詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:Akt抑制劑(GSK-690693)
英文名稱:GSK-690693
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
GSK-690693是一種廣譜的Akt抑制劑,作用于Akt1/2/3,IC50值分別為2/13/9nM;PKA,PrkX和PKC對其也比較敏感。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:937174-76-0 純度:97.52% 分子量:425.48 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
出芽短梗霉活化蛋白激D抗體Human PSMB3 ELISA Kit乙呋(AD)
異常威克漢姆酵母Jun激活區域-連接蛋白1抗體Human PSMD2 ELISA Kit胰脂肪(PL)
大腸埃希氏菌磷化蛋白酪激JAK-2抗體Human PSMB6 ELISA Kit胰抑制(Pancreastatin)
黑曲霉蛋白酪激JAK-3抗體Human PSMD3 ELISA Kit胰激肽原(PK)
Cystofilobasidium磷化蛋白酪激JAK-3抗體Human PSMD5 ELISA Kit胰高血糖樣肽2受體(GLP2R)
黑曲霉磷化蛋白酪激JAK-3抗體Human PSMB7 ELISA Kit胰高血糖樣肽2(GLP2)
球孢白僵菌磷化原癌基因c-Jun抗體Human PSMC2(Proteasome 26S subunit ATPase 2) ELISA Kit胰高血糖樣肽1受體(GLP1R)
黑曲霉蛋白質酪激JAK2抗體Human CECR1(Adenosine deaminase CECR1) ELISA Kit胰高血糖樣肽1(GLP-1)
釀酒酵母JWA蛋白抗體Human PSMC1 ELISA Kit胰高血糖(GC)
燕麥鐮孢連接蛋白JPH3抗體Human PSMC4(Proteasome 26S subunit ATPase 4) ELISA Kit胰多肽(PP)
釀酒酵母連接粘附分子C抗體Human PSMC6(Proteasome 26S subunit ATPase 6) ELISA Kit胰淀(Amylin)
厚環乳牛肝菌蛋白質酪激JAK-1抗體Human PSMD10 ELISA Kit胰淀粉(PAMY)
拜耳接合酵母組蛋白去甲基化JMJ2A抗體Human PSMD11 ELISA Kit胰島抗原2抗體/蛋白酪磷抗體(IA-2A)
米根霉組蛋白去甲基化JMJD5抗體Human HNRNPA2B1(Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins A2/B1) ELISA Kit胰島抗體(ICA)
多育曲霉磷化γ連環蛋白抗體Human PSG4 ELISA Kit胰島自身抗體(IAA)
布魯氏菌 生物Ⅰ型JNK相互作用蛋白4抗體Human PSAPL1 ELISA Kit胰島原(PI)
小紅酵母Rhodotorula│minuta 質量規格:>92.0%(T)葒草苷
粉紅聚端孢霉Trichothecium│roseum (Pers.) Link 質量規格:>99.0%(GC)野百合堿
尖孢枝孢Cladosporium│oxysporum Berk. & M.A. Curtis 質量規格:>95.0%(HPLC)(T)桔梗皂苷D
Akt抑制劑(GSK-690693)米曲霉 4-戊烯-1-趨化樣因子MARVEL跨膜結構域包含5Elisa
海考克氏 1-辛炔-3-趨化樣因子MARVEL跨膜結構域包含4Elisa
構巢曲霉 烯酸羥乙酯狂犬病Elisa
側耳 4-甲基-2-氧戊酸魏氏梭Elisa
指狀青霉 3,4,9,10-苝四甲酰二亞弓形蟲IgG抗體Elisa
短雙歧桿 (三氟甲基)基硅烷活性氧Elisa
金針菇 (三氟甲基)基硅烷組織蛋白BElisa
Lysobacter daejeonensis 去氫膽酸組織蛋白DElisa
拉米雷斯戈麥斯氏隱球酵母 普伐他汀鈣離子Elisa
大腸埃希氏 4,4'-二溴三苯白介13Elisa
瓦爾肯葉 糖精轉化生長因子βElisa
中瀨畢赤酵母 4-甲基-5-甲基-1,3-二氧雜環戊烯-2-酮口蹄疫抗凝抗體Elisa
杏鮑菇 3-[(基硅基)乙炔基]吡啶溶Elisa
秦氏蜜環 2-溴丁酸魏氏梭(D型)Elisa
皺褶青霉 四甲基硫酸氫銨魏氏梭(C型)Elisa