以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
mPGES-1抑制劑(MF63) | MF63 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
MF63是mPGES-1抑制劑,對(duì)豬mPGES-1和人mPGES-1的IC50分別為0.9nM和1.3nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):892549-43-8 純度:99.47% 分子量:378.81 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
球孢白僵菌克侖特羅/抗體Human α1-AT(Alpha 1-Antitrypsin) ELISA Kit人角蛋白18-M30(CK 18-M30)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌斯氏亞種6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框151抗體Human α2-AP(α2-Antiplasmin) ELISA Kit人角蛋白18(CK-18)免疫試劑盒
秦氏蜜環(huán)菌15號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框52抗體Human αHSP(Alpha-Hemoglobin Stabilizing Protein) ELISA Kit人間粘附分子3(ICAM-3/CD50)免疫試劑盒
嗜鹽擬諾卡氏菌2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框89抗體Human β-actin(Beta actin) ELISA Kit人間粘附分子2(ICAM-2/CD102)免疫試劑盒
瘦弱鹽扁平菌BCL10結(jié)合蛋白和激活核轉(zhuǎn)錄因子抗體Human ACP(Acid phosphatase) ELISA Kit人間粘附分子1(ICAM-1/CD54)免疫試劑盒
相思根瘤菌凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白15抗體Human MBP(myelin basic protein) ELISA Kit人性T淋巴相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌慢性淋巴白血病缺失基因6蛋白抗體Human SOCS4(Suppressor Of Cytokine Signaling 4) ELISA Kit人相關(guān)蛋白A(CagA)抗體(IgG)免疫試劑盒
米曲霉13號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框38抗體Human AA(Arachidonic Acid) ELISA Kit人相關(guān)蛋白A(CagA)免疫試劑盒
白僵菌14號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框140抗體Human VASPIN(Visceral Adipose Specific Serine Protease Inhibitor) ELISA Kit人凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白(PYCARD)免疫試劑盒
溶壁(lywallzyme)陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)樣蛋白2抗體Human VEGF165(Vascular Endothelial Growth Factor165) ELISA Kit人硒結(jié)合蛋白1(SELENBP1)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌15號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框62抗體Human VEGF-B(Vascular Endothelial Cell Growth Factor B) ELISA Kit人硒蛋白P(SEPP1)免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌15號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框41抗體Human VIL1(Villin 1) ELISA Kit人戊型肝炎病抗體(IgM)免疫試劑盒
大腸埃希菌環(huán)核苷陽(yáng)離子通道蛋白α2抗體Human VEGF-D(Vascular Endothelial Growth Factor D) ELISA Kit人戊型肝炎病抗體(IgG)免疫試劑盒
宋氏志賀氏菌鈣連蛋白抗體Human τPK1(Tau-Protein Kinase) ELISA Kit人戊糖(Pentosidine)免疫試劑盒
恥垢分枝桿菌二氫嘧啶相關(guān)蛋白2抗體Human TPA(Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit人舞蹈病蛋白相互作用蛋白1(HIP1)免疫試劑盒
深綠木霉色P450ⅡE1抗體Human TPS(Tryptase) ELISA Kit人五聚3(PTX3)免疫試劑盒
綠色木霉Trichoderma│viride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDickkopf 3試劑盒格列喹
多粘類芽胞桿菌Paenibacillus│polymyxa 質(zhì)量規(guī)格:BRDickkopf 1試劑盒格列齊特
頂孢霉屬Acremonium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BCDicer-1 ELISA Kit枸橘苷
mPGES-1抑制劑(MF63)半胱天冬-3原抗體包裝100ml
質(zhì)磷1抗體包裝25ml
維生D低磷性佝僂病蛋白包裝1g
多通道膜蛋白PTCHD2抗體包裝250mg
修補(bǔ)相關(guān)蛋白PTCHD3抗體包裝100g
髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激抗體包裝25g
磷化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激抗體包裝25g
磷化血小板源性生長(zhǎng)因子受體α包裝5g
磷化血小板源性生長(zhǎng)因子受體α包裝25g
磷化血小板源性生長(zhǎng)因子受體α包裝5g
兒茶酚氧化PPO抗體包裝100ml
蛋白激C抗體包裝1g
脂滴包被蛋白Perilipin-A抗體包裝25g
多聚腺苷結(jié)合蛋白抗體包裝25g
核纖層蛋白A相關(guān)結(jié)構(gòu)蛋白1抗體包裝5g