詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
A-1210477 | 5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
英文名稱:A-1210477 產品規格:5mg|10mg|50mg|100mg A-1210477是一種有效的,選擇性的MCL-1抑制劑,較弱地作用于BCL-2和BCL-XL,Ki值分別為0.45nM,132nM和>660nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1668553-26-1 純度:98.89% 分子量:850.04 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
鴨疫里氏桿菌成纖維生長因子受體4抗體Human CDIPT (CDP-diacylglycerol–inositol 3-phosphatidyltransferase) ELISA KIT牛單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒
嘴突凸臍蠕孢凝血原(纖維介)抗體Human CASKIN1 (Caskin-1) ELISA KIT牛催乳(PRL/LTH)免疫試劑盒
牛布氏菌陽性血清品(虎紅平板)衰老關鍵蛋白抗體Human CMYA5 (Cardiomyopathy-associated protein 5) ELISA KIT牛催產(OT)免疫試劑盒
Rhizobium 凋亡調節基因之一抗體Human CRTAC1 (Cartilage acidic protein 1) ELISA KIT牛促性腺激釋放激(GnRH)免疫試劑盒
塔氏糖多孢菌凋亡調節基因之一抗體(短型)Human NCAM2(Neural cell adhesion molecule 2) ELISA Kit牛促腎上腺皮質激(ACTH)免疫試劑盒
銅綠假單胞菌纖維連接蛋白抗體Human CABS1 (Calcium-binding and spermatid-specific protein 1) ELISA KIT牛促卵泡(FSH)免疫試劑盒
大腸埃希菌FosB蛋白抗體Human MICU1(Calcium uptake protein 1, mitochondrial) ELISA Kit牛促甲狀腺(TSH)免疫試劑盒
金黃殼囊孢FRA2/FOSL2抗體Human CAPS2 (Calcyphosin-2) ELISA KIT牛雌(E1)免疫試劑盒
墳墓節桿菌叉頭蛋白P3抗體Human CCIN (Calicin) ELISA KIT牛雌三(E3)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌成纖維生長因子8抗體Human CAMSAP1 (Calmodulin-regulated spectrin-associated protein 1) ELISA KIT牛雌激(E)免疫試劑盒
土曲霉肌動蛋白結合蛋白Fascin抗體Human AP1M1(AP-1 complex subunit mu-1) ELISA Kit牛雌二(E2)免疫試劑盒
燒土正青霉線粒體裂變1蛋白抗體Human COMTD1 (Catechol O-methyltransferase domain-containing protein 1) ELISA KIT牛成纖維生長因子23(FGF23)免疫試劑盒
雞縱菌叉頭蛋白P1抗體Human CASQ1 (Calsequestrin-1) ELISA KIT牛成纖維生長因子21(FGF21)免疫試劑盒
蘋果錐梗孢鼠疫F1蛋白/鼠疫耶爾森氏菌莢膜抗原F1單克抗體Human CTNND1 (Catenin delta-1) ELISA KIT牛長鏈脂酰CoA脫氫(ACADL)免疫試劑盒
噬尼古丁節桿菌纖維母生長因子5抗體Human CTCF (Transcriptional repressor CTCF) ELISA KIT牛草酰乙免疫試劑盒
微紫青霉脆性X綜合征相關蛋白AFF1抗體Human CTNNBIP1 (Beta-catenin-interacting protein 1) ELISA KIT牛布魯氏桿菌抗體(IgM)免疫試劑盒
壁芽孢桿菌Bacillus│muralis 質量規格:standard for GC,≥99.5%(GC)L-天冬酰
巴貝斯蟲未定種(伊寧株)Babesia│sp. 質量規格:Standard for GC,≥99.5%(GC)L-天冬
地芽孢桿菌Geobacillus│sp. 質量規格:Standard for GC ,>99%(GC)L-蘇
MCL-1抑制劑(A-1210477)地星 二溴雙(三叔丁基膦)二鈀(I)高密度脂蛋白Elisa
鹽沼鹽桿 4,4',4''-三[2-萘基苯基氨基]三苯基甲狀旁腺Elisa
根桿屬 沙丁甲狀腺Elisa
樟疫霉* 2-(甲基硫代)乙降鈣Elisa
釀酒酵母 FMOC-L-3-(2-吡啶基)-氨酸金屬硫蛋白Elisa
pIB139 1-溴-2-氟-4-磷脂Elisa
龜裂鏈霉 十一烷二酸磷脂酰Elisa
粗糙擬迷孔 4,4'-二溴-2,2'-聯吡啶磷脂酰乙Elisa
大囊接霉 N-叔丁氧羰基-去甲托品酮硫氧化還原蛋白Elisa
草菇 2--4-煙酸甲酯卵白蛋白Elisa
大豆慢生根瘤 3-氟-5-(三氟甲基)苯甲卵黃抗體Elisa
鴨疫里氏桿 4-氟-3-三氟甲基溴芐卵類粘蛋白Elisa
鏈狀雙歧桿 2-氟-3-(三氟甲基)苯甲基溴卵清蛋白特異性IgGElisa
略紫鏈霉 硝酸鉑溶液卵清轉鐵蛋白Elisa
地衣生考克娃酵母 4-硫酚球蛋白AElisa