詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:HSP90抑制劑(17-AAG)
英文名稱:17-AAG
產品規格:1mL(10mM)|10mg|25mg|100mg|200mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
英文名稱:17-AAG 產品規格:1mL(10mM)|10mg|25mg|100mg|200mg 17-AAG是HSP90的有效抑制劑,IC50值為5nM;對腫瘤細胞中的HSP90親和力比正常細胞中的高100倍。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:75747-14-7 別名:Tanespimycin;NSC 330507;CP 127374 純度:98.45% 分子量:585.69 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
殺鮭氣單胞菌鈣粘蛋白14抗體Human HOGA1(Probable 4-hydroxy-2-oxoglutaRate aldolase, mitochondrial) ELISA Kit人抗狼瘡抗凝抗體(IgG)免疫試劑盒
層出鐮孢菌鈣激活離子通道蛋白3抗體Human UNC5C(Netrin receptor UNC5C) ELISA Kit人抗蘭尼堿受體鈣釋放通道抗體免疫試劑盒
大腸埃希氏菌CD200受體抗體Human SUSD2(Sushi domain-containing protein 2) ELISA Kit人抗狂犬病(RV)抗體免疫試劑盒
Pseudomonas psychrotolerans彈性蛋白1抗體Human MTPAP(Poly(A) RNA polymerase, mitochondrial) ELISA Kit人抗狂犬病(RV)抗體(IgM)免疫試劑盒
粗皮側耳(平菇)干生長因子受體/表面分化抗原抗體Human ZNF654(Zinc finger protein 654) ELISA Kit人抗狂犬病(RV)抗體(IgG)免疫試劑盒
秦氏蜜環菌CD99樣蛋白2抗體Human ERN1(Serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease IRE1) ELISA Kit人抗可提取核抗原抗體(ENA-Ab)免疫試劑盒
球毛殼鈣粘蛋白相關蛋白CTNNA3抗體Human COQ10A(Coenzyme Q-binding protein COQ10 homolog A, mitochondrial) ELISA Kit人抗可溶性肝抗原抗體(SLA)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌緊密連接蛋白15抗體Human PIN1(Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase NIMA-interacting 1) ELISA Kit人抗菌肽LL-37 免疫試劑盒
草本枝孢緊密連接蛋白12抗體Human CES5A(Carboxylesterase 5A) ELISA Kit人抗菌肽(CAMP)免疫試劑盒
潔小菇CHIC2蛋白抗體Human PARM1(Prostate androgen-regulated mucin-like protein 1) ELISA Kit人抗菌肽(Attacin)免疫試劑盒
楊奇青霉磷化周期檢測點激1抗體Human LETMD1(LETM1 domain-containing protein 1) ELISA Kit人抗巨病(CMV)抗體(IgM)免疫試劑盒
青色鏈霉菌磷化周期檢測點激2抗體Human FAF2(FAS-associated factor 2) ELISA Kit人抗巨病(CMV)抗體(IgG)免疫試劑盒
短芽孢桿菌磷化周期檢測點激2抗體Human SPINK7(Serine protease inhibitor Kazal-type 7) ELISA Kit人抗巨噬抗體(anti-macrophage Ab)免疫試劑盒
蒼黃鏈霉菌磷化周期檢測點激2抗體Human MTX3(Metaxin-3) ELISA Kit人抗性磷5b(TRACP-5b)免疫試劑盒
橄欖鏈霉菌磷化周期檢測點激2抗體Human FAM151A(Protein FAM151A) ELISA Kit人抗抗體(AsAb)免疫試劑盒
E.coli DH5α λpir遺傳性脈絡膜缺乏癥相關蛋白抗體Human MTPAP(Poly(A) RNA polymerase, mitochondrial) ELISA Kit人抗角蛋白絲聚集/絲集蛋白抗體(AFA)免疫試劑盒
雜色曲霉Aspergillus│versicolor 質量規格:堿指示劑Ⅰ型膠原C端肽試劑盒澤瀉F
結核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質量規格:CPⅠ型膠原試劑盒青蒿
假交替單胞菌Pseudoalteromonas│sp. 質量規格:0.981型1-磷鞘受體試劑盒黃芪中分離物
HSP90抑制劑(17-AAG)短桿狀馬賽 2-(三氟甲基)芐溴肉堿脂酰轉移IElisa
白馬勃 2-基哌顆粒KElisa
大腸埃希氏* 芐基二金剛烷基膦膜攻擊復合物Elisa
釀酒酵母 化銨-15N丁酰酯Elisa
馬克斯克魯維酵母 辛二酸單甲酯CCAAT增強子結合蛋白1Elisa
熱吸水鏈霉 2-氟苯乙烯彈性Elisa
節桿 5-氟-2-羥基苯乙酮20S蛋白體Elisa
嘴突凸臍蠕孢 乙酸鉻(III)氫氧化物26S蛋白體Elisa
冷湖黃桿 2-溴-5-氟超氧化物歧化1Elisa
熱帶假絲酵母 堿式碳酸鎂超氧化物歧化2Elisa
產黃青霉 2-甲氧基-5-氟去乙酰化3Elisa
地衣芽孢桿 2,4-二氟苯甲20S蛋白體Elisa
銅抗性鞘氨 Amberlyst®15離子交換樹脂26S蛋白體Elisa
籃狀屬 3-氟吡啶-4-羧酸芳香Elisa
大豆慢生根瘤 2,4-二嘧啶酰基化饑餓Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)