產品屬性:
中文名稱:活細胞染色液(Hoechst 33342)(100×)
英文名稱:Hoechst 33342 Living Cell Staining Solution
產品規格:0.1ml|0.5ml|3ml
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
本品是一種適用于活細胞細胞核染色的溶液。僅需染色10分鐘就能用熒光顯微鏡觀察到非常明亮的細胞核藍色熒光染色。 本產品也適用于固定后的細胞或組織的細胞核染色。 CAS:23491-52-3 分子式:C27H28N6O·3HCl·3H2O 分子量:615.99 激發和發射波長:346nm,460nm 激發和發射波長(和雙鏈DNA結合后):350nm,461nm Hoechst 33342是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低。Hoechst 33342染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33342也常用于普通的細胞核染色,或常規的DNA染色。 正常培養的HeLa細胞用本產品染色后的實拍效果圖。圖A為正常細胞Hoehst 33342的染色效果圖。圖B中除了正常細胞外,還清晰可見呈現致密濃染的凋亡細胞。 儲存條件:-20℃避光,有效期一年。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
酪羥化(TH)英文名稱:TH ELISA Kit過氧化物酰基氧化2抗體包裝25g
跨膜蛋白97(TMEM97/MAC30)英文名稱:TMEM97/MAC30 ELISA Kit膽固酰基轉移1抗體包裝5g
克拉拉細胞蛋白(CC16)英文名稱:CC16 ELISA Kit磷化間變型淋巴瘤激抗體包裝1g
可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(sTRAIL)英文名稱:sTRAIL ELISA Kit磷化ADP核糖基化因子結合蛋白2抗體包裝5g
可溶性血小板內皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)英文名稱:sPECAM-1/sCD31 ELISA Kit磷化有絲分裂激B/C抗體包裝1g
可溶性血栓調節蛋白(sTM)英文名稱:sTM ELISA Kit磷化腺泡Acinus蛋白抗體包裝25g
可溶性血凝樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)英文名稱:sLOX-1 ELISA Kit磷化腎上腺能受體β2抗體包裝5g
可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)英文名稱:sEPCR ELISA KitAPS抗體包裝25g
可溶性血管內皮生長因子受體1(sVEGF R1/sFlt1)英文名稱:sVEGF R1/sFlt1 ELISA Kit激活受體樣激1抗體包裝5g
可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)英文名稱:sICAM-1 ELISA Kit激活A受體1B抗體包裝100ml
可溶性髓系細胞觸發受體-1(sTREM-1)英文名稱:sTREM-1 ELISA Kit磷化雄激受體抗體包裝25ml
可溶性瘦受體(sLR)英文名稱:sLR ELISA Kit磷化A-Raf抗體包裝5ml
可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)英文名稱:sLOX-1 ELISA Kit酰基鞘脫酰2抗體包裝100ml
可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)英文名稱:sMHC-2 ELISA Kit脂肪特異性粘附分子抗體包裝1g
可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)英文名稱:sMHC-1 ELISA Kit腺相關病5抗體包裝5g
雙調蛋白(結腸直腸源性生長因子)抗體C反應蛋白(CRP)Pictilisib (GDC-0941) is a potent inhibitor of PI3Kα/δ with IC50 of 3 nM in cell
活細胞染色液(Hoechst 33342)(100×)小叢殼屬 N-叔丁氧羰基-S-(4-)-D-青霉二環己基促性腺平抑因子檢測試劑盒
類谷糠乳桿 2,6-二氯苯甲促胰液素檢測試劑盒
大豆慢生根瘤 2,3-二氯茴香催產素檢測試劑盒
產氣莢膜梭 素C型 2-氨基-3-甲基吡催乳素檢測試劑盒
土生類諾卡氏 5-硝基吡唑-3-羧酸大內皮素檢測試劑盒
樟疫霉 3′-溴苯酮單氧化酶檢測試劑盒
黃色長孢鏈霉 1,14-十四烷二單純皰疹病抗原2檢測試劑盒
果生鏈核盤 6-氯喹唑啉-4-單核趨化蛋白1檢測試劑盒
地衣芽孢桿 4-(3-溴苯基)嗎啉單核趨化蛋白3檢測試劑盒
白金針菇 4-(3-溴苯基)嗎啉單核趨化蛋白5檢測試劑盒
大腸埃希氏 3-氟-N-單抗MG7相關抗原檢測試劑盒
白黃側耳 2-氟-6-甲酸甲酯單鏈DNA結合蛋白檢測試劑盒
微小桿 1,6-萘啶-2-羧酸膽固檢測試劑盒
蘇云金芽孢桿 3-氨基-4-羧基乙氧基吡唑膽固酯檢測試劑盒
藤黃類諾卡氏 2,5-二氯吡膽堿乙酰轉移酶檢測試劑盒
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)