以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
Genz-123346是阻斷神經(jīng)酰胺向GL1轉(zhuǎn)化的GL1合酶的抑制劑;抑制GM1IC50值為14nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):491833-30-8 純度:98.0% 分子式:C??H??N?O? 分子量:418.57 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
枯草芽孢桿菌磷化谷受體1抗體Human UBL3 ELISA Kit大鼠煙酰腺嘌呤二核苷磷(NADPH)免疫試劑盒
沙阿霉鏈霉菌G蛋白偶聯(lián)受體48抗體Human UBE4A ELISA Kit大鼠煙堿型乙酰膽堿受體(N-AChR)免疫試劑盒
棲沙鹽水孢菌G基丁A型受體α2/GABAA Rα2抗體Human UBE2K ELISA Kit大鼠牙本質(zhì)磷蛋白(DPP)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌G基丁A型受體α4/GABAA Rα4抗體Human UBE2L3 ELISA Kit大鼠牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP1)免疫試劑盒
黑曲霉G基丁A型受體α6/GABAA Rα6抗體Human UBL4A ELISA Kit大鼠循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)免疫試劑盒
包圍漆斑菌磷化γ1基丁受體GABAA Rβ1抗體Human UBE4B ELISA Kit大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)免疫試劑盒
綠色木霉G基丁受體β2/GABAA Rβ2抗體Human UBE2H ELISA Kit大鼠血小板因子3(PF-3)免疫試劑盒
產(chǎn)朊假絲酵母G蛋白偶聯(lián)受體17抗體Human IDH2(IsocitRate dehydrogenase [NADP], mitochondrial) ELISA Kit大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)免疫試劑盒
紅曲霉G蛋白偶聯(lián)受體102抗體Human UBE2G2 ELISA Kit大鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)免疫試劑盒
炭生褐褶菌G蛋白偶聯(lián)受體136抗體Human UBL4A ELISA Kit大鼠血小板衍生生長因子B(PDGF-B)免疫試劑盒
谷棒桿菌G蛋白偶聯(lián)受體126抗體Human UBE2K ELISA Kit大鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌G蛋白偶聯(lián)受體105抗體Human UBE2J2 ELISA Kit大鼠血小板衍生生長因子AA(PDGF-AA)免疫試劑盒
葡萄球菌科G蛋白偶聯(lián)受體C5B抗體Human UBL3 ELISA Kit大鼠血小板衍生生長因子A(PDGF-A)免疫試劑盒
格氏乳球菌G蛋白偶聯(lián)受體33抗體Human UBE2E2 ELISA Kit大鼠血小板生成(TPO)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌谷受體紅藻離子1抗體Human UBE2L3 ELISA Kit大鼠血小板膜糖蛋白IIb(GPIIb)免疫試劑盒
黃色籃狀菌一般受體磷肌相關(guān)支架蛋白1抗體Human UAP1L1 ELISA Kit大鼠血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)免疫試劑盒
鏈格孢霉屬Alternaria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:干燥劑用麥角甾
蘇云金芽孢桿菌幕蟲亞種Bacillus│thuringiensis subsp. finitimus 質(zhì)量規(guī)格:60-80目,氣相、液相色譜柱紫花前胡苷
副豬嗜血桿菌Haemophilus│parasuis 質(zhì)量規(guī)格:80-100目,氣相、液相色譜柱纖細(xì)薯蕷皂苷
GL1合酶抑制劑(Genz-123346 free base)levatin英文名稱: Ammonium oxalate hydrateEFHD1蛋白抗體包裝5g
Lup-20(29)-en-28-oic acid, ...英文名稱: Adenosine-5'-monophosphate, free acid突觸結(jié)合蛋白2抗體包裝100g
Monnieriside G英文名稱: Aluminum sulfate, hexadecahydrate核苷焦磷2抗體包裝25g
Multicaulisin英文名稱: Glucose-6-phosphate dehydrogenase長鏈烯脂酰化抗體包裝25g
N-阿魏酰真蛸英文名稱: Malate dehydrogenase神經(jīng)元,肌肉特異性烯化抗體包裝5g
N-芐基-(9Z,12Z)-十八碳二烯酰英文名稱: N-Hydroxysuccinimide內(nèi)皮分化型G蛋白偶聯(lián)受體3抗體包裝1g
N-芐基-(9Z,12Z,15Z)-十八碳三烯酰英文名稱: Gallic acid monohydrate發(fā)育相關(guān)蛋白ERCC6L抗體(乙致畸因子)包裝25g
N-芐基十六烷酰英文名稱: Gallic acid monohydrate豬源產(chǎn)腸性大腸桿菌K99抗體包裝5g
N-反式-阿魏酰基酪英文名稱: a-Ketoglutaric acid, disodium salt, dihydrateα內(nèi)磺肽抗體包裝100g
N-反式-對(duì)-香豆酰基去辛弗林英文名稱: Calcium hydroxide磷化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體包裝25g
N-反式-對(duì)香豆酰酪(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: HPC, hydroxypropyl cellulose表皮生長因子樣受體1抗體包裝500g
N-基野靛堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L(+)Sodium tartrate dihydrateCREB結(jié)合蛋白p300抗體包裝1g
Nudicaucin A英文名稱: Pyridoxamine, dihydrochlorideEB病LMP-2A蛋白抗體包裝5g
Nudicaucin B英文名稱: Sodium salicylateEB病核抗原1抗體包裝25g
Odoratisol A英文名稱: CAPS, sodium salt磷化雌受體β抗體包裝5g