詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:3×50ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
用途: 立克次體和病毒包涵體染色,改良馬氏法 注意事項: 立克次體和一些病毒包涵體呈紅色,背景呈藍色。 儲存條件:4℃,避光,6個月 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
藤黃短小桿菌鹽轉(zhuǎn)運三磷腺苷抗體Human MAN1A2 ELISA Kit小鼠
蘇云金芽胞桿菌櫪木亞種精tRNA的蛋白轉(zhuǎn)移1抗體Human MAP4K4 ELISA Kit小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)免疫試劑盒
南方鹽單胞菌共濟失調(diào)蛋白7樣1抗體Human MAP7 ELISA Kit小鼠組織型纖溶原激活劑(t-PA)免疫試劑盒
疣孢鏈霉菌孤獨癥易感基因2蛋白抗體(自閉癥相關蛋白1)Human MAN2B2 ELISA Kit小鼠組織多肽抗原(TPA)免疫試劑盒
聚生殼菌脊髓小腦共濟失調(diào)2型蛋白抗體Human MANBAL ELISA Kit小鼠組織蛋白去乙酰化2(Hdac2/Yy1bp)免疫試劑盒
傳染性法氏囊病病芳香基硫酯H抗體Human MAP7 ELISA Kit小鼠組織蛋白K(cath-K)免疫試劑盒
青霉屬溴區(qū)結(jié)構(gòu)域相鄰鋅指蛋白1A抗體Human MAP4K5 ELISA Kit小鼠組蛋白脫乙酰(HDAC1)免疫試劑盒
水稻節(jié)桿菌載脂蛋白1抗體Human MANEA ELISA Kit小鼠組蛋白去乙酰化4(HDAC4)免疫試劑盒
暗黑鏈霉菌突觸融合結(jié)合蛋白6抗體Human MAP4K3 ELISA Kit小鼠組蛋白去乙酰化3(HDAC3)免疫試劑盒
挪威假絲酵母精1抗體Human MALT1 ELISA Kit小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)免疫試劑盒
平滑假絲酵母腺苷激結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human MAML1(Mastermind-like protein 1) ELISA Kit小鼠組(HIS)免疫試劑盒
盤長孢狀盤孢三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白7抗體Human MAML3 ELISA Kit小鼠總蛋白C(TPC)免疫試劑盒
中國臺灣假黃單胞菌磷化鈉ATPα1多肽抗體Human MAN2B2 ELISA Kit小鼠總膽紅(TB)免疫試劑盒
小孢鏈霉菌Na+/K+-ATPase α1 鈉ATPα1抗體Human MAN1A2 ELISA Kit小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)免疫試劑盒
磚紅鐮刀菌肌動蛋白樣蛋白6B抗體Human MANBAL ELISA Kit小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGF-β3)免疫試劑盒
大腸埃希菌脊髓小腦共濟失調(diào)蛋白7抗體Human MANEA ELISA Kit小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)免疫試劑盒
彩色豆馬勃Pisolithus│tinctorius (Pers.) Coker & Couch 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR表皮活化肽因子試劑盒鹽伊立替康
云芝Trametes│versicolor (L.) Lloyd 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白7試劑盒愈創(chuàng)木酚
溶血不動桿菌基因型4Acinetobacter│haemolyticus/genospecies 4 質(zhì)量規(guī)格:AR,≥99%表皮生長因子受體2試劑盒氧化石蒜堿
立克次體染色液(改良Macchiavello法)茶葉枯炭疽盤孢* N-代酞酰亞凝血因子ⅩⅢElisa
立枯絲核 苯基環(huán)酮神經(jīng)特異性烯化Elisa
環(huán)帶青霉 鄰氨基乙酰苯糖蛋白β5Elisa
灰平鏈霉 N-芐氧羰基-L-天冬氨酸-4-芐酯血管內(nèi)皮生長因子CElisa
文昌小單孢 6-溴異喹啉異檸檬酸裂解Elisa
產(chǎn)腸大腸埃希氏 1,2,3,4-四氫化喹喔啉抗ENA抗體Elisa
古巴光蓋傘* 1-芐基-3-甲基-4-酮傳染性胃腸炎病抗體Elisa
釀酒酵母 2-乙酰基-4-噻吩精合成Elisa
藤黃微球 2,7-二甲氧基萘內(nèi)皮酯Elisa
芽胞桿 4--7-三氟甲基喹啉鈣蛋白Elisa
彩色豆馬勃 4-氟-2,3-二酮犬細小病IgA抗體Elisa
死亡谷芽孢桿 5-溴-1-戊肥大蛋白1Elisa
魔鬼弧 4,5-二甲基-3,6-二噠一氧化氮合運輸因子Elisa
黃桿屬 5-甲基-3-氨基-2-吡啶α1-防御Elisa
大孢鏈霉 5-甲基-3-氨基-2-吡啶組蛋白脫乙酰基6Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)