產(chǎn)品屬性:
中文名稱:c-Met酪氨酸激酶抑制劑(Tivantinib)
英文名稱:Tivantinib
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Tivantinib是一種新型的高選擇性c-Met酪氨酸激酶抑制劑,Ki為355nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):905854-02-6 別名:ARQ 197 純度:99.39% 分子量:369.42 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
云芝驅(qū)動(dòng)蛋白家族蛋白3抗體Human PRCC ELISA Kit血小板相關(guān)補(bǔ)體3(PAC3)
中生根瘤菌驅(qū)動(dòng)蛋白2抗體Human PRKAR1A(Protein kinase cAMP-dependent type I regulatory subunit alpha) ELISA Kit血小板生長(zhǎng)因子(PGF)
枯草芽孢桿菌KIAA1522蛋白抗體Human PRDM10 ELISA Kit血小板生成(TPO)
漢遜德巴利酵母離子通道四聚體結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體Human PRKAR1B ELISA Kit血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)
芽孢桿菌高分子量激肽原重鏈抗體Human PRDM15(PR domain zinc finger protein 15) ELISA Kit血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)
毛栓孔菌通道四聚體結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體Human PRDM4 ELISA Kit血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)
貝倫格葡萄座腔菌梨生專化型Kelch樣蛋白26抗體Human PRKD2 ELISA Kit血小板活化因子(PAF)
滑菇賴,天冬,谷,亮相關(guān)序列抗體Human PREB ELISA Kit血小板反應(yīng)蛋白/凝血敏感蛋白1(TSP-1)
產(chǎn)黃青霉Kelch樣蛋白10抗體Human PRKCDBP ELISA Kit血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)
蠟樣芽孢桿菌Kelch樣蛋白11抗體Human PRKAR2B ELISA Kit血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)
彎孢菌Kelch樣蛋白3抗體Human LALBA(Alpha-lactalbumin) ELISA Kit血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)
云芝Kelch樣蛋白14抗體Human PRELID1 ELISA Kit血纖蛋白原γ鏈(FGG)
短桿菌Kelch樣蛋白31抗體Human DHH(Desert hedgehog protein) ELISA Kit血纖蛋白原(Fbg)
CystofilobasidiumKelch樣蛋白32抗體Human PPP4R2 ELISA Kit血纖蛋白(Fibrin)
致病擬桿菌電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員5抗體Human PRKG2 ELISA Kit血吸蟲(chóng)(schistosoma)
糞腸球菌TGF-β誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1抗體Human PPPDE1 ELISA Kit血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)
硫紅球菌Thiorhodococcus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)肉桂
大西洋假交替單胞菌Pseudoalteromonas│atlantica 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)肉桂
: 43076資源名稱: 偶發(fā)分枝桿菌偶發(fā)亞種 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)肉桂
c-Met酪氨酸激酶抑制劑(Tivantinib)蘇云金芽孢桿 2-氨基-4,6-二甲基嘧啶脂肪酸轉(zhuǎn)位Elisa
大腸埃希氏桿 4-羥基苯甲微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Elisa
根瘤 4-氟苯乙炔脂酰CoA合成Elisa
矩圓黑盤孢 3-苯甲載脂蛋白EElisa
宛氏擬青霉 3-芐溴長(zhǎng)鏈脂酰CoA脫氫Elisa
壁芽孢桿 咪唑并[1,2-b]噠肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移IIElisa
黃綠木霉 鄰苯甲白介17AElisa
球黑孢霉 1,2-環(huán)己二酮過(guò)氧化物Elisa
乳酒假絲酵母 2-溴-5-甲基噻吩Ⅰ型膠原N端肽Elisa
谷氨酸棒桿 環(huán)基酮抗雙鏈DNA抗體;天然DNA抗體Elisa
熱灰鏈霉 環(huán)β-酪啡肽Elisa
果生鏈核盤 2-(硅烷基)乙氧甲基(SEMCl)纖維蛋白原Elisa
釀酒酵母 (S)-(-)-3-硫代乙酰-2-甲基酸腺苷酸活化蛋白激Elisa
五原假黃單胞 1-癸炔肝糖原Elisa
運(yùn)動(dòng)替斯崔納 2-丁炔-1-肌糖原Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)