詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:乳酸脫氫酶染色液(四唑鹽法)
英文名稱:
產品規格:2×50ml
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
用途: 乳酸脫氫酶染色 注意事項: 主要由四氮唑藍孵育液、陰性對照組成。染色后酶活性部位呈藍紫色沉淀。 儲存條件:4℃,避光,6個月 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
牡丹皮(標準品)英文名稱: Saikosaponin B2珠蛋白1抗體包裝100ml
牡丹皮苷C英文名稱: Saikosaponin C肌球蛋白輕鏈9抗體包裝25ml
牡荊(標準品)英文名稱: Saikosaponian D磷化肌球蛋白輕鏈9抗體包裝1g
牡荊-4''-O-葡萄糖苷英文名稱: HederageninNADH復合體1抗體包裝5g
牡荊葡萄糖苷(標準品)英文名稱: Hederagenin癌相關抗原抗體包裝100g
牡荊鼠李糖苷(標準品)英文名稱: Epimedin A組蛋白乙酰轉移MOF抗體包裝25g
木鱉子(標準品)英文名稱: Epimedin A1間質蛋白抗體包裝10g
木芙蓉葉(標準品)英文名稱: Epimedin B肌球蛋白輕鏈3抗體包裝100g
木瓜(標準品)英文名稱: Epmedin C多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體包裝25g
木蝴蝶苷A(標準品)英文名稱: Aurantio-obtusin同源結構蛋白1抗體包裝5g
木蝴蝶苷B(標準品)英文名稱: Hesperidin增殖誘導蛋白5/肺癌相關蛋白10抗體包裝1g
木蘭花堿(標準品)英文名稱: Hesperidin肌鈀蛋白抗體包裝5g
木蘭花堿(標準品)英文名稱: Hesperitin肌管相關蛋白2抗體包裝25g
木蘭脂(標準品)英文名稱: Cordycepin基質金屬蛋白18/19抗體包裝10g
木棉花(標準品)英文名稱: Nobiletin增殖相關蛋白MAGOH抗體包裝250g
JCM9420=ATCC51300=DSM44048=IFO15854=IMSNU資源名稱: 盧森坦類諾卡氏菌 質量規格:>97%,游離抗膠原蛋白抗體試劑盒扁豆堿;PhysostigMine
康寧木霉Trichoderma│konigii 質量規格:BS生物染色級抗狀腺微粒體抗體試劑盒冬凌草乙;Ponicidin
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:BS抗狀腺球蛋白抗體試劑盒多烯紫杉;Docetaxel
乳酸脫氫酶染色液(四唑鹽法)產氨短桿 6-叔丁基-3H-噻吩[2,3-D]嘧啶-4-酮III型前膠原Elisa
4-異基苯乙IV型膠原Elisa
華特拉根瘤 4-異基苯I型膠原Elisa
芽胞桿 Fmoc-L-羥脯氨酸芐酯I型前膠原Elisa
蠟樣芽孢桿 肉桂基溴I型前膠原羧基端肽Elisa
馬泰勒蟲(青海剛察株) 七甲基壬烷I型前膠原N端前肽Elisa
枯草芽孢桿 還原橙 3L-谷氨酸脫氫Elisa
牛瘟病 2-(甲基)喹啉N2乙酰受體IgGElisa
副結核補體結合試驗(-)陰性血清 3-苯基-5-氨基異噁唑N2乙酰受體IgG1Elisa
土壤短芽胞桿 3-溴-5-(三氟甲基)吡啶N2乙酰受體IgG2Elisa
琥珀乳牛肝 3,4,5-三苯酸Na-K-ATPElisa
大腸埃希 5-溴-2-茚滿N端前腦鈉Elisa
干酪乳桿 1-烯基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷Elisa
貝萊斯芽胞桿 3-氟-5--4-甲酸骨膜蛋白Elisa
灰離褶傘 非洛地平Phospho (637)-DRP1Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)