詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:細胞凋亡-Hoechst染色試劑盒
英文名稱:
產品規格:100T
發貨周期:1~3天
商品介紹:
用途: 快速簡便的細胞凋亡檢測 注意事項: 由固定液、染色液、熒光封片劑組成,貼壁細胞,適用于懸浮細胞和組織切片。 儲存條件:-20℃,避光,12個月 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
(標準品)英文名稱: EicosaneGA結合蛋白轉錄因子α/GABP-α抗體包裝1g
青蒿(標準品)英文名稱: HeneicosaneGA結合蛋白轉錄因子β/GABP-β1/GABP-β2抗體包裝25g
青皮(標準品)英文名稱: Docosane 谷脫羧65+谷脫羧67抗體包裝5g
青藤堿(標準品)英文名稱: Tricosane谷脫羧樣蛋白1抗體包裝10mg
青陽參苷元A(標準品)英文名稱: Tetracosane葡萄糖-6-磷3/G6Pase-β抗體包裝1g
青陽參苷元B(標準品)英文名稱: Pentacosaneα葡萄糖苷/溶體α-葡糖苷抗體包裝5g
氫檳榔堿(標準品)英文名稱: Methyl n-Octanoate生長因子受體結合蛋白2相關蛋白3抗體包裝1g
氫東莨菪堿(標準品)英文名稱: Methyl Nonanoate 生長因子受體結合蛋白2相關蛋白4抗體包裝5g
氫高烏(標準品)英文名稱: Methyl Laurate G基丁受體pi/GABAA Rπ抗體包裝1g
苘麻子(標準品)英文名稱: Methyl Myristate磷化G基丁B型受體2抗體包裝5g
秋仙堿(標準品)英文名稱: Methyl StearateG蛋白偶聯受體結合蛋白α11/Gα 11 抗體包裝1g
曲克蘆丁(標準品)英文名稱: Methyl LinolenateG3BP2蛋白抗體包裝5g
驅蟲斑鳩菊(標準品)英文名稱: Methyl Linoleateγ基丁運載蛋白2抗體包裝1g
去斑蝥(標準品)英文名稱: 1-Undeceneβ1-6 N-乙酰基葡萄糖轉移3抗體包裝5g
去斑蝥(標準品)英文名稱: 1-Dodecene β1-6 N-乙酰基葡萄糖轉移7抗體包裝1g
海假交替單胞菌Pseudoalteromonas│marina 質量規格:>98%,標準品凝血受體試劑盒木糖;Xylitol
邊緣假單胞菌Pseudomonas│marginalis 質量規格:>98%,USP,BR凝血抗凝血復合物試劑盒莽草;Shikimic acid
纖維單胞菌Cellulomonas│sp. 質量規格:>98%凝血試劑盒木蝴蝶苷B;Oroxin B
細胞凋亡-Hoechst染色試劑盒天麻蜜環(京-234)* 4-溴-3,5-二促黃體生成;絨毛膜促性腺受體Elisa
假單胞屬 4-芐鹽酸鹽谷氨酰酰基環化Elisa
樟疫霉 2,4-二氯-1,8-萘啶天門冬氨酸氨基轉移同工Elisa
噻唑-4-羧酸甲酯抗著絲粒蛋白F抗體Elisa
蟲花棒束孢 3,4-(亞甲基二氧基)苯酸脫氫1家族成員B1Elisa
Brenneria salicis 環吡酮雜質AJanus激2Elisa
多主葡萄殼 Fmoc-2-氨基異丁酸Janus激1Elisa
阪崎腸桿 1-Boc-3-吡咯烷甲促睡眠肽αElisa
松塔牛肝 吡咯烷-3-甲酸抗sp100抗體Elisa
淺紫灰葉鏈霉 1-羥環己基苯酮色C還原核心蛋白1Elisa
新城疫病 3-(3,5-二氧基)-1,2-S亞硝基硫Elisa
鐮孢 鹽酸阿立必利干生長因子-BElisa
短桿屬 噻吩磺(3-磺酰氨基-2-噻吩)微管關聯絲;蘇氨酸激2Elisa
釀酒酵母 2-氟-4-甲氧基苯甲谷氨酸脫氫Elisa
炭疽病 5-苯基吡唑-3-羧酸乙酯微管關聯絲;蘇氨酸激2Elisa