商品介紹:
Bufexamac是COX抑制劑,具有抗炎活性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:2438-72-4 別名:Bufexamic acid 純度:98.0% 分子量:223.27 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
炭黑曲霉9號染色體開放閱讀框174抗體Human HPX(Hemopexin) ELISA Kit人黑色瘤免疫試劑盒
大腸埃希氏菌6號染色體開放閱讀框64抗體Human TLR5(Toll-like receptor 5) ELISA Kit人黑色免疫試劑盒
類芽孢桿菌屬免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ抗體Human PRKACB(cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit beta) ELISA Kit人核因子κB抑制物激β(IKK-β)免疫試劑盒
亞細(xì)亞菌屬透明質(zhì)介導(dǎo)游走受體抗體Human ARRB2(Beta-arrestin-2) ELISA Kit人核因子κB抑制物激α(IKK-α)免疫試劑盒
東方伊薩酵母周期樣Y1抗體Human CNN1(Calponin-1) ELISA Kit人核因子κB(NF-κB)免疫試劑盒
根瘤菌周期J抗體Human ProHAMP(Hepcidin prohormone) ELISA Kit人核心結(jié)合因子α1,CBFA1/RUNX2 免疫試劑盒
青紫鏈霉菌周期L抗體Human MMP28(Matrix metalloproteinase-28) ELISA Kit人核心蛋白聚糖(DCN)免疫試劑盒
北方蜜環(huán)菌補(bǔ)體C1RL鏈多肽抗體Human CBS(Cystathionine beta-synthase) ELISA Kit人核糖體合成蛋白NSA2同源物(NSA2)免疫試劑盒
釀酒酵母周期M2抗體Human ADAMTS7(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 7) ELISA Kit人核糖體蛋白S9(RPS9)免疫試劑盒
鏈霉菌周期T2抗體Human EDA(Ectodysplasin-A) ELISA Kit人核糖體蛋白S25(RPS25)免疫試劑盒
白地霉周期K抗體Human TNC(Tenascin) ELISA Kit人核糖核抑止劑(RNH1/PRI/RNH)免疫試劑盒
天藍(lán)褐鏈霉菌抗菌肽CAMP抗體Human IL36A(Interleukin-36 alpha) ELISA Kit人核糖核,核糖核A家族,(肝臟,嗜性粒源性神經(jīng))(RNASE2)免疫試劑盒
釀酒酵母5號染色體開放閱讀框4抗體Human HPX(Hemopexin) ELISA Kit人核糖核(RNASE1/RIB1/RNS1)免疫試劑盒
大腸埃希菌4號染色體開放閱讀框44抗體Human MAPT(Microtubule-associated protein tau) ELISA Kit人核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)免疫試劑盒
膠孢4號染色體開放閱讀框33抗體Human TLR5(Toll-like receptor 5) ELISA Kit人核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)免疫試劑盒
pET-23a4號染色體開放閱讀框42抗體Human PRKACB(cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit beta) ELISA Kit人核黃激(RFK)免疫試劑盒
Microsphaeropsis arundinisMicrosphaeropsis│arundinis 質(zhì)量規(guī)格:IND紫蘇烯
缺陷短波單胞菌Brevundimonas│diminuta 質(zhì)量規(guī)格:AR;IND苦蒿
立枯絲核菌Thanatephorus│cucumeris (A.B. Frank) Donk 質(zhì)量規(guī)格:0.9西瑞香
COX抑制劑(Bufexamac)肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)檢測試劑盒英文名稱:Tn-Ⅰ ELISA Kit酪轉(zhuǎn)抗體包裝5g
肌鈣蛋白Ⅰ(cTnⅠ)檢測試劑盒英文名稱:cTnⅠ ELISA Kit抗利尿/血管升壓/加壓/血管加壓抗體包裝25g
饑餓(GHRL)檢測試劑盒英文名稱:GHRL ELISA KitATP結(jié)合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體包裝5g
活性氧(ROS)檢測試劑盒英文名稱:ROS ELISA Kit糖還原抗體包裝1g
活化B(ACV-B)檢測試劑盒英文名稱:ACV-B ELISA Kit人血清白蛋白抗體包裝5g
活化A(ACV-A)檢測試劑盒英文名稱:ACV-A ELISA Kit抗體(采用活疫苗制備)包裝10MG
活化蛋白C(APC)檢測試劑盒英文名稱:APC ELISA Kit活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體包裝5g
黃體生成釋放(LHRH)檢測試劑盒英文名稱:LHRH ELISA Kit腺苷激-1抗體包裝1g
黃體生成(LH)檢測試劑盒英文名稱:LH ELISA Kit纖維狀肌動蛋白抗體包裝250mg
環(huán)磷腺苷(cAMP)檢測試劑盒英文名稱:cAMP ELISA Kit聚集蛋白抗體包裝1g
環(huán)磷鳥苷(cGMP)檢測試劑盒英文名稱:cGMP ELISA Kit調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體包裝1g
環(huán)加氧2(COX-2)檢測試劑盒英文名稱:COX-2 ELISA Kit調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體包裝5g
環(huán)孢A(CsA)檢測試劑盒英文名稱:CsA ELISA Kit間變型瘤激抗體包裝25g
花生四烯5脂氧合(Alox5)檢測試劑盒英文名稱:Alox5 ELISA Kitα-基酰基消旋抗體包裝5g
花生四烯(AA)檢測試劑盒英文名稱:AA ELISA Kit膜粘連蛋白A1抗體包裝10mg