詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:細胞骨架藍色熒光探針
英文名稱:
產品規格:200μL
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
本染料是F-肌動蛋白的高親和力探針,由蘑菇毒素制成,與藍色熒光染料偶聯。以納米摩爾濃度使用時,鬼筆毒素是方便的探針,可用于對固定和打孔的組織切片、細胞培養物或無細胞實驗體系中的F-肌動蛋白進行標記、鑒別和定量。 Ex/Em:350nm/450nm,比抗體染色更*。適合于固定和通透的樣本。 熒光標記的鬼筆環肽與肌動蛋白對于不同的物種,包括植物和動物具有幾乎相同的高結合屬性。鬼筆環肽結合具有高選擇性,而F-肌動蛋白紅色熒光。呈現出很少的非特異性染色。本產品可以用于熒光顯微鏡、微孔板、比色皿。 濃度:200U/mL儲存:-20℃,避光,有效期6個月。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
白頭翁皂苷E英文名稱: Nickel (II) fluoride tetrahydrate上皮膜蛋白3抗體包裝5g
白頭翁皂苷E-1英文名稱: Silicon (IV) oxide膜蛋白EVC2抗體包裝1g
白頭翁皂苷E-2英文名稱: Strontium fluoride哺乳動物室管膜相關蛋白1抗體包裝5g
白頭翁皂苷E-3英文名稱: Syringaldehyde內皮粘附分子抗體包裝10g
白土苓(短柱肖菝契)(標準品)英文名稱: Tetrazolium violet上皮有絲分裂蛋白抗體包裝50g
白土苓(華南肖菝葜)(標準品)英文名稱: 2-MethylindoleEmerin蛋白抗體包裝25g
白薇(標準品)英文名稱: Aluminum ammonium sulfate, dodecahydrate外信號調節激5抗體包裝5g
白鮮堿(標準品)英文名稱: AMP buffer concentrate磷/磷二酯家族成員5抗體包裝1g
白鮮皮(標準品)英文名稱: Benzimidazole早期生長反應蛋白2抗體包裝25g
白楊(標準品)英文名稱: Carboxypeptidase B磷化雌激受體β抗體包裝5g
白楊-7-O-龍膽二糖苷英文名稱: Cobalt (II) carbonate, hydrate乙激β抗體包裝1g
白英(標準品)英文名稱: dTDP微管相關末端結合蛋白2抗體包裝5g
白芷(標準品)英文名稱: Galactose oxidase減數分裂內切EME1抗體包裝1g
百部(對葉百部)(標準品)英文名稱: Iron (II) oxalate, dihydrate延伸突觸蛋白2抗體包裝25g
百部(直立百部)(標準品)英文名稱: Lead (II) chloride延伸突觸蛋白1抗體包裝5g
40044=ATCC23908=CBS804.68=IFO12862=ISP資源名稱: 脆弱鏈霉菌 質量規格:>98%,BR通道蛋白4抗體試劑盒人參皂苷Ginsenoside
出芽短梗霉Aureobasidium│pullulans 質量規格:HPLC≥98%,標準品通道蛋白3試劑盒人參皂苷RD;Ginsenoside R
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:>98%,BR痘帶狀皰疹病IgM試劑盒人參皂苷RC;Ginsenoside R
細胞骨架藍色熒光探針弗雷德里克斯堡假單胞 3-氯-2-吡甲酸甲酯蛋白聚糖Elisa
小奧德蘑 1,3-雙(2-異基-2-基)苯堿性成纖維生長因子抗體Elisa
三骨菇 反式-4-(叔丁氧羰基氨基)環己基羧酸甘油二酯Elisa
桔青霉 4-氮雜-3-甲過氧化物體Elisa
喜寒犁頭霉 2-甲基丁酸-3-甲基丁酯核內蛋白Elisa
胡椒枯萎病 富馬酸單甲酯結核桿抗原Elisa
短小芽孢桿 DL-二硫蘇糖銅鋅過氧化物岐化Elisa
筆狀地霉 2-甲基嗎啉趨化因子C-C-基元受體6Elisa
大腸埃希 亮氨酸叔丁酯鹽酸鹽磷酸化肝生長因子受體Elisa
鏈霉 咪唑并[1,2-a]吡啶分泌型堿性磷酸Elisa
大腸埃希氏 N-甲基-4-溴苯甲酰Smads2Elisa
黃芪葉桿 3-溴-4-氟Smads7Elisa
紅緣擬層孔 苯并惡唑糖蛋白AElisa
運動張樹政氏 乳糖酸鈉白蛋白抗體Elisa
奇異變形桿49005 鹽酸左電壓依賴性陰離子通道蛋白1Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)