商品介紹:
英文名稱:Alisertib 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg Alisertib是一種具有選擇性的Aurora A抑制劑,IC50值為1.2nM,對(duì)Aurora A的選擇性高于Aurora B。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1028486-01-2 別名:MLN 8237 純度:99.43% 分子量:518.92 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Aurora A抑制劑(Alisertib)
英文名稱:Alisertib
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
釀酒酵母角蛋白19抗體Human IK(Protein Red) ELISA Kit人抗雙載蛋白(AMPH)抗體免疫試劑盒
哈茨木霉1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框147抗體Human FCER1A(High affinity immunoglobulin epsilon receptor subunit alpha) ELISA Kit人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)IgG免疫試劑盒
綠色木霉膽固21-羥化抗體Human BIN1(Myc box-dependent-interacting protein 1) ELISA Kit人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA(dsDNA)抗體(IgM)免疫試劑盒
球孢白僵菌畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗體(C端)Human FUT3(Galactoside 3(4)-L-fucosyltransferase) ELISA Kit人抗生長(zhǎng)激(GH)抗體免疫試劑盒
金灰青霉補(bǔ)體C1qL3鏈多肽抗體Human HSF4(Heat shock factor protein 4) ELISA Kit人抗腎小球基底膜(GBM)抗體免疫試劑盒
毛木耳腫瘤/抗原27抗體(高遷移率族蛋白)Human HEXB(Beta-hexosaminidase subunit beta) ELISA Kit人抗腎小管基底膜抗體(TBM)免疫試劑盒
金龜子綠僵菌1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框228抗體Human TNFRSF10B(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10B) ELISA Kit人抗腎上腺皮質(zhì)抗體(AAA)免疫試劑盒
死亡谷芽孢桿菌碳酐3抗體Human PLA2G2A(Phospholipase A2, membrane associated) ELISA Kit人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)免疫試劑盒
傳染性法氏囊病病親環(huán)蛋白(親環(huán))PPIA抗體Human IK(Protein Red) ELISA Kit人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)免疫試劑盒
慢生根瘤菌鈣網(wǎng)蛋白抗體Human FCER1A(High affinity immunoglobulin epsilon receptor subunit alpha) ELISA Kit人抗神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)自身抗體免疫試劑盒
堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌腫瘤/抗原65Human BIN1(Myc box-dependent-interacting protein 1) ELISA Kit人抗殺菌通透性增高蛋白抗體(BPI-Ab)免疫試劑盒
雞傷寒沙門(mén)氏菌2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框25抗體Human FUT3(Galactoside 3(4)-L-fucosyltransferase) ELISA Kit人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)免疫試劑盒
嗜果刀孢伴侶蛋白9抗體Human HSF4(Heat shock factor protein 4) ELISA Kit人抗軟骨抗體(anti-cartilage-Ab)免疫試劑盒
聚多曲霉7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框25抗體Human HEXB(Beta-hexosaminidase subunit beta) ELISA Kit人抗?fàn)盍霾?7型(HPV17)抗體(IgG)免疫試劑盒
豬鏈球菌COG1蛋白抗體Human TOP2A(DNA topoisomerase 2-alpha) ELISA Kit人抗人絨毛膜促性腺激抗體(AhCGAb)免疫試劑盒
蘑菇過(guò)敏C3受體/補(bǔ)體C3受體抗體Human NEFA(Nesfatin-1) ELISA Kit人抗染色質(zhì)解旋DNA結(jié)合蛋白4(CHD4)抗體免疫試劑盒
毛霉Mucor│sp. 質(zhì)量規(guī)格:AR26S蛋白體非ATP調(diào)節(jié)亞基11試劑盒掌葉防已堿;巴馬汀
地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格:IND25羥基維生D3試劑盒異丹酚B
ATCC6538資源名稱: 金黃色葡萄球菌金黃亞種 質(zhì)量規(guī)格:IND25羥基維生D2試劑盒大豆皂苷Aa
Aurora A抑制劑(Alisertib)稻梨孢 2,5-二甲氧基-β-乙烯總巰基Elisa
玫煙色棒束孢 3-氟-4-吡啶甲硝基還原Elisa
香菇屬 6-氟-2-吡啶甲酸羥甲基戊二酸單酰Elisa
海綿假單胞 3-甲基-1H-吡唑-5-甲酸淀粉Elisa
水稻腸桿 4-硝基三氟甲苯磷酸核糖焦磷酸Elisa
阿利坎特港富鹽 3-羥基苯硫酚血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3Elisa
米曲霉 4-(三氟甲基)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子DElisa
Thermobifida Tris-(2-cyanoethyl)phophine神經(jīng)絲蛋白H磷酸化亞型Elisa
耐賴氨酸芽孢桿 2-基硅乙炔基噻吩心肌肌漿網(wǎng)鈣泵Elisa
釀酒酵母 氫氧化鋇水合物維生K1Elisa
光滑青霉 L-鳥(niǎo)氨酸甲酯凝集Elisa
嗜熱鏈球 4-(三氟甲基硫代)苯甲組織多肽特異性抗原Elisa
pBV220 2--4-甲酸糖類(lèi)抗原19-9Elisa
黃柄曲霉 2--4-甲酸糖類(lèi)抗原12-5Elisa
紅細(xì) 3,5-二硝基三氟甲苯糖類(lèi)抗原15-3Elisa