商品介紹:
英文名稱:topoisomeraseⅡ inhibitor 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|100mg|200mg|500mg Etoposide是一種有效的拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(topoisomeraseⅡ)抑制劑,能夠抑制DNA合成。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:33419-42-0 別名:VP-16;VP-16-213 純度:99.84% 分子量:588.56 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ抑制劑(Etoposide)
英文名稱:topoisomeraseⅡ inhibitor
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|100mg|200mg|500mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
釀酒酵母9號染色體開放閱讀框61抗體Human ALDOA(Aldolase A, Fructose Bisphosphate) ELISA Kit人可溶性胸苷激1(TK1)免疫試劑盒
黑曲霉C末端結(jié)合蛋白2抗體Human Anti-AChR(Anti-Acetylcholine Receptor Antibody) ELISA Kit人可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)免疫試劑盒
灰孔多年臥孔菌21號染色體開放閱讀框13抗體Human ALP(Alkaline Phosphatase) ELISA Kit人可溶性間皮相關(guān)肽(SMRP)免疫試劑盒
漏斗狀側(cè)耳冠蛋白3抗體Human AMA IgA(Anti-Myelin antibody IgA) ELISA Kit人可溶性核因子κB受體活化因子(sRANK)免疫試劑盒
釀酒酵母周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human anti AMPH(anti amphiphysin) ELISA Kit人可溶性淀粉前體蛋白α(sAPPα)免疫試劑盒
糙皮側(cè)耳膽固25羥化抗體Human ANG I(Angiotensin I) ELISA Kit人可溶性彈性蛋白片段(sELAF)免疫試劑盒
佐久氏菌天冬-胱特異性蛋白家族抗體Human ANG II(Angiotensin II) ELISA Kit人可溶性補(bǔ)體激活產(chǎn)物SC5b9 免疫試劑盒
總狀毛霉鈣營養(yǎng)蛋白1/鈣結(jié)合蛋白8抗體Human AMPK(Phosphorylated Adenosine Monophosphate Activated Protein Kinase) ELISA Kit人可溶性白介7受體(sIL-7R)免疫試劑盒
釀酒酵母鈣結(jié)合蛋白5/3抗體Human anti AMPH(anti amphiphysin) ELISA Kit人可溶性P選擇(sP-selectin)免疫試劑盒
稻黑孢霉CD98輕鏈抗體Human ANG I(Angiotensin I) ELISA Kit人可溶性O(shè)X40L(sOX40L)免疫試劑盒
缺陷短波單胞菌胰輔脂抗體Human AMPK(Phosphorylated Adenosine Monophosphate Activated Protein Kinase) ELISA Kit人可溶性Endoglin(sENG/sCD105)免疫試劑盒
無17號染色體開放閱讀框104抗體Human ADRP(Adipose Differentiation Related Protein) ELISA Kit人可溶性CD86(B7-2/sCD86)免疫試劑盒
靈芝(紅芝,赤芝)(可訂購)和調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄蛋白抗體Human A-GHR(Acylated Ghrelin) ELISA Kit人可溶性CD80(sCD80)免疫試劑盒
孟氏假單胞菌富半胱肝結(jié)合蛋白61抗體Human AGGF1(Angiogenic Factor with G Patch and FHA Domains 1) ELISA Kit人可溶性CD44變體9(sCD44-v9)免疫試劑盒
孢吸水鏈霉菌2號染色體開放閱讀框65抗體Human his(Histamine) ELISA Kit人可溶性CD40配體(sCD40L)免疫試劑盒
白井盤多毛孢β連環(huán)蛋白樣蛋白1抗體Human his(Histamine) ELISA Kit人可溶性CD40免疫試劑盒
核盤菌Sclerotinia│sclerotiorum 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC,≥99.8%(GC)Ⅲ型前膠原C端肽試劑盒貝萼皂苷元
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC,≥99.5%Ⅲ型前膠原試劑盒白花前胡丁
淡紫灰鏈霉菌Streptomyces│lavenduac 質(zhì)量規(guī)格:離子對色譜用試劑Ⅲ型膠原蛋白試劑盒扁柏雙黃
拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ抑制劑(Etoposide)大腸埃希 3-基-6-甲基-2-吡啶酮滋養(yǎng)層表面抗原2Elisa
谷氨酸棒桿 1-溴十七氟辛烷蛋白酪氨酸磷酸1BElisa
鏈霉 全氟代丁烷顆粒BElisa
平臍儒孢 2-溴-5-乙Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽Elisa
硬水黃桿 3,5-二乙酸Ⅰ型膠原交聯(lián)氨基端肽Elisa
卷曲鏈霉 己(乙酸根)-mu-氧三(水)三銠(III)乙酸鹽吡啶酚Elisa
膠孢 2-烯氧基四氫吡喃FK506結(jié)合蛋白12-雷帕霉相關(guān)蛋白Elisa
Sandarakinorhabdus 十二烷基異酸酯線粒體異檸檬酸脫氫Elisa
毛木耳 三氟化乙絡(luò)合物 溶液胞漿異檸檬酸脫氫Elisa
枯草芽孢桿 單β-聯(lián)蛋白Elisa
馬賽 4-溴-3-甲膽鹽磺基轉(zhuǎn)移Elisa
大腸埃希氏 二-μ-雙[5-羥基-2-[1-(肟基)乙基]苯基]鈀(II)二聚體3-酮脂酰硫解Elisa
(S)-(-)-1-(4-)乙胞外銅鋅超氧化物歧化Elisa
釀酒酵母 N,N'-羰基二(1,2,4-三氮唑)Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激2Elisa
塔賓曲霉 4-氨基-1-甲基乙酰CoA羧化Elisa