詳細介紹
商品介紹:
長鏈二烷基羰花青化合物,特別是Dil(分子量933.88),廣泛應用于固定和非固定的組織與細胞中,進行順行或逆行的神經示蹤分析。Dil 不會影響細胞的活力、生長以及基本生理特性。Dil 標記運動神經元,可在培養基條件下持續跟蹤長達四周,在體內長達一年。染料通過在質膜中的緩慢橫向擴散均勻標記神經元,0.2~0.6mm/每天/固定標本,在活體組織里,可以達到6mm/每天。經過醛固定的組織,Dil 的擴增可以持續長達1~2年。一般情況下未標記的染料不會向非標記的細胞轉移,除非質膜被破壞,比如切片部位 |
產品屬性:
中文名稱:羰化青DiI(神經元示蹤劑)
英文名稱:
產品規格:10mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
白果內酯(標準品)英文名稱: D(+)-Arabitol磷化表皮生長因子受體抗體包裝25g
白花丹(標準品)英文名稱: Metol磷化表皮生長因子受體抗體包裝5g
白花前胡(標準品)英文名稱: Pyridoxal hydrochloride磷化表皮生長因子受體抗體包裝25g
白花前胡(標準品)英文名稱: Silicone oil磷化表皮生長因子受體抗體包裝5g
白花前胡A英文名稱: Sodium bromide磷化表皮生長因子受體抗體包裝25g
白花前胡(標準品)英文名稱: Sodium hexametaphosphate磷化表皮生長因子受體抗體包裝5g
白花前胡乙(標準品)英文名稱: Albumin, from bovine pH 7.0 Fatty free磷化表皮生長因子受體抗體包裝1g
白花蛇舌草(標準品)英文名稱: Diaphorase磷化表皮生長因子受體抗體包裝5g
白樺脂(標準品)英文名稱: Digitonin-water-soluble磷化表皮生長因子受體抗體包裝25g
白樺脂(標準品)英文名稱: DSP磷化表皮生長因子受體抗體包裝5g
白樺脂(標準品)英文名稱: Glutamate Dehydrogenase磷化表皮生長因子受體抗體包裝100g
白及(標準品)英文名稱: HOBT, 1-Hydroxybenzotriazole磷化表皮生長因子受體抗體包裝25g
白蠟樹(標準品)英文名稱: IDA, Iminodiacetic acid磷化表皮生長因子受體抗體包裝500g
白蘞(標準品)英文名稱: Lithium lactate磷化表皮生長因子受體抗體包裝100ml
白麻苷英文名稱: Magnesium carbonate basic pentahydrate磷化表皮生長因子受體抗體包裝25ml
IMI265297資源名稱: 桔灰青霉 質量規格:>99%,EP 6.4,BR絲/蘇蛋白激B-raf試劑盒人參皂苷Rg2;Ginsenoside
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海科貝特氏菌Cobetia│marina 質量規格:≥99,BR瞬態電壓感受器陽離子通道,子類V,成員1試劑盒人參皂苷Rb3;Ginsenoside
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