以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Ampiroxicam(CP65703)是非選擇性的環(huán)氧化酶抑制劑,有抗炎活性。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):99464-64-9 別名:CP 65703 純度:99.22% 分子量:447.46 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
三七根腐病菌L型鈣通道蛋白a1亞型3抗體Human SMAD2(Mothers against decapentaplegic homolog 2) ELISA Kit人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌(無現(xiàn)貨)L型鈣通道蛋白a1亞型6抗體Human APOM(Apolipoprotein M) ELISA Kit人低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒
肉桂色曲霉色P450 2B6抗體Human APOD(Apolipoprotein D) ELISA Kit人激肽釋放8(KLK 8)免疫試劑盒
焦曲霉磷化β鏈接相互作用蛋白1抗體Human CXCR4(C-X-C chemokine receptor type 4) ELISA Kit人激肽釋放7(KLK 7)免疫試劑盒
大腸埃希菌20號(hào)染色體開放閱讀框62抗體Human AMY2(Amylase Alpha 2, Pancreatic) ELISA Kit人激肽釋放6(KLK 6)免疫試劑盒
殼蕉孢菌凋亡抑制因子1抗體Human DDAH2(N(G),N(G)-dimethylarginine dimethylaminohydrolase 2) ELISA Kit人激肽釋放2(hK 2)免疫試劑盒
尖孢鐮刀菌20號(hào)染色體開放閱讀框27抗體Human HIG2(Hypoxia-inducible gene 2 protein) ELISA Kit人激肽釋放11(KLK 11)免疫試劑盒
加氏乳桿菌酯抑制蛋白C1IN抗體Human SYP(Synaptophysin) ELISA Kit人激肽釋放10(KLK 10)免疫試劑盒
蘇云金芽胞桿菌色P450 2W1抗體Human BST1(ADP-ribosyl cyclase 2) ELISA Kit人激肽釋放1(KLK 1)免疫試劑盒
土曲霉膽堿脫氫抗體Human NES(Nestin) ELISA Kit人激敏感性脂肪(HSL)免疫試劑盒
糙皮側(cè)耳因子誘導(dǎo)凋亡抑制因子1Human PIICP(C-terminal propeptide of Collagen alpha-1(II) chain) ELISA Kit人激動(dòng)異構(gòu)/分裂MB(CKMB)免疫試劑盒
尼阿布芽孢桿菌親環(huán)蛋白PPIB抗體Human PIINP(N-terminal propeptide of Collagen alpha-1(II) chain) ELISA Kit人基質(zhì)衍生因子1β(SDF-1β/SDF1B)免疫試劑盒
普通變形桿菌腫瘤/抗原13抗體Human KISS1R(KiSS-1 receptor) ELISA Kit人基質(zhì)衍生因子1a(SDF1A)免疫試劑盒
橙鱗傘2鈣反應(yīng)因子抗體Human DCP(Des-gamma carboxyprothrombin) ELISA Kit人基質(zhì)裂解蛋白/基質(zhì)溶(MAT)免疫試劑盒
北里胞菌分裂周期蛋白2亞型1抗體Human GZMM(Granzyme M) ELISA Kit人基質(zhì)金屬蛋白組織抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒
羊無漿體(青海海宴株)20號(hào)染色體開放閱讀框74抗體Human PNPLA6(Neuropathy target esterase) ELISA Kit人基質(zhì)金屬蛋白抑制因子4(TIMP-4)免疫試劑盒
嗜冷海桿菌Marinobacter│psychrophilus 質(zhì)量規(guī)格:IND亞油
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:BS蓖麻
伯克霍爾德氏菌屬菌種Burkholderia│sp. 質(zhì)量規(guī)格:IND4-氧基
環(huán)氧化酶抑制劑(Ampiroxicam)抗促狀腺受體抗體(TRAb)檢測試劑盒英文名稱:TRAb ELISA Kit腺相關(guān)病5 VP1抗體包裝5MG
抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)檢測試劑盒英文名稱:α-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit脂肪脫氫抗體包裝100g
抗Smith抗體(Sm)檢測試劑盒英文名稱:Sm ELISA Kit抗利尿1A抗體包裝25g
卷曲螺旋域結(jié)合蛋白80(CCDC80)檢測試劑盒英文名稱:CCDC80 ELISA Kit抗利尿受體1B抗體包裝5g
巨噬細(xì)胞移動(dòng)因子(MIF)檢測試劑盒英文名稱:MIF ELISA Kit二磷腺苷核糖基化因子鳥嘌呤核苷交換因子2抗體包裝1g
巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)檢測試劑盒英文名稱:MIF ELISA Kitα增強(qiáng)子結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)檢測試劑盒英文名稱:MIP-5 ELISA Kit脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)10抗體包裝250mg
巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)檢測試劑盒英文名稱:MIP-3β/ELC/CCL19 ELISA Kit蛋白激A錨定蛋白7抗體包裝1g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)檢測試劑盒英文名稱:MIP-3α/CCL20 ELISA Kit腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體12抗體包裝5g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)檢測試劑盒英文名稱:MIP-2 ELISA Kit腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體9抗體包裝25g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)檢測試劑盒英文名稱:MIP-1δ/CCL15 ELISA Kit三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4抗體包裝5g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)檢測試劑盒英文名稱:MIP-1β/CCL4 ELISA Kit肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM3抗體包裝100g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP1α)檢測試劑盒英文名稱:MIP1α ELISA Kit高爾基復(fù)合體相關(guān)蛋白1抗體包裝25g
巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)檢測試劑盒英文名稱:MDC/CCL22 ELISA Kit乙酰羧化1ACCα抗體包裝100mg
巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)檢測試劑盒英文名稱:M-CSF ELISA Kit腺嘌呤核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1、2、3、4抗體包裝1g