以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
CaM-KK抑制劑(STO-609) | STO-609 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
STO-609是選擇性和細(xì)胞可滲透的CaM-KK抑制劑,對重組CaM-KKα和CaM-KKβ的Ki值分別為80和15ng/mL。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:52029-86-4 純度:98.0% 分子式:C??H??N?O? 分子量:314.29 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
滑菇熱休克蛋白β7抗體Human SPACA1 ELISA Kit大鼠超敏熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒
缺陷短波單胞菌/鈉超化激活環(huán)核苷門控通道蛋白3抗體Human SPDYA ELISA Kit大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)免疫試劑盒
毛木耳鐵調(diào)節(jié)蛋白25抗體Human SPHK1 ELISA Kit大鼠腸脂肪結(jié)合蛋白(iFABP)免疫試劑盒
大腸桿菌HD域內(nèi)含蛋白2抗體Human CADM3(Cell adhesion molecule 3) ELISA Kit大鼠叉頭框蛋白P3(FoxP3)免疫試劑盒
聚生殼菌艾滋病病p55抗體Human SPHK1-Phospho-Ser225 ELISA Kit大鼠層粘連蛋白亞基γ-2(LAMC2)免疫試劑盒
芽孢桿菌造血激抗體Human SPHK2 ELISA Kit大鼠層粘蛋白α1(LAMA1)免疫試劑盒
禾生HEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白5B蛋白抗體Human SPI1 ELISA Kit大鼠層連蛋白/板層(LN)免疫試劑盒
緊密帚枝霉缺氧誘導(dǎo)基因1B蛋白抗體Human SPATA1 ELISA Kit大鼠不對稱二甲基精(ADMA)免疫試劑盒
三葉草根瘤菌乙酰化組蛋白H4抗體Human SPATA13 ELISA Kit大鼠補(bǔ)體因子H(CFH)免疫試劑盒
釀酒酵母熱休克蛋白B2抗體Human SPATA16 ELISA Kit大鼠補(bǔ)體因子D(adipsin)(CFD)免疫試劑盒
根瘤菌人類白抗原B27Human SPAG4 ELISA Kit大鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)免疫試劑盒
草地阿格雷氏菌螺旋環(huán)螺旋轉(zhuǎn)錄因子HATH6抗體Human SOX5 ELISA Kit大鼠補(bǔ)體片斷5(C5)免疫試劑盒
孢淡灰鏈霉菌神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1β2抗體Human SOX6( SRY-box 6) ELISA Kit大鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)免疫試劑盒
尖孢鐮刀菌HDHD3蛋白抗體Human SOX8 ELISA Kit大鼠補(bǔ)體片斷3(C3)免疫試劑盒
平田頭菇7-2HEATR3蛋白抗體Human SOX7 ELISA Kit大鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)免疫試劑盒
肉葡萄球菌(可訂)癌增強(qiáng)蛋白抗體Human SP100 ELISA Kit大鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)免疫試劑盒
魯氏不動桿菌Acinetobacter│lwoffii 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)格列風(fēng)內(nèi)酯
叢毛紅曲菌Monascus│pilosus 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品紫草苷
莫格球擬酵母Torulopsis│mogii 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.5%(GC)菝葜皂苷元
CaM-KK抑制劑(STO-609)beta-Amyloid(31-35) β淀粉樣肽(31-35)抗體2,4-二苯氧 用于植物培養(yǎng), ≥98%(GC)
beta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽(1-28)抗體3,3'-二氨聯(lián)苯四鹽鹽,水合 98%
beta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽(1-28)抗體2,6-二硝酚 96%
beta-Amyloid(25-35) β淀粉樣肽(25-35)抗體二戊 99%
beta-Amyloid(1-40) β淀粉樣肽(1-40)抗體2,3-二丁烷 98%
beta-Amyloid 1-40(CT) β淀粉樣肽1-40(C端)抗體2,3-二丁烷 ≥99.9% (GC)
beta-Amyloid 1-40(CT) β淀粉樣肽 1-40 (C端)抗體2,3-二丁烷 Standard for GC,>99.5%(GC)
beta-Amyloid(1-42) β淀粉樣肽(1-42)抗體2,2-二己烷 98%