詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:堿性蛋白染色液(細胞專用)
英文名稱:
產品規格:2×50ml
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
用途: 顯示細胞中堿性蛋白,尤其是組蛋白 注意事項: 細胞核大部分被染成綠色。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
止瀉木子(標準品)英文名稱: H-Pyr-OH人內源性逆轉錄病膜糖蛋白2抗體包裝5g
枳殼(標準品)英文名稱: Z-Pyr-OHBeta基己糖苷beta亞基蛋白B鏈抗體包裝1g
枳實(橙)(標準品)英文名稱: DL-m-TyrosineHEXIM2蛋白抗體包裝250mg
制何首烏(標準品)英文名稱: H-Sar-OMe·HCl3'-5'外切1蛋白抗體包裝10g
腫節風(草珊瑚)(標準品)英文名稱: L-Isoleucinol型肝炎病NS5B抗體包裝100g
重樓(云南重樓)(標準品)英文名稱: L-Leucinol缺氧誘導基因1C蛋白抗體包裝25g
重樓皂苷II(標準品)英文名稱: Boc-LeucinolHEG同源蛋白1抗體包裝500g
重樓皂苷I(標準品)英文名稱: L-Phenylalaninol人腫瘤抑制蛋白抗體包裝1g
重樓皂苷VII(標準品)英文名稱: L-TryptophanolHemk基轉移家族1號蛋白抗體包裝5g
重樓皂苷VI(標準品)英文名稱: Fmoc-ValinolHemk基轉移家族2號蛋白抗體包裝1g
珠子草(標準品)英文名稱: D-ValinolHEN1基轉移同源蛋白1抗體包裝250mg
豬膽粉(標準品)英文名稱: L-Phenylglycinol缺氧誘導基因2蛋白抗體包裝5g
豬苓C英文名稱: BOC-L-Prolinol乙肝病衣殼蛋白抗體包裝25g
豬去氧膽(標準品)英文名稱: 2-Amino-1,3-propanediol 型肝炎病1a基因型NS5蛋白抗體包裝5g
豬牙皂(標準品)英文名稱: N-Methyl-d-Aspartic Acid戊型肝炎病抗體包裝50g
鮑曼/醋鈣復合不動桿菌Acinetobacter│baunannii/calcoaceticus complex 質量規格:>98%,標準品流感B病試劑盒10-氧基;10-Methoxy
青霉屬Penicillium│sp. 質量規格:>99%,BR流感B病試劑盒基丁香酚;Methyl eugenol
暫無Haematobacter│sp. 質量規格:HPLC>98%,標準品流感A病抗體IgG 巨豆三烯;Tabanone
堿性蛋白染色液(細胞專用)稻梨孢 香蘭基丁羽狀斑駁病Elisa
赤霉 Raloxifene HCl輕型黃邊病Elisa
核黃德沃斯氏 鹽酸喹那普利烯酰-CoA水合Elisa
豇豆慢生根瘤 Fmoc-L-4-苯氨酸淀粉Elisa
蘇云金芽孢桿 2-氨基-6-溴嘌呤NAD-蘋果酸Elisa
土壤伯克氏 1-O-癸基-β-D-麥芽糖苷NADP-蘋果酸Elisa
黑曲霉 3-氯-5-甲氧基碳酸酐βElisa
亮白曲霉 3-甲基氨酸氨基轉移Elisa
黃曲霉 4-(2-三氟氧基)天門冬氨酸氨基轉移Elisa
黃色毛霉 (R,R)-(+)-雙(α-甲芐基)鹽酸鹽L(+)-3-羥脂酰脫氫Elisa
小紅酵母 基環三氧烷NADP-依賴蘋果酸脫氫Elisa
香栓 2-氯-5-(三氟甲基)苯甲脫鎂葉綠AElisa
少根根霉原變種 糖精鈉 水合物7-羥基Elisa
芽孢桿 7,7-二氯二環[4.1.0]庚烷Elisa
枯草芽孢桿 3-溴4-氯苯蘋果酸脫氫Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)