TGF-βR抑制劑(LY2157299)公司*的產(chǎn)品：Mouse rabbit IgG/ Biotin 生物化小鼠抗兔IgGNeuromedin C ≥97% (HPLC)
Mouse Goat IgG/ Biotin 生物化小鼠抗羊IgG美拉諾坦 ≥95% (HPLC)
Mouse Goat IgM/ Biotin 生物化小鼠抗羊IgMD-鳥氨鹽鹽 99%
Mouse human I

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：TGF-βR抑制劑(LY2157299)

英文名稱：LY2157299

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

五通橋毛霉CD9蛋白抗體Human DPEP1(Dipeptidase 1) ELISA Kit人抗血小板抗體(anti-PA Ab)免疫試劑盒

球型接合酵母CD23/FcεRII抗體Human IFNA8(Interferon alpha-8) ELISA Kit人抗胸腺球蛋白(ATG)免疫試劑盒

地衣芽孢桿菌CD27抗體Human PRNP(Major prion protein) ELISA Kit人抗信號(hào)識(shí)別顆粒54kDa蛋白(SRP54)抗體免疫試劑盒

釀酒酵母CD30抗體Human S100A10(Protein S100-A10) ELISA Kit人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌CD43抗體Human STAT5B(Signal transducer and activator of transcription 5B) ELISA Kit人抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)免疫試劑盒

葡萄擬莖點(diǎn)霉CD48抗體Human FZD4(Frizzled-4) ELISA Kit人抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)免疫試劑盒

灰葡萄孢(測(cè)序正確）CD44抗體Human UBQLN1(Ubiquilin-1) ELISA Kit人抗心肌抗體(AMA)免疫試劑盒

根瘤菌整合αX抗體Human NFKB2(Nuclear factor NF-kappa-B p100 subunit) ELISA Kit人抗心肌β1受體(MB1R)自身抗體免疫試劑盒

鹽地喜鹽芽孢桿菌表面趨化因子受體5抗體Human CCDC82(Coiled-coil domain-containing protein 82) ELISA Kit人抗小鼠抗體(HAMA)免疫試劑盒

根霉菌CD2抗體Human APOC4(Apolipoprotein C-IV) ELISA Kit人抗小腦(CE)自身抗體免疫試劑盒

*豬苓C-肽抗體Human S100A2(Protein S100-A2) ELISA Kit人抗小核糖核蛋白/Sm(snRNP/Sm)抗體免疫試劑盒

粘質(zhì)沙雷氏菌鈣結(jié)合蛋白抗體Human COMT(Catechol O-methyltransferase) ELISA Kit人抗線粒體抗體M2亞型(AMA-M2)免疫試劑盒

丁香鏈霉菌C-反應(yīng)蛋白抗體Human CCT8L1P(Putative T-complex protein 1 subunit theta-like 1) ELISA Kit人抗線粒體抗體(AMA)免疫試劑盒

蘋果鏈格孢C-反應(yīng)蛋白單克抗體Human DHFR(Dihydrofolate reductase) ELISA Kit人抗紋狀體(ST)自身抗體免疫試劑盒

盤長(zhǎng)孢狀盤孢環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體Human IFNA10(Interferon alpha-10) ELISA Kit人抗胃壁抗體(AGPA/PCA)免疫試劑盒

德沃斯氏菌促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子抗體Human IFNA8(Interferon alpha-8) ELISA Kit人抗尾狀核(CN)自身抗體免疫試劑盒

: HBUM70179資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格：離子對(duì)色譜用試劑Ⅱ型膠原交聯(lián)C端肽試劑盒阿魏松柏酯

地下節(jié)桿菌Arthrobacter│subterraneus 質(zhì)量規(guī)格：離子對(duì)色譜用試劑Ⅱ型膠原代謝產(chǎn)物C2C試劑盒

核果黑腐皮殼菌Leucostoma│persoonii (Nitschke) Höhn. 質(zhì)量規(guī)格：用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑Ⅱ型膠原C端肽試劑盒孕甾烯;
TGF-βR抑制劑(LY2157299)大腸埃希氏 二烯酸二乙二酯谷氨酸脫羧1Elisa

栗疫 4-羥基-1-茚酮谷氨酸脫羧2Elisa

灰玫瑰青霉 雙(三-o-甲苯基膦)二化鈀(II)脂肪酸連接Elisa

墻支頂孢 2-羥基-4-甲氧基-5-磺酸二苯甲酮硬脂酰去飽和2Elisa

蘇云金芽孢桿 (S,S)-(-)-雙(α-甲芐基)鹽酸鹽弓形蟲IgG抗體Elisa

科恩氏 2.6-二氟-4-甲氧基苯酸血小板膜糖蛋白纖維蛋白原受體Elisa

球形賴氨酸芽孢桿 雙酮-D-半乳糖可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物Elisa

美澳型核果褐腐病 烯基二酸二甲酯凝血因子ⅦElisa

短波單胞 2-乙酰氧基異丁酰溴凝血因子VElisa

白鱗炭角 5′-O-(4,4′-二甲氧基三苯甲基)胸苷凝血因子ⅪElisa

斯氏李斯特氏 N-BOC-2-氨基-5-溴噻唑線粒體呼吸鏈復(fù)合物IElisa

變天藍(lán)鏈霉 4-(二甲基氨甲酰基)苯酸凝血因子XaElisa

糞鞘氨桿 三丁銨雙(三氟甲磺酰)亞凝血因子XIaElisa

根瘤 N,N'-雙芐氧羰基-L-賴氨酸Disabled同源物1Elisa

短芽孢桿屬 3-氟-4-羥基苯磷酸化Disabled同源物1Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)