詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:NOS抑制劑(L-NAME hydrochloride)
英文名稱:L-NAME hydrochloride
產品規格:1mL(10mM)|100mg|500mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
L-NAME能抑制NOS的活性,IC50值為70μM。L-NAME是NOS抑制劑L-NOARG(IC50=1.4μM)的前體。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:51298-62-5 別名:NG-Nitroarginine methyl ester hydrochloride 純度:98.0% 分子量:269.69 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
根瘤菌腦蛋白9抗體Human PAEP(Glycodelin) ELISA Kit一氧化氮(NO)
馬腺疫鏈球菌獸疫亞種絲裂原誘導蛋白2抗體Human PROX1 ELISA Kit葉受體α(FOLR1)
解淀粉芽孢桿菌鋅指蛋白393抗體Human PRPF19 ELISA Kit葉受體(FOLR)
枯草芽孢桿菌組蛋白賴特異性脫甲基1抗體Human PROSC ELISA Kit葉(FA)
扣囊復膜孢酵母驅動蛋白樣蛋白1抗體(甲狀腺激受體相互作用蛋白5)Human PRPF3 ELISA Kit氧化型(GSSG)
宇佐美曲霉組蛋白甲基化KMT3B抗體(雄激受體激活蛋白)Human ZNF335(Zinc finger protein 335) ELISA Kit氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)
黑曲霉離子通道蛋白Kv4.3抗體Human PRPF40A ELISA Kit氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)
枯草芽胞桿菌Killin-p53調節復制抑制蛋白抗體Human PRKX ELISA Kit氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)
盔狀畢赤酵母賴tRNA的連接抗體Human PRMT1 ELISA Kit氧化低密度脂蛋白(OxLDL)
大腸埃希菌220kDa蛋白激D相互作用蛋白抗體Human PRPF40B ELISA Kit氧還原蛋白過氧化物4(PRDX4)
嗜冷生孢八疊球菌磷化220kDa蛋白激D相互作用蛋白抗體Human PRPF6 ELISA Kit延伸蛋白A(EloA)
發根土壤桿菌(發根植物單胞菌)(現1)基爾曼氏細小病VP1/VP2抗體(大鼠潛在病KRV)C端Human PRMT5(Protein arginine N-methyltransferase 5) ELISA Kit煙酰腺嘌呤二核苷磷(NADPH)
灰毛青霉離子通道蛋白家族KCNQ1抗體Human PRMT8 ELISA Kit煙酰腺嘌呤二核苷(NAD)
褐黃木耳(琥珀木耳)組蛋白H3 K9甲基轉移抗體Human PRMT3 ELISA Kit牙骨質蛋白1(CEMP-1)
Paenibacillus thailandensis生物鐘KAT13D蛋白抗體Human PRMT6 ELISA Kit牙本質基質蛋白1(DMP1)
柄籃狀菌Kelch樣蛋白36抗體Human PRPF40A ELISA Kit循環免疫復合物(CIC)
長根小奧德蘑Xerula│radicata (Relhan) Dörfelt 質量規格:>99.0%(GC)(R型)人參皂苷Rh1
人蒼白桿菌Ochrobactrum│anthropi 質量規格:>98.0%(GC)酪
多粘芽孢桿菌Bacillus│polymyxa 質量規格:用于薄層色譜顯色劑DL-薄荷
NOS抑制劑(L-NAME hydrochloride)鰒發光桿 噻吩-2-硫二酰甘油O-酰基轉移同源物1Elisa
嗜堿迪茨氏 2--5-硝基三氟甲苯Toll樣受體1Elisa
枯草芽胞桿 β-D-葡萄糖五乙酸酯Toll樣受體6Elisa
屎腸球 9,10-二氫菲Toll樣受體10Elisa
光硬皮馬勃 1-甲哌膠原蛋白Elisa
凍土毛霉皮生變型 2-氨基-5-溴嘧啶膠原蛋白α1(Ⅰ)型Elisa
根瘤 1-芐基-3-羥基吡咯烷膠原蛋白α2(Ⅰ)型 Elisa
淡黃木層孔 1,3-二溴-5,5-二甲基海因布魯氏抗體Elisa
地衣芽孢桿 N-芐基化喹啶嗡[手性相轉移催化劑]結核桿抗體Elisa
釀酒酵母 2--4-硝苯相關糖蛋白Elisa
繩狀孢子懸浮液 2,3,4,5,6-五氟苯抗繆勒氏管Elisa
釀酒酵母 N-叔丁基二甲硅烷基-N-甲基三氟乙酰淀粉樣蛋白Elisa
米曲霉 N-叔丁基二甲硅烷基-N-甲基三氟乙酰布魯氏桿病Elisa
嗜鹽涅斯特連科氏 5,7-二-8-羥基喹啉布魯氏桿病抗體Elisa
孔狀短小莖點霉 均苯基磺酰循環復合物Elisa