公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:微絲染色液(R250法)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:5×20ml|5×50ml
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
用途: 主要顯示由微絲構(gòu)成的應(yīng)力纖維,由于細(xì)胞對細(xì)胞基質(zhì)的附著和維持扁平鋪展的形狀,該纖維在體外培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞中尤其發(fā)達。 注意事項: 微絲染色液在染色過程中由于微觀結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定,有些纖維在光學(xué)顯微鏡下無法辨認(rèn),因此能夠看到的纖維主要是由微絲組成的應(yīng)力纖維。 儲存條件:4℃,避光,12個月 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
鷓鴣菜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DL-Alanyl-DL-norvalineHERC4 E3泛蛋白連接抗體包裝250mg
珍珠(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3-(1-Naphthyl)-L-alanineHERC6 E3泛蛋白連接抗體包裝5g
珍珠母(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fmoc-3-(2-Naphthyl)-D-alanineMMF誘導(dǎo)片段蛋白1抗體包裝1g
正丁基酞;丁基酞內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Citrulline HERPUD蛋白家族成員2抗體包裝25g
正二十九烷英文名稱: Fmoc-L-Citrulline尿黑氧化抗體包裝5g
芝麻林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Boc-L-β-homoalanine肝生長調(diào)節(jié)因子酪激底物抗體包裝1g
芝麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Boc-L-?-homoaspartic acid 5-benzyl esterT2識別黑色瘤抗原抗體包裝250mg
知母(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fmoc-β-homoaspartic acid肝癌HHCM蛋白抗體包裝5g
知母皂苷A1英文名稱: Fmoc-L-β-Homoglutamic acid 6-tert-butyl ester紫外切除修復(fù)蛋白RAD23A抗體包裝1g
知母皂苷A3(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: H-HomoArg-OH紫外切除修復(fù)蛋白RAD23B抗體包裝250mg
知母皂苷BII(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Hydroxyproline3-羥基異丁脫氫抗體包裝100g
知母皂苷E(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-HydroxyprolineHib乙酰解抗體包裝25g
梔子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Norleucine腫瘤異常基化蛋白1抗體包裝500g
蜘蛛香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fmoc-4-iodo-D-Phe-OH腫瘤異常基化蛋白2抗體包裝25mg
植(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3,5-Diiodo-L-tyrosine缺氧誘導(dǎo)因子脯酰羥化4抗體包裝1g
乳乳球菌Lactococcus lactis 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于培養(yǎng)流行性腦脊髓膜炎抗體試劑盒金合歡;Acacetin
克雷伯氏菌Klebsiella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品流感病抗體IgG試劑盒;D(-)-Tartaric ac
乳乳球菌Lactococcus│lactis 質(zhì)量規(guī)格:>98%流感B病抗體IgG ;Formic acid
微絲染色液(R250法)圍小叢殼扁圓變種 1-Boc-4-甲酸壁降解Elisa
栗疫 BOC-D-脯氨色Elisa
新城疫病 2,4,6-氧基苯甲半纖維Elisa
尖鐮孢古巴專化型 2,4-二氯-5-氟查爾酮合成Elisa
玫瑰色紅球 三硫酮脂肪氧化Elisa
運動節(jié)桿 (S)-3-氨基-3-苯基油菜內(nèi)酯Elisa
Rhizobium multihospitium 2--3-吡啶總酚Elisa
黑曲霉 2-乙烯基萘生物堿Elisa
產(chǎn)氣莢膜梭 D型 5-氟-2-(三氟甲基)苯葡萄糖氧化Elisa
隆紋黑蛋巢 N-[(S)-(+)-1-(乙氧羰基)-3-苯基]-L-氨酸糞卟啉原ⅢElisa
Rhizobium alkalisoli 5-氯-3-甲熱休克蛋白70Elisa
節(jié)桿 N-乙基-N-(2-羥基-3-磺基)-3,5-二鈉鹽(MAOS)熱休克轉(zhuǎn)錄因子Elisa
所多瑪鹽紅 N-乙基-N-(2-羥基-3-磺基)-3-甲氧基苯鈉鹽二水合物雪花蓮凝集Elisa
山梨木糖假絲酵母 BOC-L-色氨游離蛋白Elisa
陽還原地桿 NA-酸酐有機磷Elisa