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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit | 500T | 1～3天 |
商品介紹：
CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit 是基于CFDA, SE對細胞進行示蹤及增殖檢測的試劑盒，由CFDA,SE粉末、溶劑及相關細胞染色緩沖液組成，該試劑盒主要工作原理為：CFDA, SE具有細胞膜滲透性，本身不具有熒光發光性。當通過被動運輸穿透細胞膜進入活細胞后，可被胞漿內的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（carboxyfluorescein succinimidyl ester, CFSE），后者可發強烈的綠色熒光，不能穿透細胞膜，能完好的保留在胞內。CFSE還可自發性并不可逆地與細胞內的氨基結合從而偶聯到細胞蛋白質上，同時過量且未被偶聯的CFDA, SE通過被動擴散回到細胞外培養基內，被后續清洗步驟所清除。經CFDA, SE標記的非分裂細胞的熒光非常穩定，穩定標記的時間可達數月，因此非常適用于細胞群落分析。 CFDA, SE標記細胞的熒光非常均一，優于以前使用的其他細胞示蹤熒光探針如PKH26，并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過程中，CFSE 標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，熒光強度變為親代細胞的一半，通過流式細胞儀（FL1通道）根據熒光強度的不同，可檢測出未分裂細胞，分裂一次（1/2的熒光強度），二次（1/4的熒光強度），三次（1/8的熒光強度），以及更多分裂次數的細胞。CFSA，SE可檢測分裂次數多達八次甚至更多。經CFDA, SE標記的細胞可用于體外和體內增殖研究，且具有不會使鄰近細胞染色的功能。CFDA, SE常用于淋巴細胞的增殖檢測，也可用于成纖維細胞，自然殺傷細胞，造血祖細胞等其他細胞的增殖檢測。 CFDA, SE標記細胞呈綠色熒光，Ex=494nm，Em=521nm，除了流式細胞儀檢測細胞增殖外，還可用熒光酶標板定量活細胞數目，或者用熒光顯微鏡進行均一染色的細胞示蹤觀察。 本品為CFDA，SE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒，包含配制CFDA，SE儲存液所需的溶劑和細胞標記用的染色緩沖液，簡化了實驗前期準備工作。另，CFDA,SE標記細胞一般15min即可完成，對于不同細胞，需要自行摸索佳標記時間。按照每個樣本的標記體積為2ml計算。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
解整合金屬蛋白9(ADAM9)英文名稱：ADAM9 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白62抗體包裝250mg
解整合金屬蛋白8(ADAM8)英文名稱：ADAM8 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白64抗體包裝25g
結合珠蛋白(Hpt)英文名稱：Hpt ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白72抗體包裝5g
接觸蛋白1(CNTN1)英文名稱：CNTN1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白73抗體包裝100g
窖蛋白(CAV1)英文名稱：CAV1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白74B抗體包裝25g
角質轉谷酰胺(TGM1)英文名稱：TGM1 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框25抗體包裝5g
角蛋白9(KRT9)英文名稱：KRT9 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框42抗體包裝100g
角蛋白18(KRT18)英文名稱：KRT18 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框44抗體包裝25g
膠質細胞系來源神經營養因子(GDNF)英文名稱：GDNF ELISA Kit19號染色體開放閱讀框48抗體包裝500g
腱蛋白樣蛋白2(CHRDL2)英文名稱：CHRDL2 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框50抗體包裝100g
堿性鞘磷脂磷二酯(Alk-Smase)英文名稱：Alk-Smase ELISA Kit19號染色體開放閱讀框51抗體包裝25g
堿性成纖維細胞生長因子(FGF2)英文名稱：FGF2 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框52抗體包裝5g
剪接因子3B亞基3(SF3B3)英文名稱：SF3B3 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框55抗體包裝1g
間隙連接蛋白43(CX43)英文名稱：CX43 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框56抗體包裝5g
間皮(MSLN)英文名稱：MSLN ELISA Kit19號染色體開放閱讀框57抗體包裝25g
: T63資源名稱: 傷寒沙門氏菌 質量規格：HPLC>98%,標準品脂肪結合蛋白4試劑盒羊蹄;Nepodin
米曲霉Aspergillus│oryzae 質量規格：> 99%,EP脂肪甘油三酯脂試劑盒異肥皂草苷;Isosaponarin
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質量規格：HPLC>98%,標準品脂肪分化相關蛋白試劑盒異七葉皂苷Ib;Isoescin Ib
細胞增殖與示蹤檢測試劑盒露濕粘座孢霉（或露濕漆斑） 4-(4-氟苯甲酰基)丁酸中期因子Elisa
殼囊孢屬 三氟磺酸中性粒彈性蛋白Elisa
穗狀平臍蠕孢 美羅培南側鏈中性粒防御-1Elisa
芽胞桿 泰諾福韋中性粒防御1-3Elisa
紫色直絲鏈霉 固甾酮中性粒明膠相關脂質運載蛋白Elisa
布氏乳桿 4-溴苯基乙酸乙酯中性內肽;腦啡肽Elisa
黑木耳 2,5-二溴苯甲腫瘤M2型酮酸激Elisa
豬丹絲 氨基二酸二乙酯鹽酸鹽腫瘤標志物Elisa
干燥棒桿* 腫瘤抗原Elisa
果生鏈核盤 3,4,5-三氟腫瘤壞死因子αElisa
青紫鏈霉 8-氟喹唑啉-（2,4）二酮腫瘤壞死因子α誘導蛋白6Elisa
黑荊樹根瘤 2,3,4,5-四氟腫瘤壞死因子α轉化Elisa
根瘤 3-氯-2,5-二甲基吡腫瘤壞死因子βElisa
藏紅深黃孔 N,N-二甲基甘氨酸腫瘤壞死因子γElisa
中華根霉 2-溴-3-氟腫瘤壞死因子可溶性受體ⅠElisa
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