公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:KCa3.1離子通道抑制劑(NS6180)
英文名稱:NS6180
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
NS6180是KCa3.1離子通道高效選擇性抑制劑,IC50值9nM,阻止T細(xì)胞活化和炎癥反應(yīng)。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:353262-04-1 分子量:323.33 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
硫磺菌雙特異性蛋白磷10抗體Human STARD13 (StAR-related lipid transfer protein 13) ELISA KIT人白介8(IL-8/CXCL8)自身抗體免疫試劑盒
根瘤菌雙特異性蛋白磷5抗體Human STATH (Statherin) ELISA KIT人白介8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒
Leminorella richardii磷化動力蛋白1抗體Human CERK(Ceramide kinase) ELISA Kit人白介7(IL-7)免疫試劑盒
硝孢鏈霉菌動力蛋白1抗體Human SYNRG (Synergin gamma) ELISA KIT人白介6受體(IL-6R)免疫試劑盒
色串孢屬磷化動力蛋白1抗體Human SRD5A2 (3-oxo-5-alpha-steroid 4-dehydrogenase 2) ELISA KIT人白介6(IL-6)免疫試劑盒
噬尼古丁節(jié)桿菌腦啡肽A抗體Human SLBP (Histone RNA hairpin-binding protein) ELISA KIT人白介5受體alpha(IL5RA)免疫試劑盒
直立枝孢強(qiáng)直性肌營養(yǎng)不良相關(guān)蛋白9抗體Human SGPP2 (Sphingosine-1-phosphate phosphatase 2) ELISA KIT人白介5(IL-5)免疫試劑盒
釀酒酵母DYX1C1蛋白抗體Human SUCNR1 (Succinate receptor 1) ELISA KIT人白介4受體(IL4R/CD124)免疫試劑盒
柴油食烷菌E3泛蛋白連接dzip3抗體Human SRSF7 (Serine/arginine-rich splicing factor 7) ELISA KIT人白介4(IL-4)免疫試劑盒
蕈狀芽孢桿菌三磷腺苷依賴解旋DDX23抗體Human FCGRT(IgG receptor FcRn large subunit p51) ELISA Kit人白介37(IL-37)免疫試劑盒
茫崖諾卡氏菌多能發(fā)育相關(guān)基因5抗體Human SI (Sucrase-isomaltase, intestinal) ELISA KIT人白介35(IL-35)免疫試劑盒
泡盛曲霉三磷腺苷依賴解旋DDX3抗體Human SREK1 (Splicing regulatory glutamine/lysine-rich protein 1) ELISA KIT人白介33(IL-33)免疫試劑盒
假芽胞桿菌屬磷化三磷腺苷依賴解旋DDX3抗體Human GGT1(Gamma-glutamyltranspeptidase 1) ELISA Kit人白介32(IL-32)免疫試劑盒
廣島鏈霉菌迪格弗-梅爾基奧爾-克勞森綜合征相關(guān)蛋白抗體Human SULF1(Extracellular sulfatase Sulf-1) ELISA Kit人白介31(IL-31)免疫試劑盒
天目山類芽孢桿菌雙氧化激活因子2抗體Human SHFM1 (26S proteasome complex subunit DSS1) ELISA KIT人白介3(IL-3)免疫試劑盒
邊緣假單胞菌RNA結(jié)合泛連接DZIP3抗體Human SVIL (Supervillin) ELISA KIT人白介2誘導(dǎo)的T激(ITK)免疫試劑盒
鐮孢屬Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:1%鹽山楂
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格:100(20℃)µg/mL,基體: 1%HNO3棕矢車菊
球孢白僵菌Beauveria│bassiana 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml異芒果苷
KCa3.1離子通道抑制劑(NS6180)Medroxyprogesterone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Famciclovir磷化CD19抗體包裝250mg
Megestrol Acetate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fludarabine Phosphate 趨化因子CCL21抗體包裝1g
Megestrol(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Penciclovir表面趨化因子受體2A抗體包裝10g
Meprednisone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Itraconazole表面趨化因子受體2B抗體包裝25g
Methylprednisolone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Itraconazole表面趨化因子受體2抗體包裝100mg
Mevastatin(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fluconazole金屬肽鏈內(nèi)切抗體包裝100mg
Mifepristone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fluconazole鈣介質(zhì)抗體包裝1g
Milnacipran HCl(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ziprasidone HCl表面趨化因子受體6抗體包裝5g
Minoxidil(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ziprasidone HCl胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子抗體包裝100mg
Mirtazapine(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Escitalopram Oxalate半胱蛋白蛋白-6抗體(N端)包裝100mg
Mizolastine(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Escitalopram OxalateCSMD1抗體包裝10mg
Mometasone furoate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Racecadotril煙堿型乙酰膽堿受體α4抗體包裝25g
N-(4-酰基)-酪(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Racecadotril表面趨化因子受體9抗體包裝5g
N-基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Acetylspiramycin表面趨化因子受體5抗體包裝25g
N-基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nilotinib胱抑C/半胱蛋白抑制劑C抗體包裝5g