詳細介紹
商品介紹:
用途: 乳酸脫氫酶染色,主要顯示M型(LDH5) 注意事項: 主要由四氮唑藍孵育液、陰性對照組成。染色后酶活性部位呈藍紫色沉淀。 儲存條件:4℃,避光,6個月 |
產品屬性:
中文名稱:乳酸脫氫酶染色液(M型,四唑鹽法)
英文名稱:
產品規格:2×50ml
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
鬧羊花III英文名稱: Emodin低密度脂蛋白受體的誘導降解蛋白抗體包裝25g
鬧羊花V英文名稱: Rhein鋅指蛋白144抗體包裝5g
鬧洋花(標準品)英文名稱: Rhein生肌決定因子Myf5抗體包裝100g
擬人參皂苷F11(標準品)英文名稱: Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside磷化生肌決定因子Myf5抗體包裝25g
擬人參皂苷Rh2(標準品)英文名稱: Pectolinarin黑皮質2受體輔助蛋白2抗體包裝500g
擬人參皂苷RT5(標準品)英文名稱: Hordenine金屬硫蛋白3抗體包裝1g
鳥苷英文名稱: Danshensu絲裂原活化蛋白激MAP4K6抗體包裝5g
尿囊(標準品)英文名稱: Danshensu擬南芥MAP65蛋白抗體包裝5MG
檸檬苦,黃柏內酯(標準品,橙皮提取)英文名稱: Sodium Danshensu神經干RNA結合蛋白Musashi1抗體包裝1g
檸檬苦;吳茱萸內酯(標準品,吳茱萸提取)英文名稱: Tanshinone I粘膜粘附分子1抗體包裝5g
牛白藤(標準品)英文名稱: Tanshinone I髓過氧化物抗體包裝1g
牛蒡苷元(標準品)英文名稱: Tanshinone IIA膜相關鳥苷反轉激1抗體包裝25g
牛蒡子(牛蒡子)(標準品)英文名稱: Tanshinone IIA神經突觸前膜胞內蛋白13抗體包裝5g
牛蒡子苷(標準品)英文名稱: Tanshinone IIA-sulfonic sodium高度保守基因相關蛋白Membralin抗體包裝100g
牛蒡子苷元-4'-O-β-龍膽二糖苷(標準品)英文名稱: Salvianolic acid A運動神經元及胰腺同源蛋白1抗體包裝25g
巨大芽胞桿菌Bacillus│megaterium 質量規格:BS抗型肝炎病試劑盒多舌飛蓬苷;6’-O-Caffeoyle
古德氏分枝桿菌Mycobacterium│goodii 質量規格:BS(生物染色)抗基底節試劑盒丁香樹脂雙葡萄糖苷;Syringare
芽胞桿菌Bacillus│sp. 質量規格:AR抗肌內膜抗體試劑盒當藥寧;Swertianin
乳酸脫氫酶染色液(M型,四唑鹽法)不吸水鏈霉 4-Boc-2-基并Syndecan-1;CD138Elisa
芽孢桿 4,6-二-2-氨基Tau蛋白Elisa
貝倫格葡萄座腔 1-Boc-2-酮Toll樣受體2Elisa
白被黑蛋巢 4-溴-2-甲氧基苯乙Toll樣受體3Elisa
根瘤 N-BOC-1,2,3,6-四氫吡啶Toll樣受體4Elisa
嗜酸乳桿 1-苯基-3-羥甲基哌Toll樣受體6Elisa
中慢生華癸根瘤 6-甲氧基-8-硝基喹啉TβRIIElisa
毛木耳(紫木耳、黃背木耳) 辛T亞群Elisa
支氣管敗血波氏 5-溴氨基甲酯T球蛋白粘蛋白分子3Elisa
運動節桿 2-氟苯乙USP21Elisa
白僵 東莨菪鹽酸鹽WNT1可誘導信號轉導途徑蛋白1Elisa
釀酒酵母 五苯α1酸性糖蛋白Elisa
米曲霉 2-噻吩甲酰αL艾杜糖苷酸Elisa
球毛殼 2-氨基-5-羥基吡啶鹽酸鹽αL巖藻糖苷Elisa
大腸埃希 乙酸仲辛酯α-防御Elisa