詳細介紹
商品介紹:
L-685458是一種有效的淀粉樣β蛋白前體γ分泌酶抑制劑,IC50為17nM,比作用于其他天冬氨酰蛋白酶選擇性高50-100倍。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:292632-98-5 別名:L-685,458 純度:99.57% 分子式:C??H??N?O? 分子量:672.85 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
L-685458 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
Sphingomonas koreensis腦特異性磷脂磷樣蛋白1抗體Human PARVG ELISA Kit胎盤生長因子(PLGF)ELISA Kit
球孢白僵菌跨膜蛋白TMEM176B抗體Human PARVA ELISA Kit胎盤泌乳(PL)ELISA Kit
果生鏈核盤菌富含亮重復跨膜神經元蛋白2抗體Human PARVB ELISA Kit胎盤堿性磷(PLAP)ELISA Kit
白僵菌富含亮重復跨膜神經元蛋白4抗體Human PBK ELISA Kit胎盤核糖核抑止劑(HPRI)ELISA Kit
孟氏假單胞菌LZIC蛋白抗體Human PBX1 ELISA Kit胎盤蛋白14(PP14)ELISA Kit
PL110 雜3(灰平)Lgi3蛋白抗體Human PARVA ELISA Kit胎盤蛋白13(PP13)ELISA Kit
環狀芽胞桿菌Lhx4蛋白抗體Human PBX3 ELISA Kit胎盤蛋白(PP)ELISA Kit
猴頭信號轉導分子SCDO3抗體Human PINP(N-terminal propeptide of Collagen alpha-1(I) chain) ELISA Kit胎盤催乳(HPL)ELISA Kit
慢生根瘤菌RNA聚合相關蛋白LEO1抗體Human PARVB ELISA Kit胎兒血紅蛋白(HBF)ELISA Kit
羊毛狀青霉淋巴性脈絡叢腦膜炎病蛋白抗體Human PARVG ELISA Kit胎兒纖連蛋白(fFN)ELISA Kit
粘質沙雷氏菌自噬微管相關蛋白輕鏈3A/3B抗體Human PAWR(PRKC apoptosis WT1 regulator protein) ELISA Kit他克莫司(FK506)ELISA Kit
湖泊微桿菌黃體激釋放激/促性腺激釋放激抗體Human PARVB ELISA Kit鎖鏈(DES)ELISA Kit
缺陷假單胞菌LRRC23蛋白抗體Human PASK ELISA Kit羧甲基賴(CML)ELISA Kit
新月彎孢LRRC39蛋白抗體Human PASK ELISA Kit羧化基質谷蛋白(ucMGP)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌自噬微管相關蛋白輕鏈3抗體Human PARVG ELISA Kit羧化不全骨鈣(ucOC)ELISA Kit
溶血隱秘桿菌L3MBTL3蛋白抗體Human PAQR4 ELISA Kit髓樣分化因子初次應答基因88(MYD88)ELISA Kit
馬氏副球菌Paracoccus│marcusii 質量規格:螯合劑人參皂苷Rg2
木賊鐮孢菌Gibberella│intricans Wollenw. 質量規格:>98.0%(T)人參皂苷Rg1
北極假交替單胞菌Pseudoalteromonas│arctica 質量規格:>97.0%(T)人參皂苷Rb3
淀粉樣β蛋白前體γ分泌酶抑制劑(L-685458)CRTAM CRTAM抗體氧化鈀,一水 Pd ≥75%
CSP 環子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗體海綿鈀 99.999%
C-SKI/v-SKI C-SKI抗體鉑黑 鉑含量,>99.9%,粒徑10 nm
Calcitonin 降鈣抗體反式-二氨二合鉑(II) Pt ≥64.5%
Calcitonin 降鈣抗體四溴鈀 Pd ≥20.5%
CTBP1 C端結合蛋白1抗體銠粉 99.99% metals basis
CT DNA (calf thymus DNA) 小牛胸腺DNA 抗體氧化銠,水合 銠 55%
CTGF 結締組織生長因子抗體亞鉑鈉 Pt 44.5%