詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Y-27632 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
英文名稱:Y-27632 產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Y-27632是一種ATP競爭性的ROCK-I和ROCK-II抑制劑,作用于ROCK-I和ROCK-II,Ki分別為220nM和300nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:146986-50-7 純度:99.65% 分子量:247.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
細黃鏈霉菌遺傳性脈絡膜缺乏癥相關蛋白樣抗體Human HOGA1(Probable 4-hydroxy-2-oxoglutaRate aldolase, mitochondrial) ELISA Kit人抗角蛋白抗體免疫試劑盒
*茄鏈格孢腺癌標志物CHMP2A抗體Human ZNF654(Zinc finger protein 654) ELISA Kit人抗膠原蛋白抗體(CLA)免疫試劑盒
平菇1染色質修飾蛋白CHMP6抗體Human ERN1(Serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease IRE1) ELISA Kit人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)免疫試劑盒
鐮毛霉染色質修飾蛋白CHMP5抗體Human TNN(Tenascin-N) ELISA Kit人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)免疫試劑盒
炭疽芽孢桿菌間隙連接蛋白31.1抗體Human HBP1(HMG box-containing protein 1) ELISA Kit人抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)免疫試劑盒
擬熱帶假絲酵母緊密連接蛋白10抗體Human TSPAN14(Tetraspanin-14) ELISA Kit人抗甲型肝炎病抗體IgM(anti-HAV IgM)免疫試劑盒
馬克斯克魯維酵母緊密連接蛋白23抗體Human HIST2H2BE(Histone H2B type 2-E) ELISA Kit人抗甲型肝炎病抗體IgG(anti-HAV IgG)免疫試劑盒
釀酒酵母緊密連接蛋白22抗體Human DNAH17(Dynein heavy chain 17, axonemal) ELISA Kit人抗甲型肝炎病(HAV)抗體免疫試劑盒
卡坦正青霉緊密連接蛋白19抗體Human OPLAH(5-oxoprolinase) ELISA Kit人抗基底節(BG)自身抗體免疫試劑盒
摩洛哥芽孢桿菌緊密連接蛋白18抗體Human OPLAH(5-oxoprolinase) ELISA Kit人抗肌內膜抗體(EMA)(IgA)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母緊密連接蛋白17抗體Human SAAL1(Protein SAAL1) ELISA Kit人抗肌內膜(EMA)抗體(IgG)免疫試劑盒
發狀孢囊游動放線菌緊密連接蛋白16抗體Human APMAP(Adipocyte plasma membrane-associated protein) ELISA Kit人抗肌集鈣蛋白抗體(IgG)免疫試劑盒
秦氏蜜環菌CELF3蛋白抗體Human SRF(Serum response factor) ELISA Kit人抗肌動蛋白抗體(AAA)免疫試劑盒
灰耳擔布勒酵母鈣粘蛋白超家族CELSR1抗體Human MTHFR(Methylenetetrahydrofolate reductase) ELISA Kit人抗黃體生成抗體(Anti LH Ab)免疫試劑盒
巴氏醋桿菌羅旺亞種牙骨質蛋白1抗體Human LILRB4(Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4) ELISA Kit人抗環胍肽(CCP)抗體免疫試劑盒
傘枝犁頭霉CENPBD1蛋白抗體Human PPP1R14B(Protein phosphatase 1 regulatory subunit 14B) ELISA Kit人抗琥珀脫氫黃亞單位抗體(IgG)免疫試劑盒
解淀粉芽孢桿菌Bacillus│amyloliquefaciens 質量規格:AR17-類固試劑盒(3β,6α,16β,20R,24S)-
鹽單胞菌Halomonas│sp. 質量規格:IND17-羥孕烯異黃芪皂苷II
: Ye2223資源名稱: 小腸結腸炎耶爾森氏菌 質量規格:BS,用于生物學染色17羥孕試劑盒異黃芪皂苷I
ROCK-I和ROCK-II抑制劑(Y-27632)葡萄座腔 2,4-二-5-(三氟甲基)嘧啶CD68分子Elisa
Brenneria nigrifluens Glu-Glu血紅蛋白α亞基Elisa
黃曲霉 3,6-二溴噻吩[3,2-b]噻吩血管緊張1-9Elisa
三葉草根瘤 1-Boc-3-(甲氨基)彈性蛋白Elisa
網脈木耳 3-甲氧基苯肼鹽酸鹽高靈敏促甲狀腺Elisa
釀酒酵母 乙酸鈉-d3胰島樣生長因子結合蛋白-6Elisa
細鏈格孢 4,7-二羥基-1,10-菲羅啉白介17BElisa
出芽短梗霉(黑酵母) Phe-Val四氫孕酮Elisa
生芽紅細 2-(2,4-二氟苯基)吡啶胃泌17Elisa
梨生囊殼孢 Trimebutine阿黑皮原Elisa
蘇云金芽孢桿庫爾斯塔克亞種 7-(三氟甲基)靛紅異檸檬酸脫氫Elisa
乳桿屬 2-(3-吡啶)-4-甲基噻唑-5-羧酸芳香化Elisa
豬鏈球(不可提供) 3-氟-4-甲氧基苯甲酰類固急性調節蛋白Elisa
乙型副傷寒沙門 6'-甲氧基-2'-乙酰萘膽固側鏈裂解Elisa
鏈球(不定種) 2,3-二甲基-4-甲氧基苯甲棕櫚酰Elisa