詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:PKC抑制劑(Bisindolylmaleimide I)
英文名稱:Bisindolylmaleimide I
產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
Bisindolylmaleimide I(GF109203X)是一種具有高度選擇性,細胞可滲透性和可逆性的PKC抑制劑,Ki值為14nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:133052-90-1 別名:GF109203X;Go 6850 純度:98.04% 分子式:C??H??N?O? 分子量:412.48 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大腸埃希氏菌艾滋病病抗體Human SPANXE ELISA Kit大鼠雌三(E3)免疫試劑盒
桿狀毛霉結合珠蛋白相關蛋白抗體Human SPA17 ELISA Kit大鼠雌激硫轉移(SULT1E1)免疫試劑盒
雜色曲霉L-組脫羧抗體Human SLC29A1(EquilibRative nucleoside transporter 1) ELISA Kit大鼠雌激(E)免疫試劑盒
馬克斯克魯維酵母乙型肝炎病X蛋白相互作用蛋白Human Spartin/SPG20 ELISA Kit大鼠雌二受體(ER)免疫試劑盒
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產氣腸桿菌組蛋白去乙酰化4+5+9抗體Human SPAM1 ELISA Kit大鼠雌二(E2)免疫試劑盒
假單胞菌屬熱休克蛋白27相關蛋白1抗體Human SPACA1 ELISA Kit大鼠垂草扁桃(VMA)免疫試劑盒
馬闊里類芽孢桿菌卟膽原脫抗體Human SPAG11A ELISA Kit大鼠穿孔/成孔蛋白(PF/PFP)免疫試劑盒
球孢白僵菌異質核糖核蛋白U2樣蛋白抗體Human SPANXA2/SPANXA1 ELISA Kit大鼠成纖維生長因子9(FGF9)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌肝癌衍生生長因子2抗體Human SPANXB1 ELISA Kit大鼠成纖維生長因子8(FGF8)免疫試劑盒
球孢鏈霉菌肝癌相關抗原57抗體Human SPANXC ELISA Kit大鼠成纖維生長因子23(FGF-23)免疫試劑盒
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玫煙色棒束孢甲型流感病血凝抗體Human SPA17 ELISA Kit大鼠成纖維生長因子10(FGF10)免疫試劑盒
污黑腐皮殼甲狀旁腺功能亢進蛋白2/分裂周期73抗體Human SPANXE ELISA Kit大鼠巢蛋白(NID)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母線粒體絲蛋白抗體Human Spartin/SPG20 ELISA Kit大鼠超氧化物歧化1,可溶性(SOD1)免疫試劑盒
大西洋魯杰氏菌/鈉超化激活環核苷門控通道蛋白2抗體Human SLC29A1(EquilibRative nucleoside transporter 1) ELISA Kit大鼠超氧化物歧化[錳],線粒體(SOD2)免疫試劑盒
血紅栓菌Trametes│sanguinea 質量規格:分析標準品紫菀
沉積物海源菌Idiomarina│sediminum 質量規格:分析標準品,>99%(GC)白鮮堿
大腸埃希氏菌DH5α/pBH10-P(-)vif(-)Escherichia│coli 質量規格:分析標準品q
PKC抑制劑(Bisindolylmaleimide I)AMPK alpha 2 腺苷單活化蛋白激α2抗體二氧烷 ≥99.8% (GC)
AMPK beta 1 腺苷單活化蛋白激β1抗體烯 N,N-二氨酯 95%
phospho-AMPK beta 1(Ser108) 化腺苷單活化蛋白激β1抗體1,3-二羥酮,二聚體 97%
phospho-AMPK beta 1(Ser182) 化腺苷單活化蛋白激β1抗體2,2-二羥偶氮苯 97%
Amylin 糖尿病相關肽/胰島淀粉樣肽抗體二十二碳六烯酯 98%
beta-Amyloid 1-42(CT) β淀粉樣肽1-42 (C端)抗體二十二碳六烯酯 98%
beta-Amyloid(1-16) (human) β淀粉樣肽(1-16)抗體(人)鄰苯二二丁酯 分析標準品
beta-Amyloid(1-16) β淀粉樣肽(1-16)抗體(小鼠、大鼠)2,4-二苯氧 分析標準品
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)