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詳細介紹
產品屬性：
中文名稱：DNA損傷/斷裂分析試劑盒
英文名稱：
產品規格：100T
發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研
商品介紹：
哺乳動物細胞中，雙鏈斷裂（DSB）的基因組DNA 是一種潛在的致命病變。現已確知DSB 的形成為導致H2A 組蛋白的磷酸化。具體來說，在DNS 雙鏈斷裂處形成DNA 灶的過程中，DNA 損傷誘導劑可以誘導組蛋白變體H2AX 的在Ser139 位點上的磷酸化。磷酸化的H2AX 有利于募集蛋白質從而幫助DSB 部位進行修復。在哺乳動物細胞中，磷脂酰肌醇3-激酶樣蛋白激酶，如ATM，ATR、DNA-PKCs 蛋白，以及磷酸化的組蛋白變體，H2AX。 我司DNA 損傷試劑盒通過高內涵分析可以對于同一細胞的健康參數、遺傳毒性和細胞毒性進行同時定量分析。通過以磷酸化的H2AX（Ser139）抗體檢測DNA 損傷，可以對遺傳毒性進行分析，進而反映DNA 損傷情況。而細胞毒性的分析是通過試劑盒提供的死活細胞核染料進行染色區分鑒定的。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
野鼠色基因相關蛋白(AGRP)英文名稱：AGRP ELISA Kit鈣調調節蛋白相關蛋白抗體包裝1g
巖藻糖基轉移8(FUT8)英文名稱：FUT8 ELISA Kit緊密連接蛋白1抗體包裝250mg
煙酰胺腺嘌呤二核苷磷(NAADP)英文名稱：NAADP ELISA Kit1號染色體開放閱讀框149抗體包裝1g
亞硫鹽氧化(SUOX)英文名稱：SUOX ELISA Kit磷化原癌基因c-kit抗體包裝250mg
血幼(HJV)英文名稱：HJV ELISA Kit磷化原癌基因c-kit抗體包裝1g
血小板因子4(PF4)英文名稱：PF4 ELISA Kit磷化淋巴衍生C-型凝集抗體包裝250mg
血小板衍生生長因子受體樣蛋白(PDGFRL)英文名稱：PDGFRL ELISA Kit2號染色體開放閱讀框39抗體包裝5g
血小板衍生生長因子C(PDGFC)英文名稱：PDGFC ELISA Kit2號染色體開放閱讀框49抗體包裝1g
血小板衍生生長因子B(PDGFB)英文名稱：PDGFB ELISA Kit2號染色體開放閱讀框50抗體包裝250mg
血小板衍生生長因子A(PDGFA)英文名稱：PDGFA ELISA Kit科凱恩氏綜合癥相關蛋白/早衰蛋白CSA抗體包裝5g
血小板激活因子乙酰解2(PAFAH2)英文名稱：PAFAH2 ELISA Kit磷化角蛋白8抗體包裝100g
血小板激活因子(PAF)英文名稱：PAF ELISA Kit磷化角蛋白8抗體包裝25g
血小板反應蛋白4(THBS4)英文名稱：THBS4 ELISA Kit磷化角蛋白18抗體包裝5g
血小板反應蛋白3(THBS3)英文名稱：THBS3 ELISA Kit胞粘蛋白2抗體包裝5ml
血小板反應蛋白2(THBS2)英文名稱：THBS2 ELISA Kit色CPA6抗體包裝1g
ADP核糖基化因子5抗體白介1家族成員9(IL1F9)N/A
DNA損傷/斷裂分析試劑盒多主葡萄殼 2-氯喹噁啉衰老關鍵蛋白1檢測試劑盒
短密青霉 四氟鋁酸雙酚A檢測試劑盒
黑曲霉 2,6-二氯-3-硝基吡啶雙氫睪酮檢測試劑盒
香菇 2-基-4,5-咪唑二羧酸二乙酯雙糖鏈蛋白聚糖檢測試劑盒
黑曲霉 7-氯-1,2,3,4-四氫苯并[B]氮雜卓-5-酮水通道蛋白1檢測試劑盒
釀酒酵母 3-溴-2-氟三氟甲苯水通道蛋白2檢測試劑盒
梨輪紋病 4-(氨甲基)苯鹽酸鹽水通道蛋白4檢測試劑盒
枯草芽孢桿 N-甲基-4-酮水通道蛋白4抗體檢測試劑盒
草分枝桿 Fmoc-N'-乙酰基-L-賴氨酸水通道蛋白5檢測試劑盒
線殼囊孢(座線孢) 2-氨基-5-嘧啶水通道蛋白6檢測試劑盒
百脈根中間根瘤 (S)-2-芴甲氧羰基氨基己二酸 6-叔丁酯絲氨酸檢測試劑盒
煙色齒耳 4-雙苯酸頻那酯絲氨酸;蘇氨酸蛋白激酶B-raf檢測試劑盒
櫟 2-氨基-6-氟吡啶絲氨酸;蘇氨酸蛋白磷酸酶檢測試劑盒
反硝化鹽單胞 對基苯乙酮絲裂原活化蛋白激酶1檢測試劑盒
薄層屬 4-甲氧基-1-萘甲絲裂原活化蛋白激酶3檢測試劑盒
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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