詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
2×1ml | 1~3天 |
商品介紹:
用途: 檢測細胞自噬 儲存條件:-20℃,避光,12個月 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
人參皂苷Rh1(標準品)英文名稱: (R)-(-)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol磷化糖皮質激受體抗體包裝25g
人參皂苷Rh3(標準品)英文名稱: (S)-(+)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol 葡萄糖轉運蛋白6抗體包裝5g
人參皂苷Rh7(標準品)英文名稱: N-(2-Carboxybenzoyl)-(-)-10,2-camphorsultam糖皮質激受體β抗體包裝100g
人參皂苷Rh8(標準品)英文名稱: p-Anisic Acid胰島葡萄糖6磷2抗體包裝25g
人參皂苷Rk1(標準品)英文名稱: 9-Anthracenecarboxylic Acid葡萄糖氧化抗體包裝5g
人參皂苷Rk2(標準品)英文名稱: 5-(4-Methoxycarbonylphenyl)-10,15,20-triphenylporphyrin葡萄糖苷2β/Glucosidase IIβ抗體包裝5MG
人參皂苷RK3(標準品)英文名稱: 2-Naphthoyl Chloride谷脫氫2抗體包裝10MG
人參皂苷Ro(標準品)英文名稱: 4-Dimethylaminocinnamaldehyde磷化谷受體1抗體包裝1g
人工虎骨(標準品)英文名稱: 2,3-Naphthalenedicarboxylic Anhydrideγ-谷酰解抗體包裝250mg
人工牛黃(標準品)英文名稱: 2,4,6-3(pentadecafluoroheptyl)-1,3,5-triazine谷酰-脯酰-tRNA合成抗體包裝100g
忍冬藤(標準品)英文名稱: 2,4,6-3(pentafluoroethyl)-1,3,5-triazine谷氧還蛋白2抗體包裝25g
絨毛龍芽草(標準品)英文名稱: 2,4,6-3(heptafluoropropyl)-1,3,5-triazine谷氧還蛋白5抗體包裝5g
鞣花(標準品)英文名稱: α-Thioglycerol 過氧化2抗體包裝100g
肉蓯蓉(標準品)英文名稱: 3,5-Dimethoxy-4-hydroxycinnamic Acid 過氧化7抗體包裝25g
肉蓯蓉(管花肉蓯蓉)(標準品)英文名稱: 4'-Hydroxyazobenzene-2-carboxylic AcidS轉移α1抗體包裝5g
: CGMCC1.458資源名稱: 蠟狀芽孢桿菌 質量規格:>98%,可用于培養尿激試劑盒雷酚內酯;Triptophenolide
稻麥角菌Claviceps│oryzae-sativae 質量規格:>98.5%尿苷二磷葡萄糖神經酰葡萄糖基轉移試劑盒藍萼;Glaucocalyxin A
節桿菌Arthrobacter│sp. 質量規格:HPLC>98%,標準品尿苷二磷葡萄糖轉移2試劑盒蘆竹堿;Gramine
MDC染色液米根霉 4-溴丁酰氯周期依賴性激1Elisa
白地霉 3-羥基-5-甲酸鹽酸多巴Elisa
黃發鏈霉 乙基溴化鎂膜聯蛋白A6Elisa
細枝孢 O-叔丁基-L-叔丁酯人分泌型卷曲相關蛋白5Elisa
耐輻射奇球 5-羧基熒光琥珀酰亞酯凋亡加強結構域蛋白8Elisa
交替紅色桿屬 3-溴-2-(溴甲基)酸乙酯乙酰化高遷移族蛋白Elisa
柱孢屬 3,3-二甲基烯酸甲酯尾肢同源蛋白2Elisa
小棱盤 丁二酸胃生長Elisa
多主葡萄殼 Boc-statineCD69分子Elisa
溶淀粉類芽孢桿 2-庚基苯并咪唑血管加壓Elisa
油菜核病 七甲基二硅氮烷簇集蛋白Elisa
乳白耙 3-甲?;?4-羥基組織因子途徑抑制物1Elisa
大腸埃希 甲酸-d2細小病B29-IgG抗體Elisa
東方伊薩酵母 異丁基鋰細小病B29-IgM抗體Elisa
貝酵母 4,4'-二異酸基-3,3'-二甲基聯苯轉錄中介因子1βElisa