詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
英文名稱:PF-06260933
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
PF-06260933是一種高度選擇性的MAP4K4小分子抑制劑,在激酶實驗和細胞實驗中的IC50值分別為3.7和160nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1811510-56-1 純度:99.69% 分子量:296.75 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
缺陷短波單胞菌磷化叉頭蛋白家族1抗體Human ZNF395 ELISA Kit雞煙酰腺嘌呤二核苷磷(NADPH)免疫試劑盒
微黃色芽孢桿菌叉頭蛋白O4抗體Human ZNF311 ELISA Kit雞血小板因子4(PF-4/CXCL4)免疫試劑盒
尖孢鐮孢磷化叉頭蛋白4抗體Human RBL1(Retinoblastoma-like protein 1) ELISA Kit雞血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒
雞傷寒沙門氏菌FMS樣酪激3Human ZNF410 ELISA Kit雞血管內皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)免疫試劑盒
腐皮鐮刀菌(都只確定鐮刀屬)磷化FMS樣酪激3Human ZNF397 ELISA Kit雞血管內皮生長因子B(VEGF-B)免疫試劑盒
葉居菌磷化FMS樣酪激3Human ZNF320 ELISA Kit雞血管內皮生長因子A(VEGF-A)免疫試劑盒
釀酒酵母磷化FMS樣酪激3Human RBP1(Retinol-binding protein 1) ELISA Kit雞血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒
釀酒酵母磷化FMS樣酪激3Human ZNF326 ELISA Kit雞血管緊張Ⅰ(ANG-Ⅰ)免疫試劑盒
冷纖維單胞菌磷化c-fos抗體Human ZNF323 ELISA Kit雞新喋呤(NEOP)免疫試劑盒
根瘤菌磷化c-fos抗體Human ZNF320 ELISA Kit雞新城疫病(NDV)抗體免疫試劑盒
盤長孢狀盤孢磷化c-fos抗體Human ZNF323 ELISA Kit雞維生H(VH)免疫試劑盒
三葉草根瘤菌缺氧誘導因子1α抑制蛋白抗體Human ZNF326 ELISA Kit雞維生D結合蛋白(VDBP)免疫試劑盒
釀酒酵母肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(N端)Human ZNF24 ELISA Kit雞褪黑(MT)免疫試劑盒
樺剝管菌補體因子H抗體Human ZNF251 ELISA Kit雞透明質(HA)免疫試劑盒
放射形根瘤菌促卵泡激抗體Human ZNF256 ELISA Kit雞銅藍蛋白(CP)免疫試劑盒
細黃鏈霉菌神經元核抗原抗體Human ZNF253 ELISA Kit雞天門冬基轉移(AST)免疫試劑盒
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規格:分析標準品Hederacolchiside E
青霉屬Penicillium│sp. 質量規格:分析標準品,>99.7%(GC)苦蘇花皂苷C
雞傷寒沙門氏菌Salmonella│gallinarum 質量規格:100mg/L,基體: 5%HNO3hederagenin 3-O-α-L-
MAP4K4抑制劑(PF-06260933)鹽地芬尼多(標準品)英文名稱: Neochlorogenic acid雙特異性酪磷化調節激DYRK2抗體包裝25g
鹽地芬尼多雜質(烯化合物)(標準品)英文名稱: Ivabradine HCl鋅指結構蛋白20抗體包裝5g
鹽地美環;去基金霉(標準品)英文名稱: XanthophyllC型凝集受體CLEC13A抗體包裝25ml
鹽地匹福林(標準品)英文名稱: Xanthophyll雙基精解2抗體包裝5ml
鹽地匹福林雜質A(標準品)英文名稱: XanthophyllD酪激衰減蛋白1抗體包裝100ml
鹽丁(標準品)英文名稱: Ticagrelor雙特異性酪磷化調節激3抗體包裝25ml
鹽丁雜質(對丁基)(標準品)英文名稱: Ticagrelor肌營養蛋白α抗體包裝500ml
鹽丁咯地爾(標準品)英文名稱: Ramosetron HCl多巴β羥化抗體包裝1g
鹽(標準品)英文名稱: Sevelamer HCl抑癌基因抗體包裝250mg
鹽度洛(標準品)英文名稱: Sevelamer carbonateDNA基轉移1抗體包裝5g
鹽多巴酚丁雜質(標準品)英文名稱: NifuroxazideDNA基轉移-3α抗體包裝1g
鹽多柔比星/鹽阿霉(標準品)英文名稱: NifuroxazideDNA基轉移-3β抗體包裝5g
鹽(標準品)英文名稱: Cepharanthine死亡受體3抗體包裝5g
鹽多沙普侖(標準品)英文名稱: Cepharanthine死亡受體4抗體包裝1g
鹽多佐;鹽杜塞酰(標準品)英文名稱: Caspofungin Acetate精神分裂癥易感基因抗體包裝250mg