化工儀器網
詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Caspase-2 Activity colorimetric assay Kit | 20T|50T|100T | 1～3天 |
商品介紹：
本試劑盒適用于測定哺乳動物組織、細胞caspase-2活性。測定原理基于Caspase-2特異水解其多肽底物N-acetyl-Val-Asp-Val-Ala-Asp-pNA(Ac-VDVAD-pNA)，釋放出游離的硝基pNA，后者呈黃色在405nm具有大吸收峰，用可見光分光光度比色方法測定。其吸光度值對應于Caspase-2的水解活性。 細胞凋亡屬于程序化細胞死亡，可見于各種器官和細胞，在正常發育、生理、病理過程中對細胞和器官的穩態具有十分重要的調節作用。Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是參與細胞凋亡過程的蛋白酶家族，包含10多個成員。Caspase-2也稱Ich-1或Nedd-2，在細胞凋亡的信號轉導過程中被激活。 運輸及保存：試劑常溫運輸。到達后按要求儲存，1年內穩定。 所需儀器：酶標儀與96孔酶標板；或可見光分光光度計配100μl容積的石英比色杯。 工作波長：大吸收波長405nm，如不具備也可在400～450nm范圍內測定，但靈敏度略降。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
灰黃霉(標準品)英文名稱： Ethionamide補體C1RL鏈多肽抗體包裝5g
灰黃霉（標準品）英文名稱： Etravirine周期M2抗體包裝100g
回拉西坦;茴拉西坦（標準品）英文名稱： Famotidine周期T2抗體包裝25g
茴三硫（標準品）英文名稱： Famotidine周期K抗體包裝5g
茴香（標準品）英文名稱： Febuxostat抗菌肽CAMP抗體包裝25g
肌(標準品)英文名稱： Febuxostat5號染色體開放閱讀框4抗體包裝5g
肌苷(標準品)英文名稱： Phenacetin4號染色體開放閱讀框44抗體包裝1g
肌酐（標準品）英文名稱： Phenacetin4號染色體開放閱讀框33抗體包裝5g
?。藴势罚┯⑽拿Q： Fingolimod HCL /FTY-7204號染色體開放閱讀框42抗體包裝1g
吉非羅齊（標準品）英文名稱： Fingolimod HCL /FTY-7205號染色體開放閱讀框33抗體包裝5g
吉莫斯特;吉美嘧啶(標準品)英文名稱： Flufenamic acid9號染色體開放閱讀框89抗體包裝5mg
吉它霉（標準品）英文名稱： Flufenamic acid19號染色體開放閱讀框66抗體包裝1mg
己內酰（標準品）英文名稱： Flumazenil21號染色體開放閱讀框55抗體包裝5g
加巴噴?。藴势罚┯⑽拿Q： Flumazenil21號染色體開放閱讀框70抗體包裝25g
加替沙星（標準品）英文名稱： Fluoxetine Hydrochloride胱抑A/半胱蛋白抑制劑A抗體包裝5g
里拉微球菌Micrococcus│lylae 質量規格：>98%小扁豆結合型胎蛋白/胎蛋白異質體3試劑盒五味子酯;Schisantherin
葡萄座腔菌Botryosphaeria│dothidea (Moug.) Ces. & De Not. 質量規格：≥99.0%,BR小扁豆結合型胎蛋白/胎蛋白異質體2試劑盒;Aconitine
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質量規格：含量>99.0%小扁豆結合型胎蛋白/胎蛋白異質體1試劑盒五味子;Schisandrin A
Caspase-2活性測定試劑盒秦氏蜜環 鄰苯二乙視網膜母瘤蛋白 1Elisa
泡盛曲霉 庚二酸二乙酯絲酸酮酸氨基轉移Elisa
枯草芽孢桿 1-甲基-1H-咪唑-2-羧酸可溶性CD25Elisa
漢遜德巴利酵母漢遜變種 4-甲基噻唑-5-甲酸核苷二磷酸激AElisa
不解糖鞘氨單胞 苯基乙烯基亞砜低氧誘導因子1α抗體Elisa
棒曲霉 2,4,5-三氟甲酯白介1受體抗體Elisa
麻臉蘑菇 辛酸異戊酯前列腺Elisa
杏鮑菇 2-氨基-4-氟苯并噻唑幽門螺桿IgA抗體Elisa
炭黑曲霉 2-氨基-5-氯苯并噻唑L-羥脯氨酸Elisa
大腸埃希氏 3-氟-4-卵磷脂膽固?；D移Elisa
類芽孢桿屬 6-硝基藜蘆基質Gla蛋白Elisa
亞細亞屬 2-氟-5-乙酸內質網氨基肽1Elisa
東方伊薩酵母 3,4,5-基肉桂酸甲酯天皰瘡抗體Elisa
根瘤 TAE684 (NVP-TAE684)NADPH氧化Elisa
青紫鏈霉 三單甲半胱氨酸蛋白8Elisa
化工儀器網