產(chǎn)品屬性:
中文名稱:glutaminase抑制劑(BPTES)
英文名稱:BPTES
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
英文名稱:BPTES 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg BPTES是一種有效的glutaminase抑制劑,用于癌癥研究。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):314045-39-1 純度:98.50% 分子量:524.68 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種感覺(jué)神經(jīng)蛋白1抗體Human CBR1 (Carbonyl reductase [NADPH] 1) ELISA KIT牛布魯氏桿菌抗體(IgG)免疫試劑盒
玉蕈、真姬菇線粒體型共濟(jì)失調(diào)蛋白抗體Human CTSE (Cathepsin E) ELISA KIT牛補(bǔ)體片斷5a(C5a)免疫試劑盒
里氏木霉FC段IgE受體α多肽抗體Human CPS1(Carbamoyl-phosphate synthase [ammonia], mitochondrial) ELISA Kit牛二單酰(malonyl CoA)免疫試劑盒
黃傘(10號(hào))FAM81A蛋白抗體Human CPVL (Probable serine carboxypeptidase CPVL) ELISA KIT牛二(MDA)免疫試劑盒
短波單胞菌屬FAM78B蛋白抗體Human AP2B1(AP-2 complex subunit beta) ELISA Kit牛表皮生長(zhǎng)因子(EGF)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框59抗體Human CARHSP1 (Calcium-regulated heat-stable protein 1) ELISA KIT牛白三烯B4(LT-B4)免疫試劑盒
釀酒酵母FAM76A蛋白抗體Human BRD4(Bromodomain-containing protein 4) ELISA Kit牛白介8(IL-8)免疫試劑盒
紫帶擬迷孔菌FAM76B蛋白抗體Human BSDC1 (BSD domain-containing protein 1) ELISA KIT牛白介6(IL-6)免疫試劑盒
黑曲霉FAM92A1蛋白抗體Human P2RY12(P2Y purinoceptor 12) ELISA Kit牛白介5(IL-5)免疫試劑盒
球孢白僵菌FAM98A蛋白抗體Human NACC2 (Nucleus accumbens-associated protein 2) ELISA KIT牛白介4(IL-4)免疫試劑盒
青枯假單胞菌FRMD5蛋白抗體Human C1GALT1C1 (C1GALT1-specific chaperone 1) ELISA KIT牛白介2受體(IL-2R)免疫試劑盒
解脂亞羅酵母FRMD6蛋白抗體Human CADPS (Calcium-dependent secretion activator 1) ELISA KIT牛白介22(IL22)免疫試劑盒
釀酒酵母FAM161A蛋白抗體Human CADPS2 (Calcium-dependent secretion activator 2) ELISA KIT牛白介2(IL-2)免疫試劑盒
地中海中間根瘤菌FAM153B蛋白抗體Human B3GAT1 (Galactosylgalactosylxylosylprotein 3-beta-glucuronosyltransferase 1) ELISA KIT牛白介1β(IL-1β)免疫試劑盒
霍氏腸桿菌FAM46C蛋白抗體Human CPPED1 (Serine/threonine-protein phosphatase CPPED1) ELISA KIT牛白介17(IL-17)免疫試劑盒
嗜鹽動(dòng)性球菌舌癌耐藥相關(guān)蛋白1Human CCIN (Calicin) ELISA KIT牛白介12(IL-12)免疫試劑盒
鏈狀假絲酵母Candida│catenulata 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,>99.5%L-絲
彩色豆馬勃Pisolithus│tinctorius (Pers.) Coker & Couch 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC)L-色
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC, ≥99.5% (GC)L-鼠李糖
glutaminase抑制劑(BPTES)盤(pán)長(zhǎng)孢狀盤(pán)孢 1-芐基-3-氨基吡咯烷球蛋白EElisa
雞腿菇2 3-氨基-1-Boc-球蛋白GElisa
鏈格孢 (1S,2S,5S)-(-)-2-羥基-3-蒎酮球蛋白G1Elisa
淡青鏈霉 三(4-氟苯基)膦球蛋白G2Elisa
陰溝腸桿 4-氨基-2-球蛋白MElisa
蘇云金芽孢桿 2-羥基-4-正辛氧基二苯甲酮腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子Elisa
巨獸芽孢桿 腺苷-5'-磷酸牛血清白蛋白Elisa
白布勒酵母 4-(芐氧基羰基)苯酸皮質(zhì)Elisa
多粘類芽孢桿 2-腺嘌呤皮質(zhì)酮;腎上腺酮Elisa
新疆鹽地桿屬 乙基六氟戊二酰基趨化因子配體2Elisa
葡萄球 5-溴-2-熱休克蛋白60Elisa
假單胞屬 2--5-熱休克蛋白-70Elisa
弗雷克氏志賀氏 N-Boc-4-氨基-4-羧酸熱休克蛋白90Elisa
球毛殼 N-叔丁氧羰基4-(FMOC-氨基)-4-羧酸溶Elisa
圍小叢殼 α-代肉桂溶Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)