商品介紹:
英文名稱:Erastin 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg Erastin是鐵誘導的細胞死亡激活劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:571203-78-6 純度:99.54% 分子量:547.04 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
鐵誘導細胞死亡激活劑 | Erastin | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凝結芽胞桿菌陽離子轉運調控樣蛋白1抗體Human Ang1-7(Angiotensin 1-7) ELISA Kit人可溶性CD38(sCD38)免疫試劑盒
金產(chǎn)色鏈霉菌DNA斷裂因子相似蛋白A抗體Human S1P(Sphingosine 1 Phosphate) ELISA Kit人可溶性CD30配體(sCD30L)免疫試劑盒
蟲草屬DNA斷裂因子相似蛋白B抗體Human ACVB(Activin B) ELISA Kit人可溶性CD28(sCD28)免疫試劑盒
*銀耳、白木耳順鉑耐藥相關蛋白9抗體Human ADAMTS12(A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 12) ELISA Kit人可溶性CD276分子(sCD276/sB7-H3)免疫試劑盒
羽扇豆根瘤菌22號染色體開放閱讀框40抗體Human SKP2(S-phase kinase-associated protein 2) ELISA Kit人可溶性CD21(CR2/sCD21)免疫試劑盒
香菇嗜粒趨化蛋白3抗體Human SPAG1(Sperm-associated antigen 1) ELISA Kit人可溶性CD163分子(sCD163)免疫試劑盒
阿爾及利亞擬盤多毛孢21號染色體開放閱讀框33抗體Human IKBKG(NF-kappa-B essential modulator) ELISA Kit人可溶性CD146分子(sCD146)免疫試劑盒
孟氏假單胞菌角蛋白15抗體Human SCAMP1(Secretory carrier-associated membrane protein 1) ELISA Kit人可溶性CD100(sCD100)免疫試劑盒
新月彎孢霉角蛋白14抗體Human SKP2(S-phase kinase-associated protein 2) ELISA Kit人免疫試劑盒
矮棒曲霉神經(jīng)NB3特定蛋白抗體Human SPAG1(Sperm-associated antigen 1) ELISA Kit人顆粒體蛋白(GRN)免疫試劑盒
栗疫菌促胃泌受體抗體Human CHID1(Chitinase domain-containing protein 1) ELISA Kit人顆粒溶(GNLY)免疫試劑盒
丁香鏈霉菌單克抗體Human DUSP1(Dual specificity protein phosphatase 1) ELISA Kit人顆粒H(GZMH/CGL2/CTSGL2)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌2號染色體開放閱讀框72抗體Human PARP2(Poly [ADP-ribose] polymerase 2) ELISA Kit人顆粒B(Gzms-B)免疫試劑盒
腸沙門氏菌腸炎亞種間粘附分子3抗體Human GPX3(Glutathione peroxidase 3) ELISA Kit人顆粒A(Gzms-A)免疫試劑盒
脫葉鏈霉菌染色質結合蛋白Cbx8抗體Human CTSF(Cathepsin F) ELISA Kit人柯薩奇病腺病受體(CXADR)免疫試劑盒
運動發(fā)酵單胞菌降鈣抗體Human MYBPC3(Myosin-binding protein C, cardiac-type) ELISA Kit人柯薩奇病IgE(Cox V-IgE)免疫試劑盒
球形賴芽孢桿菌Lysinibacillus│sphaericus 質量規(guī)格:用于液相色譜-質譜的離子對試劑Ⅲ型膠原試劑盒阿彼斯基姆
: ATCC53010資源名稱: 大腸埃希氏菌 質量規(guī)格:用于液相色譜-質譜的離子對試劑3氧代5α類固4脫氫2試劑盒澳茄新堿
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質量規(guī)格:用于液相色譜-質譜的離子對試劑3型1-磷鞘受體試劑盒7-基-4-基
鐵誘導細胞死亡激活劑棒孢擬盤多毛孢 二苯氨基-4-苯甲生長釋放Elisa
癬囊腔 1-甲基咪唑-5-甲酸核連蛋白2Elisa
解淀粉芽孢桿 2,4-二溴噻唑β-防御2Elisa
竹蓀D優(yōu)1號 2,4-二噻唑血清總補體Elisa
副豬嗜血桿 2-溴噻唑-5-羧酸乙酯信號6BElisa
農(nóng)研所溶桿 (R)-2-甲基吡咯烷過氧化物1Elisa
胡椒枯萎病 2-硝基二苯硫半乳糖Elisa
分枝節(jié)桿 5,6-二煙酸基質金屬蛋白抑制因子Elisa
大腸埃希 4-乙酰氧基-2, 5-二甲基 -3-呋喃酮基質金屬蛋白10Elisa
枯草芽孢桿 4-酮糖原合成激3βElisa
柯達酵母屬 氘代-d5腺苷酸活化蛋白激Elisa
靈芝 1,4-二溴苯-d4酰基轉移Elisa
Paraburkholderia sp. β-D-半乳糖五乙酸酯二氧化Elisa
熒光假單胞 卡鉑球蛋白輕鏈lambdaElisa
釀酒酵母 間二芐硫球蛋白輕鏈kappaElisa