詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Thiamet G | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
Thiamet-G為有效的,選擇性的OGA抑制劑,對人OGA的Ki值為20nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1009816-48-1 純度:99.54% 分子量:248.3 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
Achromobacter piechaudii粘結蛋白SA2抗體Anti-PIAS4 Antibody跨膜4域亞家族A成員1(MS4A1)
深綠木霉染色體結構維持蛋白4抗體Anti-PICALM Antibody扣帶蛋白(CGN)
棒桿菌粘結蛋白SA1抗體Anti-PIAS4 Antibody克拉拉蛋白16(CC16)
木腐裂褶病菌紡錘體點構成蛋白25抗體Anti-PIGR Antibody可溶性半乳糖凝集3結合蛋白(LGALS3BP)
毛韌革菌滋養層糖蛋白5T4抗體Anti-PIGR Antibody可溶性半乳糖苷結合凝集16(LGALS16)
邊緣假單胞菌防風致病變種磷化信號轉導與轉錄激活因子1抗體Anti-PIK3CA Antibody(COR)
Compostimonas磷化信號轉導和轉錄激活因子3抗體Anti-PIK3CB Antibody顆粒M(GZMM)
球孢白僵菌磷化信號轉導和轉錄激活因子6抗體Anti-PIK3CA Antibody顆粒K(GZMK)
香菇(神農5號)唾液結合性免疫球蛋白樣凝集14抗體Anti-PIK3R2 Antibody顆粒H(GZMH)
黃柄曲霉分泌受體抗體Anti-PIK3R1 Antibody顆粒B(GZMB)
史氏芽孢桿菌肌聚多糖-β抗體Anti-PIN1 Antibody顆粒A(GZMA)
Erwinia persicina 磷化非受體型酪蛋白激抗體Anti-PIK3R2 Antibody人抗內膜抗體(Anti-EMAb)
頭狀莖點霉磷化非受體型酪蛋白激抗體Anti-PIM1 Antibody人抗中性粒顆粒抗體(ANEA)
金針菇分泌型免疫球蛋白A抗體Anti-PINK1 Antibody人抗增殖核抗原(PCNA)
頂黑毛殼S期激相關蛋白2抗體Anti-PKCmu(PRKD1) Antibody人抗增生抗體靶分子1(TAPA1)
出芽短梗霉(黑酵母)蛇蛋白抗體(中華眼鏡蛇)Anti-PINX1 Antibody人抗載脂蛋白抗體(AAHA)
螺旋環螺旋蛋白2抗體蝙蝠蛾擬青霉人食管癌組織源細胞提取物
絲/蘇蛋白激Nek3抗體友好戈登氏菌人結腸癌組織源細胞提取物
天冬蛋白ASP4抗體卡門柏青霉人表皮黑色細胞提取物
核因子活化T細胞胞漿蛋白3抗體肯塔基沙門氏菌人脂肪細胞提取物
OGA抑制劑(Thiamet G)馬腺疫鏈球獸疫亞種 Curcolonol甘油二酯O-酰基轉移Elisa
小單孢 Dihydrocurcumenone二酰基甘油酰基轉移1Elisa
寄生曲霉 Isosalviamine B二酰基甘油酰基轉移2Elisa
類芽胞桿 Isosalviamine A甘油-3-磷酸酰基轉移Elisa
面包乳桿 Isovallesiachotamine神經激肽AElisa
鴨疫里氏桿 Vallesiachotamine6-磷酸果糖激Elisa
粉紅單端孢 Moellendorffilin鈉磷轉運蛋白Elisa
寡發酵鏈球 Salviananp38絲裂原活化蛋白激Elisa
*花椒褐斑病 Isoanthricin色CElisa
栗疫 Zedoarofuran6-磷酸葡萄糖脫氫Elisa
暗孢節菱孢 Rubinaphthin A雌受體αElisa
棗葉枯橄欖色盾殼霉 Neobritannilactone Bβ-胡蘿卜羥化Elisa
雷夫松氏 Ivangustinβ-胡蘿卜酮化Elisa
枯草芽孢桿 Bisisorhapontigenin A9-順式環氧類胡蘿卜單加氧Elisa
聚生殼 Triptotin F9-順式環氧類胡蘿卜雙加氧Elisa