激抗體(Anti-GHAb)
假單胞菌甘蔗SCYLV抗體Anti-PLAT Antibody人抗神經元核抗體2型(ANNA2)
蠟樣芽孢桿菌膽固調節元件結合蛋白2抗體Anti-PLAU Antibody人抗神經元核抗體1型(ANNA1)
擬莖點霉SLAMF7抗體Anti-PLAT Antibody人抗神經節苷脂M1抗體(Anti-GM1)
白僵菌分泌和跨膜蛋白1抗體Anti-PLAT Antibody人抗鞘磷脂少突膠質糖蛋白抗體(Anti-MOG)
干細胞轉錄因子NANOGP8抗體波斯坦沙門氏菌人表皮角質形成細胞取物
核因子1X抗體出血性大腸埃希氏菌成人皮膚成纖維細胞取物
肉豆蔻酰基轉移2-N端肽抗體孔曲霉人前脂肪細胞提取物
核孔糖蛋白P62抗體腸沙門氏菌腸亞種耶路撒冷血清型人脂肪來源的原代干細胞提取物
程序性壞死抑制劑(Necrostatin 2)星孢鏈霉 Phellolactoneβ-胡蘿卜-15,15’雙加氧Elisa
紅色鹽顆粒形 Eriosematin Aβ-胡蘿卜-15,15’單加氧Elisa
血紅栓 Kihadanin B鐵調Elisa
pG+HOST9(pVE6155) Kihadanin A乙酰Elisa
英國蘑菇 Toddanone脂肪酸去飽和Elisa
粗皮側耳(平菇) (-)-Toddanol糖原合成激3βElisa
黃海鞘氨盒 Justiciresinol果糖-2,6-二磷酸2Elisa
基利恩帚枝霉 Gnetulin磷脂肌3激Elisa
釀酒酵母 Gnetucleistol D葡萄糖轉運蛋白2Elisa
淡青鏈霉 Shegansu BAKT蛋白Elisa
黑曲霉 Gnetin D磷酸化AKT蛋白Elisa
馬杜拉放線 Trametenolic acid磷脂酰肌二磷酸Elisa
枯草芽孢桿 Deapi-platycoside E磷脂肌3激Elisa
松口蘑 Leachianone G三磷酸磷脂酰肌Elisa
多粘芽孢桿 Pallidol丁酰酯Elisa