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細(xì)胞凋亡檢測試劑盒I(POD)

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更新時間:2022-04-21 12:21:23瀏覽次數(shù):261

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 20T
貨號 GOY-01X9643 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
細(xì)胞凋亡檢測試劑盒I(POD)公司*的產(chǎn)品:ECE1 內(nèi)皮轉(zhuǎn)化1抗體丁異戊酯 99%
ECE2 內(nèi)皮轉(zhuǎn)化2抗體丁異戊酯 GCS,≥99.5% (GC)
ECG2 食道癌相關(guān)因抗體丁異戊酯 ≥98%, FCC, Kosher, FG
ECM1 外質(zhì)蛋白1抗體己異丁酯 98%
ECP 嗜性粒陽離子蛋白抗體異戊酯 AR,99%
ED-1 外胚層發(fā)育不良抗體異戊酯 CP,98%
EDNR

詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

②生物膜與細(xì)胞器的研究;

③細(xì)胞骨架體系的研究;

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性:

中文名稱:細(xì)胞凋亡檢測試劑盒I(POD)

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:20T

發(fā)貨周期:1~3天

商品介紹:

工作原理:

在機(jī)體內(nèi)部隨時都在發(fā)生著細(xì)胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細(xì)胞的死亡,其特征為核染色質(zhì)的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚,時間也很短暫。凋亡的特征是內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活,細(xì)胞自身的染色質(zhì)或DNA被切割,出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口,并產(chǎn)生與 DNA 斷點(diǎn)數(shù)目相同的3’-OH末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將標(biāo)記的dUTP(DIG-dUTP)標(biāo)記至 3’-OH末端,DIG-dUTP結(jié)合在DNA斷點(diǎn)部位,可以通過生物標(biāo)記的抗抗體(Anti-DIG-Biotin)反應(yīng)后,再結(jié)合鏈酶親和素-過氧化物酶(SABC),然后加入顯色底物DAB予以顯示。凋亡的細(xì)包核呈黃色,從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細(xì)胞。

試劑盒內(nèi)容:

1.標(biāo)記緩沖液(Labeling Buffer)1ml

2.末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT,×20)20μl

3.DIG-dUTP(×20)20μl

4.封閉液(Blocking Reagent)4ml

5.生物素化抗抗體(× 100)20μl

6.SABC(× 100)20μl

7.Proteinase K(×200)50μl

8.抗體稀釋液 4ml

保存條件:-20℃冰凍保存。

保存期:一年

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

基質(zhì)金屬蛋白10(MMP10)英文名稱:MMP10 ELISA Kit7號染色體開放閱讀框59抗體包裝5MG

基質(zhì)金屬蛋白1(MMP1)英文名稱:MMP1 ELISA Kit7號染色體開放閱讀框64抗體包裝250mg

肌原纖蛋白1(FBN1)英文名稱:FBN1 ELISA Kit8號染色體開放閱讀框12抗體包裝1g

肌營養(yǎng)不良蛋白關(guān)聯(lián)糖蛋白1(DAG1)英文名稱:DAG1 ELISA Kit8號染色體開放閱讀框31抗體包裝250mg

肌營養(yǎng)不良蛋白(DMD)英文名稱:DMD ELISA Kit8號染色體開放閱讀框33抗體包裝5g

肌細(xì)胞生成(MYOG)英文名稱:MYOG ELISA KitⅡ型膠原蛋白抗體包裝100g

肌微管相關(guān)蛋白9(MTMR9)英文名稱:MTMR9 ELISA Kit軟骨蛋白1抗體包裝25g

肌肽合1(CARNS1)英文名稱:CARNS1 ELISA Kit顱面部發(fā)育蛋白1抗體包裝500g

肌激MB同工(CKMB)英文名稱:CKMB ELISA Kit肥大羧肽A3抗體包裝1g

肌肉生長抑制(MSTN)英文名稱:MSTN ELISA Kit1號染色體開放閱讀框105抗體包裝250mg

肌球蛋白重鏈4(MYH4)英文名稱:MYH4 ELISA KitⅠ型補(bǔ)體受體抗體(C3b/C4b受體抗體)包裝5g

肌球蛋白重鏈2(MYH2)英文名稱:MYH2 ELISA Kit趨化樣因子受體1抗體包裝1g

肌球蛋白重鏈1(MYH1)英文名稱:MYH1 ELISA Kit趨化樣因子受體1抗體包裝1g

肌球蛋白ⅤA(MYO5A)英文名稱:MYO5A ELISA Kit磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝1g

肌球蛋白ⅠA(MYO1A)英文名稱:MYO1A ELISA Kit磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝250mg

銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品整合αM型試劑盒魚藤;Rotenone

東京根霉Rhizopus│tonkinensis 質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分Sigma P4394 整合αⅤβ3試劑盒異銀杏雙黃;Isoginkgetin

云芝栓孔菌Trametes│versicolor (L.) Lloyd 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,培養(yǎng)級,BR整合α4試劑盒異丁酰紫草;Isobutyrylshi
細(xì)胞凋亡檢測試劑盒I(POD)釀酒酵母 十八酰轉(zhuǎn)酮Elisa

單色下皮黑孔 2-氯-4-氟-5-轉(zhuǎn)移因子Elisa

大腸埃希氏桿 二乙烯三五乙酸鐵-鈉絡(luò)合物自然殺傷Elisa

類芽孢桿屬 葡萄糖酸亞鐵鹽自噬基因Beclin 1Elisa

迪氏野野村氏 2,6-二氟對甲氧基苯總UL16結(jié)合蛋白Elisa

枯草芽孢桿 2-庚總β淀粉樣蛋白Elisa

構(gòu)巢曲霉 己二酸二辛酯總膽紅Elisa

惡臭假單胞 萘1,3,6-三磺酸三鈉鹽水合物總膽汁酸Elisa

Bacillus tequilensis 2-溴-7-芴總蛋白Elisa

環(huán)狀芽胞桿 壬酸乙酯總甲狀腺Elisa

球孢鏈霉 乙氧基亞甲基二總抗氧化能力Elisa

禽腺病Ⅷ型 對二乙氧基苯總?cè)鈮AElisa

粉紅聚端孢霉 甲酸對甲氧芐酯總鐵結(jié)合力Elisa

產(chǎn)黃青霉 鹽酸伊托必利足標(biāo)記蛋白;足盂蛋白Elisa

新城疫病 磺酰唑草酮阻抑Elisa


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